中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
中英文缩略词对照表 | 第15-16页 |
第1章 绪论 | 第16-46页 |
·引言 | 第16页 |
·文献综述 | 第16-46页 |
·基因治疗 | 第16-21页 |
·基因递送 | 第21-23页 |
·基因载体 | 第23-33页 |
·PEI 的修饰及其在基因递送中的应用 | 第33-38页 |
·前列腺癌简介 | 第38-41页 |
·p53 基础知识 | 第41-46页 |
第2章 N-乙酰-亮氨酸改性 PEI25k 基因载体的构建与评价 | 第46-60页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·细胞株 | 第46-47页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·主要设备 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-50页 |
·细胞培养 | 第47页 |
·N-乙酰-亮氨酸-PEI(N-Ac-Leu-PEI)的制备 | 第47-48页 |
·N-Ac-Leu-PEI 的表征 | 第48页 |
·N-Ac-Leu-PEI 质子缓冲能力的测定 | 第48-49页 |
·N-Ac-Leu-PEI/pDNA 的凝胶阻滞电泳 | 第49页 |
·BSA 蛋白吸附测定 | 第49页 |
·溶血实验 | 第49页 |
·N-Ac-Leu-PEI 的细胞毒性测定 | 第49-50页 |
·体外细胞转染评价 | 第50页 |
·结果与讨论 | 第50-58页 |
·N-Ac-Leu-PEI 的合成与表征 | 第50-51页 |
·N-Ac-Leu-PEI 的粒径与表面电位 | 第51-53页 |
·N-Ac-Leu-PEI 聚合物的缓冲能力 | 第53-54页 |
·N-Ac-Leu-PEI/pDNA 复合物的凝胶阻滞电泳 | 第54页 |
·N-Ac-Leu-PEI 蛋白吸附实验 | 第54-55页 |
·N-Ac-Leu-PEI 的溶血实验 | 第55-57页 |
·细胞毒性评价 | 第57-58页 |
·体外细胞转染评价 | 第58页 |
·本章小结 | 第58-60页 |
第3章 PEI 衍生物基因载体的设计制备以及性能研究 | 第60-82页 |
·实验材料 | 第60-61页 |
·细胞株 | 第60-61页 |
·主要试剂 | 第61页 |
·实验方法 | 第61-66页 |
·PEI 衍生物 PEN 的制备以及简单筛选 | 第61-62页 |
·载体基因复合物粒径电位表征 | 第62页 |
·载体保护基因免于 DNA 酶降解实验 | 第62页 |
·细胞培养 | 第62页 |
·细胞毒性实验 | 第62-63页 |
·细胞转染实验 | 第63页 |
·RT-PCR | 第63-64页 |
·Western blot | 第64页 |
·Caspase 家族蛋白活性检测 | 第64-65页 |
·线粒体膜电位变化检测 | 第65页 |
·流式细胞术检测周期阻滞 | 第65页 |
·DAPI 染色看凋亡小体 | 第65页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第65-66页 |
·实验结果与讨论 | 第66-81页 |
·PEN 的合成与结构表征 | 第66-67页 |
·载体/DNA 复合物的粒径与表面电位 | 第67-69页 |
·载体对 DNA 酶降解的保护 | 第69页 |
·细胞毒性实验 | 第69-70页 |
·细胞转染实验 | 第70-73页 |
·p53 细胞内表达检测 | 第73-75页 |
·p53 表达后相关效果检测 | 第75-81页 |
·本章小结 | 第81-82页 |
第4章 结论与展望 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-96页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第96-98页 |
致谢 | 第98页 |