| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-17页 |
| 1 杆状病毒的简介 | 第12-13页 |
| ·杆状病毒分类 | 第12页 |
| ·杆状病毒生活史 | 第12-13页 |
| 2 杆状病毒基因的研究 | 第13-14页 |
| ·杆状病毒基因组结构 | 第13页 |
| ·杆状病毒基因的表达与调控 | 第13-14页 |
| 3 杆状病毒的应用 | 第14页 |
| 4 家蚕杆状病毒基因简介 | 第14-15页 |
| 5 家蚕杆状病毒Bm122基因研究进展 | 第15页 |
| 6 实验方案设计 | 第15-17页 |
| 第二章 Bm122基因生物信息学分析 | 第17-21页 |
| 1 Bm122基因生物信息学分析 | 第17-20页 |
| ·Bm122基因序列分析 | 第17-18页 |
| ·BM122蛋白疏水性分析 | 第18页 |
| ·BM122蛋白信号肽分析 | 第18-19页 |
| ·BM122蛋白的跨膜区分析 | 第19-20页 |
| ·BM122蛋白的二级结构分析 | 第20页 |
| 2 讨论 | 第20-21页 |
| 第三章 家蚕核型多角体病毒Bm122敲除和补回型病毒的构建 | 第21-36页 |
| 1 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·材料及主要试剂 | 第21-22页 |
| ·Bm122基因缺失型bacmid的构建 | 第22-26页 |
| ·缺失型bacmid构建原理 | 第22-23页 |
| ·制备含有pKD46质粒的DH10Bac菌株的感受态细胞 | 第23-24页 |
| ·BmNPV Bm122打靶片段的制备 | 第24-25页 |
| ·碱裂解法提取bacmid | 第25页 |
| ·Bm122基因缺失型bacmid的PCR鉴定 | 第25-26页 |
| ·Bm122基因补回型bacmid的构建 | 第26-31页 |
| ·补回型bacmid构建原理 | 第26-27页 |
| ·PCR扩增Bm122基因 | 第27-28页 |
| ·TG1感受态细胞 | 第28页 |
| ·PMD18-T-Bm122的获得 | 第28-29页 |
| ·PCR产物双酶切 | 第29页 |
| ·碱法提取pFastBac HTB质粒 | 第29-30页 |
| ·重组转移载体pFastBac HTB-Bm122获得 | 第30-31页 |
| ·Bm122补回型bacmid的获得 | 第31页 |
| ·Bm122基因补回型bacmid的PCR鉴定 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-35页 |
| ·Bm122基因打靶线性化片段的鉴定 | 第31-32页 |
| ·Bm122基因缺失型bacmid的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组转移载体pFastBac HTB-Bm122的鉴定 | 第33-34页 |
| ·Bm122基因补回型bacmid的鉴定 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 Bm122缺失对BmNPV复制的影响 | 第36-44页 |
| 1.材料与试剂 | 第36页 |
| 2.原理与方法 | 第36-40页 |
| ·原理 | 第36页 |
| ·BmN细胞的冻存、复苏与培养 | 第36-37页 |
| ·BmN细胞冻存 | 第36-37页 |
| ·细胞复苏 | 第37页 |
| ·家蚕BmN细胞的贴壁培养 | 第37页 |
| ·三种bacmid转染BmN细胞 | 第37-38页 |
| ·病毒滴度测定 | 第38页 |
| ·病毒基因组的提取和消化 | 第38页 |
| ·荧光定量PCR引物设计 | 第38-39页 |
| ·荧光定量PCR标准曲线的绘制 | 第39页 |
| ·qPCR反应 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-43页 |
| ·三种bacmid转染后BmN细胞的状态 | 第40页 |
| ·病毒滴度分析 | 第40-41页 |
| ·Bm122基因缺失对BmNPV基因组复制影响分析 | 第41-43页 |
| ·标准曲线 | 第41页 |
| ·Bm122基因敲除对病毒复制的影响 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-44页 |
| 第五章 Bm122缺失对BmNPV病毒基因表达的影响 | 第44-47页 |
| 1 材料与试剂 | 第44-45页 |
| 2 方法 | 第45-46页 |
| ·western blot样品准备 | 第45页 |
| ·转膜 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-47页 |
| 第六章 透射电子显微镜观察 | 第47-51页 |
| 1 材料与试剂 | 第47-48页 |
| 2 电子显微镜分析 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
