| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-33页 |
| ·酸性微环境与肿瘤生长和转移 | 第15-24页 |
| ·肿瘤细胞糖代谢异常旺盛和产酸过多的机制 | 第15-17页 |
| ·肿瘤细胞泌酸的重要机制——V-ATPase | 第17-19页 |
| ·V-ATPase对肿瘤细胞生长的影响 | 第19-20页 |
| ·V-ATPase与肿瘤细胞侵袭性的关系 | 第20-22页 |
| ·靶向肿瘤酸性微环境的抗肿瘤新策略 | 第22-24页 |
| ·前景与展望 | 第24页 |
| ·DNA甲基化的研究方法 | 第24-29页 |
| ·甲基化特异性PCR(MSP) | 第24-25页 |
| ·Bisulfite-Sequencing PCR(BSP) | 第25页 |
| ·甲基化敏感性限制性内切酶法(Methylation-sensitive restrictionenzyme assay) | 第25-26页 |
| ·结合重硫酸盐限制性分析法(COBRa法)和MethylLight | 第26页 |
| ·Pyrosequencing | 第26-27页 |
| ·Methylight | 第27页 |
| ·MBD(Methyl-CpG binding domain columnchromatography,甲基化结合区)柱层析法 | 第27-28页 |
| ·DNA微阵列法 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-33页 |
| 第二章 LASS2与质子泵相互作用功能域的研究 | 第33-51页 |
| ·引言 | 第33-34页 |
| ·材料和方法 | 第34-44页 |
| ·材料 | 第34-37页 |
| ·方法 | 第37-44页 |
| ·结果 | 第44-48页 |
| ·LASS2和ATP6L在细胞内相互结合 | 第44-46页 |
| ·确定了LASS2与ATP6L结合的最小结构域 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第三章 腺病毒介导的LASS2基因过表达抑制肝癌细胞的生长与转移 | 第51-73页 |
| ·引言 | 第51-52页 |
| ·材料方法 | 第52-63页 |
| ·材料 | 第52-54页 |
| ·方法 | 第54-63页 |
| ·结果 | 第63-70页 |
| ·穿梭质粒构建 | 第63页 |
| ·重组腺病毒构建 | 第63-64页 |
| ·细胞生长实验 | 第64-65页 |
| ·细胞凋亡实验 | 第65-66页 |
| ·细胞迁移实验 | 第66-67页 |
| ·体外侵袭实验 | 第67-68页 |
| ·V-ATPase功能检测 | 第68-70页 |
| ·MMP-2的表达与活性 | 第70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-73页 |
| 第四章 肝癌中SLIT2基因表达及启动子甲基化分析 | 第73-95页 |
| ·引言 | 第73页 |
| ·材料和方法 | 第73-80页 |
| ·材料 | 第73-75页 |
| ·方法 | 第75-80页 |
| ·结果 | 第80-85页 |
| ·肝癌组织和肝癌细胞系的SLIT2基因表达 | 第80-83页 |
| ·SLIT2在肝癌中的甲基化状态分析 | 第83-84页 |
| ·5-aza-dC作用前后SLIT2在肝癌细胞系中的表达 | 第84页 |
| ·甲基化水平与临床指标的相关性 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-91页 |
| ·甲基化与基因沉默 | 第85-87页 |
| ·甲基化与肿瘤 | 第87-90页 |
| ·SLIT2甲基化在肿瘤发生中的作用 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-95页 |
| 第五章 SLIT2重组腺病毒载体抑制肝癌细胞的生长与转移 | 第95-111页 |
| ·引言 | 第95-96页 |
| ·材料与方法 | 第96-104页 |
| ·材料 | 第96-99页 |
| ·方法 | 第99-104页 |
| ·结果 | 第104-107页 |
| ·成功构建PDC315-SLIT2穿梭质粒 | 第104页 |
| ·成功构建SLIT2重组腺病毒 | 第104-105页 |
| ·SLIT2过表达抑制SMMC7721细胞生长、侵袭和迁移 | 第105-107页 |
| ·讨论 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-111页 |
| 第六章 主要结论与展望 | 第111-112页 |
| ·主要结论 | 第111页 |
| ·前景与展望 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 在读期间发表的主要论文目录 | 第113页 |
