| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-21页 |
| ·大豆菌核病的研究进展 | 第11-12页 |
| ·大豆菌核病病菌的侵染过程 | 第11页 |
| ·菌核病致病的生理生化机制 | 第11-12页 |
| ·草酸氧化酶基因(OXO)及其转基因研究进展 | 第12-13页 |
| ·草酸氧化酶的功能 | 第12页 |
| ·在植物抗病防御过程中的作用 | 第12页 |
| ·在植物抗盐胁迫过程中的作用 | 第12页 |
| ·在植物发育过程中的作用 | 第12页 |
| ·草酸氧化酶基因的克隆与遗传转化 | 第12-13页 |
| ·草酸氧化酶基因的克隆 | 第12-13页 |
| ·草酸氧化酶基因的遗传转化 | 第13页 |
| ·离子束基因工程 | 第13-17页 |
| ·离子束的发展 | 第13-15页 |
| ·离子束介导转基因的技术原理和特点 | 第13-14页 |
| ·离子束介导转基因的技术和方法 | 第14-15页 |
| ·离子束在遗传转化上的应用 | 第15-17页 |
| ·离子束介导总DNA的植物转化体系 | 第15-16页 |
| ·离子束介导单一目的基因的作物转化体系 | 第16页 |
| ·离了束介导微生物的遗传转化体系 | 第16-17页 |
| ·问题及展望 | 第17页 |
| ·大豆基因工程 | 第17-19页 |
| ·转化方法 | 第18-19页 |
| ·农杆菌介导法 | 第18页 |
| ·基因枪转化法 | 第18页 |
| ·花粉管通道法 | 第18页 |
| ·超声波辅助农杆菌转化方法 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的意义、主要内容及技术路线 | 第19-21页 |
| ·研究目的意义 | 第19页 |
| ·主要研究内容 | 第19-20页 |
| ·研究的技术路线 | 第20-21页 |
| 2 大豆成熟种子胚土培体系的建立 | 第21-26页 |
| ·材料与方法 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·种了实验材料 | 第21页 |
| ·培养土及营养液 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22页 |
| ·种子贮存时间 | 第22页 |
| ·存储温度 | 第22页 |
| ·种子挑选及预浸泡 | 第22页 |
| ·大豆成熟种子胚的获取 | 第22页 |
| ·胚的接种 | 第22页 |
| ·大豆苗的培养及计数 | 第22页 |
| ·结果与分析 | 第22-25页 |
| ·种子的存放时间对大豆生长的影响 | 第22-23页 |
| ·种子贮存温度对大豆生长的影响 | 第23-24页 |
| ·不同培养土对大豆生长的影响 | 第24-25页 |
| ·小结与讨论 | 第25-26页 |
| 3 植物特异表达载体的构建 | 第26-42页 |
| ·材料与方法 | 第26-34页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·供试菌株与质粒 | 第26页 |
| ·分子生物学试验试剂及相关试剂盒 | 第26页 |
| ·实验试剂配制 | 第26-27页 |
| ·细菌培养基及常用抗生素的配制 | 第27页 |
| ·菌种的培养及保存 | 第27-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-34页 |
| ·大肠杆菌质粒的的提取 | 第28-29页 |
| ·质粒DNA的纯度及浓度检测 | 第29页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA3301-OXO的构建 | 第29-31页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA3304-OXO的构建 | 第31-33页 |
| ·pCAMBIA3304-OXO质粒转化根癌农杆菌 | 第33-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-40页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA3301-OXO的构建与鉴定 | 第34-37页 |
| ·质粒pBI121-OXO和质粒pCAMBIA3301的双酶切 | 第34-35页 |
| ·目的基因小片段和载体大片段凝胶回收鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒pCAMBIA3301-OXO转化大肠杆菌JM109的酶切鉴定 | 第36页 |
| ·重组质粒pCAMBIA3301-OXO转化农杆菌LBA4404的酶切鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA3304-OXO的构建与鉴定 | 第37-40页 |
| ·质粒pCAMBIA3301-OXO和质粒pCAMBIA3304的双酶切 | 第37-38页 |
| ·目的基因小片段和载体大片段凝胶回收鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pCAMBIA3304-OXO转化大肠杆菌JM109的酶切鉴定 | 第39页 |
| ·重组质粒pCAMBIA3304-OXO转化农杆菌LBA4404的PCR鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·小结与讨论 | 第40-42页 |
| 4 离子束辅助农杆菌介导转化OXO基因的初步研究 | 第42-54页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·实验菌株 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·培养基 | 第43页 |
| ·Gus反应液 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-46页 |
| ·大豆种子的预处理 | 第43-44页 |
| ·根癌农杆菌的活化 | 第44页 |
| ·离子束照射 | 第44页 |
| ·种子处理及农杆菌浸染 | 第44-45页 |
| ·土培法 | 第44页 |
| ·组培法 | 第44-45页 |
| ·Gus组织化学染色检测抗性植株 | 第45页 |
| ·PCR检测Gus阳性植株 | 第45-46页 |
| ·提取抗性植株基因组DNA | 第45-46页 |
| ·抗性植株的PCR检测 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-51页 |
| ·离子束类型与参数选择 | 第46页 |
| ·大豆种子的预处理 | 第46-47页 |
| ·植株的培育及筛选 | 第47-49页 |
| ·土培法的植株培育 | 第47页 |
| ·组培法的植株培育及筛选 | 第47-49页 |
| ·Gus染色检测转基因植株 | 第49-50页 |
| ·PCR检测抗性植株 | 第50-51页 |
| ·小结与讨论 | 第51-54页 |
| ·大豆种子的选择与预处理 | 第51页 |
| ·离子束参数选择 | 第51-52页 |
| ·抗性植株的检测 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录 | 第59-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 在校期间.发表论文与研究成果 | 第63页 |
