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硫氧化菌群落结构分析及其特性研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-41页
   ·硫循环第14-15页
   ·硫氧化微生物第15-25页
     ·无色硫细菌(Colorless Sulfur Bacteria)第22-23页
     ·绿色硫细菌(Green Sulfur Bacteria, GSB)第23-24页
     ·紫色硫细菌(Purple Sulfur Bacteria,PSB)第24-25页
     ·紫色非硫细菌(Purple Non-sulfur Bacteria,PNSB)第25页
   ·硫氧化途径和相关酶系第25-34页
     ·硫代硫酸盐和连多硫酸盐的氧化第26-30页
     ·硫化氢的氧化第30-31页
     ·单质硫的氧化第31-33页
     ·硫氧化古菌的硫氧化途径及其硫氧化酶第33-34页
   ·Propidium Monoazide 结合PCR 技术在微生物活细胞检测中的应用第34-39页
     ·微生物活细胞检测方法第35-36页
     ·PMA 结合PCR 检测微生物活细胞的机理第36-37页
     ·PMA 与EMA 的比较第37-38页
     ·PMA 结合PCR 技术在微生物活细胞检测的关键影响因素第38-39页
   ·本课题的研究意义和研究内容第39-41页
     ·本课题的研究意义第39-40页
     ·本课题的研究内容第40-41页
第二章 基于PMA 的微生物分子生态学方法第41-57页
   ·引言第41-42页
   ·材料和方法第42-46页
     ·菌种第42页
     ·样品采集第42页
     ·样品PMA 处理第42页
     ·PMA 处理的选择与优化第42-43页
     ·传统DGGE 在微生物生态学应用中的局限性和基于活细胞的PMA-巢式PCR-DGGE 微生物分子生态学研究方法的建立第43-44页
     ·DNA 提取和纯化第44页
     ·16S rRNA 基因PCR 扩增第44-45页
     ·变性梯度凝胶电泳(DGGE)第45-46页
   ·结果与讨论第46-55页
     ·基于PMA 和PCR 结合的细菌活细胞检测方法的建立第46-49页
     ·基于活细胞的PMA-巢式PCR-DGGE 环境微生物分子生态学研究方法的建立第49-55页
   ·本章 小结第55-57页
第三章 印染废水处理系统中微生物及硫氧化菌群落结构分析第57-88页
   ·引言第57-58页
   ·材料和方法第58-64页
     ·样品采集第58-59页
     ·DNA 提取和纯化第59页
     ·细菌和古菌16S rRNA 基因PCR 扩增第59-60页
     ·细菌和古菌16S rRNA 基因克隆文库构建和限制性片段长度多态性分析(RFLP)第60-61页
     ·硫氧化细菌功能基因引物设计及PCR 扩增第61-63页
     ·硫氧化细菌功能基因克隆文库构建和RFLP 分析第63页
     ·DGGE第63页
     ·序列进化树分析第63-64页
     ·核酸序列第64页
   ·结果与讨论第64-85页
     ·样品基因组DNA 提取结果第64页
     ·细菌和古菌16S rRNA 基因PCR 扩增和克隆文库构建第64-66页
     ·细菌和古菌16S rRNA 基因克隆文库限制性片段长度多态性分析第66-68页
     ·细菌和古菌克隆文库中16S rRNA 基因序列系统发育分析第68-72页
     ·PMA 处理对微生物群落结构的影响第72-73页
     ·硫氧化细菌特异引物和功能基因的PCR 扩增第73-74页
     ·基于功能基因的硫氧化细菌克隆文库构建和RFLP 分析第74-79页
     ·soxB, dsrA 和sqr 克隆文库中soxB, dsrA 和sqr 基因的系统发育分析第79-85页
   ·本章 小结第85-88页
第四章 硫氧化细菌的富集、筛选和鉴定分析第88-104页
   ·引言第88-90页
   ·材料与方法第90-94页
     ·样品第90-91页
     ·培养基第91页
     ·富集培养和菌株分离第91-92页
     ·富集样品总基因组DNA 提取和分离菌株基因组提取第92页
     ·富集样品的DGGE 分析第92页
     ·分离菌株16S rDNA 鉴定第92页
     ·序列进化树分析第92页
     ·Na_2S_20_3 和S0_4~(2-)测定方法第92-94页
     ·核酸序列第94页
   ·结果与讨论第94-102页
     ·富集培养第94-95页
     ·富集过程中微生物群落结构变化的DGGE 分析第95-97页
     ·硫氧化细菌的分离、鉴定和特性研究第97-99页
     ·DGGE 图谱上DNA 条带和分离菌株16S rRNA 基因序列系统发育分析第99-102页
   ·本章 小结第102-104页
第五章 硫氧化细菌Halothiobacillus JFA2 的生理生化鉴定及其生物学特性研究第104-124页
   ·引言第104页
   ·材料与方法第104-108页
     ·培养基及菌株JFA2 的活化第104-105页
     ·形态鉴定第105页
     ·生理生化鉴定第105页
     ·生长曲线测定第105页
     ·pH、温度、溶氧对生长的影响第105-106页
     ·碳源、氮源利用实验第106页
     ·金属离子对生长的影响第106页
     ·菌株JFA2 的需盐性和耐盐性第106页
     ·含硫化合物利用第106-107页
     ·菌株JFA2 功能基因的检测第107-108页
   ·结果与讨论第108-122页
     ·菌株JFA2 16S rRNA 基因鉴定及进化分析第108-109页
     ·菌株JFA2 生理生化鉴定第109-110页
     ·菌株JFA2 菌落及菌体形态第110-111页
     ·菌株JFA2 生长曲线测定第111-113页
     ·pH、温度、溶氧对菌株JFA2 生长的影响第113-114页
     ·碳源、氮源利用实验第114-116页
     ·金属离子对生长的影响第116-118页
     ·菌株JFA2 的需盐性和耐盐性第118-119页
     ·含硫底物利用第119-120页
     ·菌株JFA2 的代谢途径分析第120-122页
   ·本章 小结第122-124页
结论与展望第124-129页
 结论第124-127页
   ·基于活细胞的微生物分子生态学方法第124页
   ·印染废水处理系统中细菌、古菌和硫氧化菌的群落结构第124-125页
   ·硫氧化细菌的富集、筛选和鉴定分析第125-126页
   ·菌株JFA2 的生理生化鉴定及其生物学特性第126-127页
 创新性成果第127页
 展望第127-129页
参考文献第129-155页
附录主要实验仪器和试剂第155-158页
攻读博士/硕士学位期间取得的研究成果第158-160页
致谢第160-161页
附件第161页

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