双酚A单克隆抗体的研制及免疫学检测方法的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-23页 |
| ·双酚A概述 | 第11-16页 |
| ·双酚A的理化性质 | 第11-12页 |
| ·双酚A的用途 | 第12页 |
| ·双酚A的污染情况 | 第12-13页 |
| ·双酚A的危害性 | 第13-14页 |
| ·双酚A的残留限量标准 | 第14-15页 |
| ·双酚A的降解方法 | 第15-16页 |
| ·双酚A残留检测方法研究进展 | 第16-21页 |
| ·紫外分光光度法 | 第17页 |
| ·气相色谱法 | 第17-18页 |
| ·高效液相色谱法 | 第18页 |
| ·极谱法 | 第18-19页 |
| ·免疫分析法 | 第19-21页 |
| ·本课题的研究意义 | 第21-22页 |
| ·本课题的研究思路及内容 | 第22-23页 |
| 第2章 双酚A人工抗原的合成与鉴定 | 第23-28页 |
| ·材料与仪器 | 第23-24页 |
| ·材料与试剂 | 第23页 |
| ·溶液配制 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-25页 |
| ·双酚A免疫抗原的合成 | 第24页 |
| ·双酚A检测抗原的合成 | 第24-25页 |
| ·双酚A人工抗原的鉴定 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-26页 |
| ·双酚A半抗原及完全抗原的紫外扫描结果 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| ·连接臂的选择 | 第26页 |
| ·载体的选择 | 第26-27页 |
| ·偶联方法的选择 | 第27页 |
| ·本章小结 | 第27-28页 |
| 第3章 双酚A单克隆抗体的制备 | 第28-42页 |
| ·材料与仪器 | 第28-29页 |
| ·实验动物与细胞 | 第28页 |
| ·试剂和材料 | 第28-29页 |
| ·溶液配制 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-36页 |
| ·动物免疫 | 第29-30页 |
| ·抗血清效价测定 | 第30页 |
| ·抗双酚A多克隆抗体的特异性测定 | 第30-31页 |
| ·细胞融合 | 第31-33页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第33-34页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化 | 第34-35页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第35页 |
| ·单克隆抗体的大量生产 | 第35页 |
| ·单克隆抗体腹水的纯化 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体蛋白含量的测定 | 第36页 |
| ·抗体亚型的鉴定 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-39页 |
| ·免疫血清效价及特异性的测定 | 第36-37页 |
| ·细胞融合 | 第37页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选及亚克隆 | 第37-38页 |
| ·注射杂交瘤细胞的小鼠形态变化 | 第38-39页 |
| ·单克隆抗体蛋白含量的确定 | 第39页 |
| ·抗体亚型的鉴定 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·细胞融合 | 第39-40页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选及克隆 | 第40页 |
| ·腹水的纯化 | 第40-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 双酚A免疫学检测方法的建立及应用 | 第42-60页 |
| ·材料与仪器 | 第42-43页 |
| ·试剂和材料 | 第42-43页 |
| ·溶液配制 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-48页 |
| ·检测抗原包被浓度及抗体稀释度的确定 | 第43-44页 |
| ·间接竞争ELISA操作步骤 | 第44页 |
| ·双酚A标准品稀释液的优化 | 第44-45页 |
| ·抗体稀释缓冲液pH值的优化 | 第45页 |
| ·ELISA标准工作曲线的建立及检测限的确定 | 第45页 |
| ·抗体特异性的测定 | 第45页 |
| ·塑料瓶装矿泉水双酚A加标回收实验 | 第45-46页 |
| ·间接ELISA法测定儿童血清中双酚A含量 | 第46-47页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)法 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-58页 |
| ·检测抗原包被浓度及抗体稀释度的确定 | 第48-49页 |
| ·双酚A标准品稀释液的优化 | 第49-50页 |
| ·抗体稀释缓冲液pH值的优化 | 第50页 |
| ·ELISA标准工作曲线的建立及检测限的确定 | 第50-51页 |
| ·抗体特异性的测定 | 第51-52页 |
| ·塑料瓶装矿泉水双酚A加标回收实验 | 第52页 |
| ·间接ELISA法测定儿童血清中双酚A含量 | 第52-55页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)法 | 第55-58页 |
| ·讨论 | 第58页 |
| ·本章小结 | 第58-60页 |
| 第5章 结论与展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
