致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
专业词汇中英文对照表 | 第8-9页 |
目录 | 第9-12页 |
引言 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
·红细胞分化 | 第14-16页 |
·造血系统的发育 | 第14页 |
·红细胞分化 | 第14-15页 |
·转录因子对红细胞分化的调控 | 第15-16页 |
·ALAS2与血红素合成途径及铁代谢 | 第16-22页 |
·氨基酮戊酸合成酶(ALAS2) | 第16-17页 |
·ALAS2与血红素合成 | 第17-18页 |
·ALAS2与铁代谢 | 第18-22页 |
·miRNA对红细胞分化和发育的调控 | 第22-26页 |
·miRNAs对造血系统的调控 | 第22页 |
·miRNAs对红细胞分化的调控 | 第22-24页 |
·miRNAs对铁代谢的调控 | 第24页 |
·hsa-miR-218 | 第24-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-46页 |
·实验材料 | 第26-32页 |
·细胞样品 | 第26页 |
·实验试剂和耗材 | 第26-27页 |
·试剂盒 | 第27页 |
·所用溶液和培养基 | 第27页 |
·实验仪器 | 第27页 |
·菌株 | 第27-28页 |
·质粒 | 第28-29页 |
·引物 | 第29-32页 |
·DNA测序 | 第32页 |
·引物合成 | 第32页 |
·生物信息学分析软件 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-46页 |
·细胞的培养 | 第32页 |
·细胞的复苏 | 第32页 |
·细胞的传代和扩大培养 | 第32页 |
·细胞的冻存 | 第32-33页 |
·DH5α感受态细胞的制备 | 第33页 |
·质粒DNA转化E.coli感受态细胞 | 第33页 |
·质粒的小量提取 | 第33-34页 |
·普通DNA产物的纯化 | 第34-35页 |
·普通琼脂糖凝胶DNA回收 | 第35页 |
·血液基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
·苯酚/氯仿抽提法提取质粒DNA | 第36-37页 |
·限制性内切酶作用 | 第37页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第37-38页 |
·PCR反应 | 第38页 |
·DNA连接反应 | 第38-39页 |
·定点突变 | 第39-40页 |
·细胞的化学转染 | 第40-41页 |
·电转染 | 第41页 |
·细胞转染后荧光素酶的检测 | 第41页 |
·Trizol法提取细胞总RNA | 第41-42页 |
·Real-time PCR | 第42-43页 |
·miRNA的Real time PCR | 第43-46页 |
第三章 结果与讨论 | 第46-64页 |
·ALAS2的表达分析 | 第46-48页 |
·高通量测序检测ALAS2的表达水平 | 第46-47页 |
·ALAS2在不同组织中的表达水平 | 第47页 |
·ALAS2在不同细胞中的表达水平 | 第47-48页 |
·候选miRNAs的初步筛选 | 第48-51页 |
·目标miRNA的最终确定 | 第51-55页 |
·过表达候选miRNAs对内源性ALAS2的调控作用 | 第52页 |
·过表达候选miRNAs对内源性和外源性ALAS2的调控作用 | 第52-55页 |
·hsa-miR-218的基因结构和表达分析 | 第55-57页 |
·hsa-miR-218的基因结构分析 | 第55-56页 |
·hsa-miR-218在红细胞分化过程中的表达分析 | 第56-57页 |
·hsa-miR-218和其靶基因ALAS2的结合关系 | 第57-60页 |
·hsa-miR-218在K562细胞中的过表达 | 第57页 |
·过表达hsa-miR-218对内源性ALAS2的下调作用 | 第57-58页 |
·过表达hsa-miR-218对内源性和外源性ALAS2的下调作用 | 第58页 |
·定向单点突变实验检测hsa-miR-218和ALAS2之间的结合关系 | 第58-60页 |
·hsa-miR-218对红细胞分化影响的初步研究 | 第60-64页 |
·hsa-miR-218对血红素加氧酶1的影响 | 第60-61页 |
·hsa-miR-218对细胞内铁离子浓度水平的影响 | 第61页 |
·hsa-miR-218对珠蛋白表达的影响 | 第61-64页 |
第四章 结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
附录 | 第72-80页 |
作者简介及在学期间发表的学术论文与科研成果 | 第80页 |