羊痘病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-18页 |
| ·概述 | 第9页 |
| ·病原学 | 第9-11页 |
| ·流行病学特点 | 第11-12页 |
| ·临床症状及病理变化 | 第12页 |
| ·诊断方法 | 第12-16页 |
| ·病原学诊断 | 第12-13页 |
| ·病理学诊断 | 第13页 |
| ·血清学诊断 | 第13-15页 |
| ·分子生物学诊断 | 第15-16页 |
| ·羊痘的疫苗及免疫 | 第16-17页 |
| ·羊痘的防制 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-24页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·病毒株 | 第18页 |
| ·病料 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-24页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第18-19页 |
| ·标准阳性质粒模板的制备 | 第19-22页 |
| ·实时荧光定量PCR试验参数的优化 | 第22-23页 |
| ·实时荧光定量PCR反应体系与反应参数的建立 | 第23页 |
| ·实时荧光定量PCR标准曲线的制备 | 第23页 |
| ·特异性试验 | 第23-24页 |
| ·灵敏性试验 | 第24页 |
| ·重复性试验 | 第24页 |
| ·实时荧光定量PCR检测临床样品 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-35页 |
| ·标准阳性质粒模板的制备 | 第24-26页 |
| ·常规PCR的扩增结果 | 第24-25页 |
| ·重组质粒PCR鉴定结果 | 第25页 |
| ·重组质粒的测序结果 | 第25-26页 |
| ·质粒拷贝数计算结果 | 第26页 |
| ·实时荧光定量PCR试验参数的优化结果 | 第26-29页 |
| ·退火温度优化结果 | 第26-27页 |
| ·引物浓度优化结果 | 第27-28页 |
| ·探针浓度优化结果 | 第28-29页 |
| ·实时荧光定量PCR标准曲线的制备结果 | 第29-30页 |
| ·特异性试验结果 | 第30-31页 |
| ·灵敏性试验结果 | 第31-34页 |
| ·重复性试验结果 | 第34页 |
| ·双重实时荧光定量PCR临床样品检测结果 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 作者简介 | 第44页 |
