| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 目录 | 第13-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-21页 |
| 前言 | 第17-21页 |
| 综述 生长相关蛋白 43（GAP-43）的研究现状及与眼科神经损伤疾病的关系 | 第21-29页 |
| 1 GAP-43 的结构 | 第21页 |
| 2 GAP-43 的分布及在发育过程中的变化 | 第21-22页 |
| 3 GAP-43 的可能作用机制 | 第22-23页 |
| 4 GAP-43 的磷酸化和去磷酸化之间的关系 | 第23页 |
| 5 GAP-43 与眼科的关系 | 第23-25页 |
| ·GAP-43 与视觉系统发育 | 第23-24页 |
| ·GAP-43 与眼科神经损伤疾病的关系 | 第24-25页 |
| 6 GAP-43 表达的调节 | 第25-29页 |
| 第2章 慢病毒介导的 GAP-43 基因表达及抑制载体的构建及病毒的产生 | 第29-53页 |
| 1 材料 | 第29-31页 |
| ·质粒 | 第29页 |
| ·工具酶 | 第29页 |
| ·其他主要试剂及材料 | 第29-30页 |
| ·主要设备及仪器 | 第30-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-43页 |
| ·慢病毒介导的 GAP-43 基因表达载体的构建 | 第31-37页 |
| ·GAP-43 基因 shRNA 载体构建 | 第37-43页 |
| 3 结果 | 第43-50页 |
| ·过表达 GAP-43 基因慢病毒表达载体的构建 | 第43-46页 |
| ·GAP-43 基因 shRNA 干扰构建 | 第46-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·基因治疗的载体包括质粒和病毒两大类 | 第51-53页 |
| 第3章 慢病毒介导的 GAP-43 基因转染骨髓间充质干细胞表达的实验研究 | 第53-71页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| ·主要材料及设备 | 第53-54页 |
| 2 实验步骤与方法 | 第54-60页 |
| ·大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养 | 第54-55页 |
| ·骨髓间充质干细胞的鉴定 | 第55页 |
| ·骨髓间充质干细胞生长曲线的测定 | 第55-56页 |
| ·慢病毒感染细胞 | 第56-60页 |
| 3 结果 | 第60-66页 |
| ·BMSCs 的培养及鉴定 | 第60-62页 |
| ·慢病毒感染 BMSC 细胞 | 第62-66页 |
| 4 讨论 | 第66-71页 |
| ·骨髓间充质干细胞的基因修饰 | 第66-67页 |
| ·慢病毒介导的 GAP-43 基因导入 BMSCs | 第67-68页 |
| ·GAP-43 基因的表达对于 BMSCs 分化能力的影响 | 第68-71页 |
| 第4章 抑制 GAP-43 基因表达后骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的研究 | 第71-89页 |
| 1 材料 | 第71-74页 |
| ·主要材料及设备 | 第71-74页 |
| 2 实验步骤与方法 | 第74-77页 |
| ·慢病毒介导的 GAP-43-shRNA 转染骨髓间充质干细胞 | 第74-77页 |
| 3 结果 | 第77-82页 |
| ·GAP-43 基因转染 BMSCs 后嘌呤霉素的筛选 | 第77-78页 |
| ·转染后的 BMSCs 在诱导环境下 GAP-43mRNA 的抑制情况 | 第78页 |
| ·基因转染后的 BMSCs 应用 Western blot 检测 GAP-43 蛋白抑制情况 | 第78-79页 |
| ·基因转染后 BMSCs 在诱导环境下形态学变化 | 第79-80页 |
| ·细胞免疫荧光法检测基因转染后 BMSCs Nestin、NeuN、GAP-43 的表达 | 第80-81页 |
| ·转染 GAP-43shRNA 后 BMSCs 在诱导环境下神经标志物NSE、Nestin、NF、βⅢ-tubulin 的表达 | 第81-82页 |
| 4 讨论 | 第82-89页 |
| ·RNAi 的发现 | 第82-83页 |
| ·RNAi 的作用机制 | 第83-84页 |
| ·siRNA 的设计 | 第84-85页 |
| ·RNAi 载体的选择 | 第85-86页 |
| ·RNAi 慢病毒表达载体 | 第86页 |
| ·慢病毒干扰载体的应用 | 第86页 |
| ·抑制 GAP-43 基因表达对于 BMSCs 分化能力的影响 | 第86-89页 |
| 第5章 慢病毒表达载体介导 GAP-43 基因修饰骨髓间充质干细胞修复大鼠视神经损伤的实验研究 | 第89-107页 |
| 1 实验材料 | 第89-90页 |
| ·实验动物 | 第89页 |
| ·实验设备 | 第89-90页 |
| ·实验试剂 | 第90页 |
| 2 实验方法 | 第90-96页 |
| ·大鼠视神经损伤模型的建立 | 第90-92页 |
| ·实验动物分组及 BMSCs 移植 | 第92-93页 |
| ·苏木精-伊红染色 | 第93-94页 |
| ·RT Q-PCR 检测视网膜组织 GAP-43mRNA 表达 | 第94-95页 |
| ·Western Blot 检测视网膜组织 GAP-43、NSE、Nestin 蛋白表达 | 第95-96页 |
| 3 结果 | 第96-101页 |
| ·成功构建视神经损伤动物模型 | 第96-97页 |
| ·大鼠视网膜下注射细胞液技术的成熟使用 | 第97-98页 |
| ·慢病毒表达载体介导 GAP-43 基因修饰 BMSCs 对视神经损伤大鼠视网膜组织的病理影响 | 第98-99页 |
| ·RT Q-PCR 检测视网膜组织 GAP-43mRNA 表达 | 第99-100页 |
| ·Western blot 检测视网膜组织 GAP-43 蛋白含量变化 | 第100-101页 |
| 4 讨论 | 第101-107页 |
| ·大鼠外伤性视神经损伤模型的建立 | 第101-107页 |
| 第6章 结论 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-123页 |
| 作者简介及在攻读学位期间发表的学术论文 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
