| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语 | 第8-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-17页 |
| 1 杆状病毒简介 | 第13页 |
| 2 杆状病毒分类 | 第13-14页 |
| 3 杆状病毒的生活史 | 第14-15页 |
| 4 与病毒复制、转录相关的基因 | 第15-16页 |
| 5 BmNPV杆状病毒表达系统 | 第16-17页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第17-19页 |
| 1 研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 2 研究方案和策略 | 第18-19页 |
| 第三章 BmNPV orf98 的生物信息学分析 | 第19-23页 |
| 1 生物信息分析软件 | 第19页 |
| 2 BmNPV orf98 基因的生物信息学分析 | 第19-22页 |
| ·BmNPV orf98 基因序列分析 | 第19-20页 |
| ·BmNPV orf98 的疏水性分析 | 第20页 |
| ·BmNPV orf98 的信号肽分析 | 第20-21页 |
| ·BmNPV orf98 的跨膜区分析 | 第21-22页 |
| ·BmNPV orf98 的二级结构预测 | 第22页 |
| 3 讨论 | 第22-23页 |
| 第四章 构建BmNPV orf98 缺失型和补回型病毒 | 第23-32页 |
| 1 材料与试剂 | 第23页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-29页 |
| ·制备DH10Bac（含pKD46 ）感受态 | 第23页 |
| ·打靶片段BmNPV orf98 的制备 | 第23-24页 |
| ·构建缺失型病毒Bm98-ko-Bacmid | 第24-26页 |
| ·构建重组质粒pFastBac HTB-Bm98 | 第26-27页 |
| ·制备缺失型感受态细胞 | 第27页 |
| ·构建补回型病毒Bm98-re-Bacmid | 第27-29页 |
| 3 结果 | 第29-31页 |
| ·目的片段的鉴定 | 第29页 |
| ·基因缺失型病毒的鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组质粒pFastBac HTB-Bm98 的鉴定 | 第30-31页 |
| ·补回型病毒Bm98-re-Bacmid的鉴定 | 第31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 第五章 BmNPV orf98 缺失对BmNPV病毒增殖和包装的影响 | 第32-37页 |
| 1 材料与试剂 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-34页 |
| ·BmN的培养与传代 | 第32-33页 |
| ·碱裂解法提取3种病毒基因组DNA | 第33页 |
| ·三种病毒转染家蚕BmN细胞 | 第33-34页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第34页 |
| ·透射电子显微镜下观察病毒粒子的包装情况 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-37页 |
| ·家蚕细胞转染病毒后形态变化 | 第34-35页 |
| ·BmNPV orf98 的缺失对BmNPV病毒的增殖的影响 | 第35-36页 |
| ·BmNPV orf98 的缺失对BmNPV病毒包装的影响 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37页 |
| 第六章 BmNPV orf98 对家蚕杆状病毒基因复制和转录的影响 | 第37-47页 |
| 1 材料与试剂 | 第37-38页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37-38页 |
| 2 方法 | 第38-41页 |
| ·家蚕细胞BmN的培养和传代 | 第38页 |
| ·病毒DNA转染家蚕细胞 | 第38页 |
| ·基因组DNA的提取及消化 | 第38-39页 |
| ·荧光定量PCR分析BmNPV orf98 的缺失对BmNPV病毒复制的影响 | 第39页 |
| ·荧光定量PCR分析BmNPV orf98 的缺失对BmNPV病毒转录的影响 | 第39-41页 |
| ·荧光定量PCR | 第41页 |
| ·荧光定量PCR数据分析 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-46页 |
| ·绘制标准曲线 | 第41-42页 |
| ·荧光定量PCR分析BmNPV orf98 基因缺失对BmNPV病毒复制的影响 | 第42-43页 |
| ·病毒早期基因lef3 转录水平分析 | 第43-44页 |
| ·病毒晚期基因vp39 转录水平分析 | 第44-45页 |
| ·病毒极晚期基因p10 转录水平分析 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-47页 |
| 第七章 BmNPV orf98 克隆、表达和多克隆抗体的制备 | 第47-58页 |
| 1 材料与试剂 | 第47-48页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-53页 |
| ·扩增目的片段 | 第48页 |
| ·BmNPV orf98 基因AT克隆 | 第48-49页 |
| ·连接产物转化E.coli TG1 感受态细胞 | 第49页 |
| ·pMD18-T-Bm98 的鉴定 | 第49-50页 |
| ·连接反应 | 第50页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第50-51页 |
| ·镍柱纯化融合蛋白 | 第51页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第51-53页 |
| 3 结果 | 第53-56页 |
| ·BmNPV orf98 基因的克隆 | 第53-55页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第55页 |
| ·BmNPV orf98 蛋白抗体的验证 | 第55-56页 |
| ·不同实相的BmNPV orf98 蛋白表达 | 第56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
