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调控长春花生物碱合成的WRKY转录因子鉴定及功能分析

摘要第1-9页
第一章 文献综述第9-32页
 1 TIAs生物合成步骤及其关键酶第10-13页
 2 TIAs生物合成的调控第13-14页
 3 长春花TIAs生物合成的基因工程第14-16页
   ·单基因或多基因调控策略第14-15页
   ·反义RNA或RNAi策略第15页
   ·转录因子调控策略第15-16页
 4 TIAs生物合成途径的转录调控第16-18页
   ·参与长春花TIAs生物合成调控的转录因子第16-18页
 5 WRKY转录因子第18-22页
   ·WRKY转录因子的结构与分类第18-19页
   ·WRKY转录因子的功能第19-22页
 6 JAs信号分子介导的次生代谢转录调控第22-25页
   ·JAs介导的转录因子调控次生代谢第22-23页
   ·JAs介导的TIAs生物合成中的转录因子调节第23-25页
 7 TIAs途径相关酶基因启动子的研究进展第25-27页
 8 启动子研究的技术路线第27-31页
   ·启动子的生物信息学预测分析数据库第27页
   ·启动子的克隆第27-28页
   ·启动子表达模式及强度分析第28页
   ·启动子的缺失和突变分析第28-29页
   ·酵母单杂交技术第29-31页
 9 本论文的研究内容及其目的意义第31-32页
第二章 药用植物长春花WRKY转录因子的鉴定及表达谱分析第32-48页
 1 材料与方法第32-35页
   ·材料第32页
   ·方法第32-35页
 2 结果与分析第35-44页
   ·长春花CrWRKY转录因子的筛选和鉴定第35-38页
   ·长春花CrWRKY转录因子的序列比对和分类第38-39页
   ·CrWRKY家族WRKY基序和锌指结构的保守性与多样性第39-41页
   ·CrWRKY的表达模式第41-42页
   ·CrWRKY表达模式的验证第42-44页
 3 讨论第44-46页
 4 结论第46-48页
第三章 发根农杆菌介导的长春花高效转基因体系的建立第48-58页
 1 材料与方法第48-51页
   ·材料第48-49页
   ·方法第49-51页
 2 结果与分析第51-55页
   ·长春花不同外植体发根诱导率和生长速率比较第51-53页
   ·毛状根培养条件的优化第53-54页
   ·转基因毛状根的分子检测第54-55页
   ·毛状根中总生物碱含量的测定第55页
 3 讨论第55-57页
 4 结论第57-58页
第四章 长春花中CrWRKY1启动子的分离及鉴定第58-70页
 1 材料与方法第58-64页
   ·材料第58-59页
   ·方法第59-64页
 2 结果与分析第64-68页
   ·CrWRKY1启动子的生物信息学分析第64-65页
   ·CrWRKY1启动子转录起始位点的确定第65页
   ·5’和3’缺失分析第65-66页
   ·不同顺式作用元件的突变分析第66-68页
 3 讨论第68-69页
 4 结论第69-70页
第五章 CrWRKY1启动子及其缺失片段的表达分析第70-81页
 1 材料与方法第70-73页
   ·材料第70-71页
   ·方法第71-73页
 2 结果与分析第73-79页
   ·CrWRKY1启动子在长春花转基因毛状根中的分析第73-76页
   ·CrWRKY1启动子在转基因烟草中的分析第76-78页
   ·CrWRKY1启动子中的JA响应元件的鉴定第78-79页
 3 讨论第79页
 4 结论第79-81页
第六章 与CrWRKY1启动子相互作用的潜在转录因子的克隆第81-96页
 1 材料与方法第81-89页
   ·材料第81-82页
   ·方法第82-89页
 2 结果与分析第89-94页
   ·酵母单杂交cDNA文库的构建第89页
   ·诱饵质粒抗性浓度的筛选第89-90页
   ·酵母单杂交菌落PCR鉴定结果第90页
   ·测序结果分析第90-92页
   ·S1FA基因的序列分析第92-93页
   ·CrMYB44基因的克隆及鉴定第93-94页
   ·DOF基因的克隆及鉴定第94页
 3 讨论第94-95页
 4 结论第95-96页
参考文献第96-107页
附 各章彩图第107-111页
作者简介和博士期间取得的成果第111-113页
Abstract第113-117页
致谢第117页

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