H7N3亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的建立
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-23页 |
| ·禽流感病毒的概述 | 第9-10页 |
| ·禽流感病毒的结构和复制 | 第10-12页 |
| ·禽流感病毒致病性的分子基础 | 第12-16页 |
| ·血凝素蛋白 | 第12-13页 |
| ·神经氨酸酶蛋白 | 第13页 |
| ·核蛋白 | 第13页 |
| ·基质蛋白 | 第13-14页 |
| ·NS1与NS2蛋白 | 第14页 |
| ·聚合酶复合体 | 第14-16页 |
| ·禽流感的诊断技术 | 第16-19页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第16页 |
| ·免疫学诊断技术 | 第16-17页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第17-19页 |
| ·新型禽流感诊断技术 | 第19页 |
| ·H7亚型禽流感的流行历史及现状 | 第19页 |
| ·A型流感反向遗传操作系统的发展与应用 | 第19-22页 |
| ·A型流感病毒反向遗传操作系统的发展 | 第20-21页 |
| ·流感病毒反向遗传操作系统的应用 | 第21-22页 |
| ·本课题研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 2. 材料与方法 | 第23-30页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·病毒株、细胞、鸡胚及实验动物 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-30页 |
| ·pBD向表达质粒载体和引物的合成 | 第25-26页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第26页 |
| ·反转录 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第27页 |
| ·PCR产物的胶回收纯化及处理 | 第27页 |
| ·Klenow大片段的处理 | 第27页 |
| ·连接、转化、阳性质粒的筛选 | 第27-28页 |
| ·阳性质粒的PCR鉴定与测序 | 第28页 |
| ·去内毒素提质粒 | 第28-29页 |
| ·转染 | 第29页 |
| ·救获病毒的鉴定 | 第29页 |
| ·救获病毒EID_(50)的测定 | 第29-30页 |
| ·救获病毒对BALB/c小鼠的致病性实验 | 第30页 |
| 3 实验结果 | 第30-34页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第30-31页 |
| ·阳性质粒鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·阳性质粒凝胶鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·阳性质粒测序结果 | 第32页 |
| ·救获病毒的血凝试验鉴定结果 | 第32页 |
| ·救获病毒的测序鉴定结果 | 第32页 |
| ·救获病毒EID50的测定结果 | 第32-33页 |
| ·救获病毒对BALB/c小鼠的致病性实验结果 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 5 结论 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-46页 |
| 附录 | 第46-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
