| 摘要 | 第1-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-15页 |
| 1 鸡MD研究进展 | 第9-11页 |
| ·鸡MD的发病机理 | 第9-10页 |
| ·对鸡MD遗传耐受或易感的研究 | 第10-11页 |
| ·MDV感染对MD耐受和易感鸡细胞因子表达的影响 | 第11页 |
| 2 BLec和BNK的研究进展 | 第11-13页 |
| 3 细胞因子的研究进展 | 第13-14页 |
| 4 研究目的和意义 | 第14-15页 |
| 第二章 ChBLec重组蛋白的原核表达和多抗的制备 | 第15-26页 |
| 1 试验材料 | 第15页 |
| ·实验动物、菌株和原核表达载体 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| 2 试验方法 | 第15-19页 |
| ·B15单倍型鸡胸腺组织RNA的提取及其反转录 | 第15页 |
| ·ChBLec基因部分片段的扩增 | 第15-16页 |
| ·ChBLec基因在pMD~(?)18-T Simple Vector中的克隆 | 第16-17页 |
| ·ChBLec基因在pET-30α载体中的克隆 | 第17-18页 |
| ·重组ChBLec蛋白在E.coli中的诱导表达 | 第18页 |
| ·重组ChBLec蛋白表达形式的鉴定 | 第18-19页 |
| ·兔抗ChBLec血清的制备 | 第19页 |
| ·Western blot鉴定重组ChBLec蛋白 | 第19页 |
| 3 试验结果 | 第19-24页 |
| ·ChBLec基因的PCR鉴定 | 第19-20页 |
| ·重组工程菌T-ChBLec的PCR鉴定 | 第20页 |
| ·重组质粒T-ChBLec与pET-30α载体的单酶切鉴定 | 第20-21页 |
| ·重组质粒pET-30α-ChBLec的双酶切鉴定 | 第21-22页 |
| ·pET-30α-ChBLec转化菌的SDS-PAGE鉴定 | 第22-23页 |
| ·pET-30a-ChBLec重组蛋白表达形式的鉴定 | 第23页 |
| ·重组蛋白兔抗血清的western blot鉴定 | 第23-24页 |
| 4 讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 MDV感染B19和B21单倍型SPF鸡外周血淋巴细胞中BLec和BNK转录水平的比较 | 第26-36页 |
| 1 试验材料 | 第26页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| 2 试验方法 | 第26-30页 |
| ·毒株蚀斑形成单位(plaque forming unit,PFU)的测定 | 第26页 |
| ·B19和B21单倍型SPF鸡的攻毒试验 | 第26-27页 |
| ·鸡外周血淋巴细胞的提取和培养 | 第27页 |
| ·鸡外周血淋巴细胞RNA的提取及反转录 | 第27页 |
| ·双重实时荧光定量RT-PCR引物及探针的合成 | 第27-28页 |
| ·目的基因和内参基因的扩增 | 第28页 |
| ·BNK19和BNK21基因在pMD~(?)18-T Simple Vector中的克隆 | 第28-29页 |
| ·双重实时荧光定量RT-PCR标准曲线的构建 | 第29-30页 |
| 3 试验结果 | 第30-34页 |
| ·鸡外周血淋巴细胞中BNK19、BNK21的PCR鉴定 | 第30页 |
| ·T-ChBlec、T-BNK19、T-BNK21和T-28srRNA质粒的PCR鉴定 | 第30-31页 |
| ·BLec、BNK和内参的标准曲线图 | 第31-32页 |
| ·B19和B21单倍型鸡外周血淋巴细胞在不同时间点BLecl9(21)转录水平的比较 | 第32-33页 |
| ·B19和B21单倍型鸡外周血淋巴细胞在不同时间点BNK19和BNK21转录水平的比较 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 MDV感染B19和B21单倍型SPF鸡外周血淋巴细胞中细胞因子转录水平的比较 | 第36-46页 |
| 1 试验材料 | 第36页 |
| ·实验动物 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| 2 试验方法 | 第36-38页 |
| ·双重实时荧光定量RT-PCR引物及探针的合成 | 第36-37页 |
| ·目的基因和内参基因的扩增 | 第37页 |
| ·双重实时荧光定量RT-PCR标准曲线的构建 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-44页 |
| ·四种细胞因子及内参的T载体连接产物的PCR鉴定 | 第38-39页 |
| ·四种细胞因子及内参的标准曲线图 | 第39-40页 |
| ·B19和B21单倍型外周血中不同时间点IFN-γ转录水平的比较 | 第40-41页 |
| ·B19和B21单倍型外周血中不同时间点IL-4转录水平的比较 | 第41-42页 |
| ·B19和B21单倍型外周血中不同时间点IL-10转录水平的比较 | 第42页 |
| ·B19和B21单倍型外周血中不同时间点IL-18转录水平的比较 | 第42-43页 |
| ·给B19和B21单倍型SPF鸡攻毒后不同细胞因子的攻毒组相对对照组增加的百分比 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 全文结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| Abstract | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
