摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略词中英文对照 | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-20页 |
1 病毒疫苗载体概述 | 第13-15页 |
·病毒疫苗载体的研究意义 | 第13页 |
·病毒疫苗载体的研究进展 | 第13-15页 |
2 水泡性口炎和水泡性口炎病毒 | 第15-18页 |
·概述 | 第15-16页 |
·VSV 病毒的复制 | 第16-17页 |
·VSV 病毒的研究进展 | 第17-18页 |
3 VSV 病毒作为疫苗载体的研究现状、进展和展望 | 第18-20页 |
·利用 VSV 病毒载体研制 HIV 重组疫苗 | 第18-19页 |
·利用 VSV 病毒载体研制埃博拉重组疫苗 | 第19页 |
·利用 VSV 为病毒载体用于其他病原体疫苗的研制 | 第19-20页 |
第二章 实验方案 | 第20-22页 |
1 课题研究的目的和意义 | 第20页 |
2 课题研究的内容 | 第20-21页 |
3 实验流程图 | 第21-22页 |
第三章 M 蛋白第 51 位氨基酸缺失的 VSV 对猪的致病性和免疫保护力研究 | 第22-38页 |
1 仪器设备、材料与试剂 | 第22-27页 |
·仪器与设备 | 第22页 |
·实验材料和试剂 | 第22-23页 |
·主要溶液配制 | 第23-27页 |
2 方法 | 第27-31页 |
·重组 M 蛋白的表达和纯化 | 第27页 |
·重组 M 蛋白的鉴定 | 第27-28页 |
·VSV 病毒致病性分级标准 | 第28页 |
·VSV 病毒动物攻毒试验 | 第28-29页 |
·VSV 中和抗体检测 | 第29页 |
·重组 VSV M 蛋白浓度的测定 | 第29-30页 |
·基于重组 M 蛋白的特异抗体 ELISA 检测方法的建立 | 第30页 |
·检测方法阴性/阳性界定值(cut-off value)的判定及接种 VSV 和 VSVΔM51 病毒猪血清 M 蛋白抗体的检测 | 第30-31页 |
3 结果 | 第31-36页 |
·重组 M 蛋白的表达和纯化 | 第31-32页 |
·VSV M 蛋白的 Western-blotting 鉴定 | 第32页 |
·VSV△M51 在猪的致病性显著减弱 | 第32-34页 |
·VSV△M51 可有效激发猪特异性中和抗体 | 第34-35页 |
·重组 VSV M 蛋白浓度 | 第35页 |
·接种 VSVXN2和 VSVΔM51 的猪血清中特异性 M 抗体水平的检测及变化规律 | 第35-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
第四章 M 蛋白三位点突变 VSV 病毒的构建和鉴定 | 第38-57页 |
1 仪器设备、材料与试剂 | 第38-42页 |
·仪器设备 | 第38页 |
·实验材料 | 第38-39页 |
·试剂 | 第39页 |
·主要溶液配制 | 第39-42页 |
2 方法 | 第42-50页 |
·VSV-MT 质粒的构建 | 第42-46页 |
·BHK-21、Vero 细胞的培养、冻存与复苏 | 第46-47页 |
·VSV-MT 的挽救 | 第47-48页 |
·VSV MT 的鉴定 | 第48-50页 |
3 结果 | 第50-55页 |
·VSV-MT 质粒的构建 | 第50-53页 |
·VSV-MT 的鉴定 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
第五章 M 蛋白三位点突变 VSV 病毒对小鼠的致病性和免疫保护力研究 | 第57-67页 |
1 仪器设备、材料与试剂 | 第57-58页 |
·仪器与设备 | 第57页 |
·实验材料和试剂 | 第57页 |
·主要溶液配制 | 第57-58页 |
2 方法 | 第58-60页 |
·病毒滴度测定 | 第58页 |
·VSVs 的多步生长曲线 | 第58-59页 |
·接种重组 VSV 病毒小鼠体重变化 | 第59页 |
·接种重组 VSV 病毒小鼠肺和脑病毒载量检测 | 第59页 |
·接种重组 VSV 病毒小鼠的免疫保护力 | 第59-60页 |
3 结果 | 第60-65页 |
·VSV-MT 毒力研究 | 第60-63页 |
·VSV-MT 的免疫原性研究 | 第63-65页 |
4 讨论 | 第65-67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |