| 摘要 | 第1-6页 |
| Summary | 第6-8页 |
| 缩略词英汉对照表 | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-17页 |
| 1.鸭肝炎的研究现状 | 第10-11页 |
| ·鸭肝炎的危害及研究回顾 | 第10页 |
| ·鸭肝炎的临床症状 | 第10-11页 |
| ·鸭甲型肝炎的病原学 | 第11页 |
| ·鸭甲型肝炎病毒的细胞培养 | 第11页 |
| 2.鸭甲型肝炎病毒基因组的基本结构 | 第11-12页 |
| 3.小RNA病毒 2A结构与功能研究进展 | 第12-15页 |
| ·小RNA病毒各编码蛋白的概述 | 第12-13页 |
| ·小RNA病毒 2A蛋白的分类 | 第13页 |
| ·小RNA病毒 2A蛋白的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·2A蛋白对天然免疫和病毒致病性的影响 | 第14-15页 |
| 4.鸭甲型鸭肝炎病毒 2A的结构特点 | 第15-16页 |
| 5.研究目的和意义 | 第16页 |
| 6.研究内容和方法 | 第16-17页 |
| 第二章 鸭甲型肝炎病毒 2A蛋白的原核表达及多抗制备 | 第17-23页 |
| 1.材料和方法 | 第17-20页 |
| ·菌株、载体和试剂 | 第17页 |
| ·主要溶液配制 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·鸭甲型肝炎病毒 2A、2A2、2A3克隆及表达 | 第18-20页 |
| ·引物设计与合成 | 第18-19页 |
| ·基因的克隆及序列分析 | 第19页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第19页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第19页 |
| ·重组蛋白的大量表达及纯化 | 第19-20页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第20页 |
| ·重组蛋白的Western blot鉴定 | 第20页 |
| 2.结果与分析 | 第20-22页 |
| ·原核表达基因的扩增、克隆和序列分析 | 第20页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第20页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第20-21页 |
| ·重组蛋白的多克隆抗体的检测 | 第21-22页 |
| 3.讨论 | 第22-23页 |
| 第三章 鸭甲型肝炎病毒 2A蛋白结构及功能研究 | 第23-33页 |
| 1. 材料与方法 | 第23-28页 |
| ·质粒、菌株和细胞株 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·鸭甲型肝炎病毒 2A蛋白荧光素酶裂解实验 | 第24-25页 |
| ·实验原理 | 第24页 |
| ·引物的设计与合成 | 第24-25页 |
| ·表达载体的构建 | 第25页 |
| ·荧光素酶活性检测实验 | 第25页 |
| ·鸭甲型肝炎病毒 2A1的双荧光报告裂解实验 | 第25-27页 |
| ·引物的设计与合成 | 第25-26页 |
| ·甲型鸭肝炎病毒 2A1双荧光报告表达质粒的构建 | 第26-27页 |
| ·Hela细胞的转染 | 第27页 |
| ·鸭甲型肝炎病毒 2A2，2A3的亚细胞定位 | 第27-28页 |
| ·引物的设计与合成 | 第27页 |
| ·DHAV-2A2、DHAV-2A3融合表达质粒的构建 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-32页 |
| ·2A荧光素酶裂解实验重组质粒的构建 | 第28页 |
| ·重组质粒对报告基因f LUC表达的影响 | 第28-29页 |
| ·鸭甲型肝炎病毒 2A1 双荧光报告重组质粒的构建 | 第29页 |
| ·双荧光报告质粒在真核细胞中的表达 | 第29-30页 |
| ·鸭甲型肝炎病毒 2A2、2A3亚细胞定位重组质粒的构建 | 第30-31页 |
| ·重组质粒在真核细胞中的定位 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-33页 |
| 结论 | 第33-34页 |
| 致谢 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-39页 |
| 作者简介 | 第39-40页 |
| 导师简介 | 第40-41页 |
