| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-30页 |
| ·材料 | 第20-24页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·试剂配制 | 第21-23页 |
| ·质粒、菌株和细胞株 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-30页 |
| ·重组质粒的构建 | 第24-25页 |
| ·His-融合蛋白的原核表达及纯化 | 第25页 |
| ·GST-融合蛋白的原核表达及纯化 | 第25-26页 |
| ·Ettan~(TM)2-D Quant Kit蛋白定量 | 第26-27页 |
| ·体外结合实验 | 第27页 |
| ·细胞培养与瞬时转染 | 第27页 |
| ·HA-PRAK和Flag-Sept8在HEK293细胞的表达 | 第27-28页 |
| ·免疫共沉淀 | 第28页 |
| ·免疫印迹及化学发光检测 | 第28-29页 |
| ·免疫荧光试验 | 第29页 |
| ·细胞处理 | 第29-30页 |
| 第三章 结果 | 第30-40页 |
| ·质粒的构建 | 第30-31页 |
| ·Sept8人脑胶质瘤细胞cDNA的PCR扩增结果 | 第30页 |
| ·pcDNA3-FLAG-Sept8重组质粒的鉴定 | 第30-31页 |
| ·pET14b-Sept8重组质粒的鉴定 | 第31页 |
| ·蛋白的表达与纯化 | 第31-33页 |
| ·His-Sept8重组蛋白的表达和纯化 | 第31-32页 |
| ·GST-PRAK重组蛋白的表达和纯化 | 第32-33页 |
| ·蛋白定量结果 | 第33页 |
| ·GST-PRAK和His-Sept8的体外结合实验 | 第33-34页 |
| ·HA-PRAK和Flag-Sept8的免疫共沉淀实验 | 第34-36页 |
| ·PRAK与Sept8结合的影响因素 | 第36-38页 |
| ·PRAK与Sept8在NIH/3T3细胞内的定位情况 | 第38-40页 |
| 第四章 讨论 | 第40-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第51-52页 |
| 英文缩略词表 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-56页 |
| 统计学证明 | 第56页 |
