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阿尔巴斯白绒山羊不同种类成体干细胞对转基因克隆效率影响的研究

目录第1-6页
摘要第6-11页
ABSTRACT第11-18页
缩略词表第18-19页
第一篇 哺乳动物成体干细胞研究概述第19-35页
 1 成体组织来源的干细胞第19-21页
 2 不同种类成体干细胞概述第21-24页
   ·肌肉卫星细胞第21-22页
   ·成体造血干细胞第22-24页
   ·间充质干细胞第24页
   ·脂肪细胞第24页
 3 成体干细胞干性分析第24-31页
   ·成体干细胞的再生第24-25页
   ·成体干细胞静息态和标记第25-26页
   ·细胞移植第26-27页
   ·体内谱系追踪第27-28页
   ·实际干性和潜在干性第28-31页
 参考文献第31-35页
第二篇 阿尔巴斯白绒山羊不同种类成体干细胞对转基因克隆效率影响的研究第35-92页
 第一章 阿尔巴斯白绒山羊不同种类成体干细胞分离培养及鉴定第35-51页
  前言第35-36页
  1 材料第36-37页
   ·主要仪器设备第36页
   ·实验动物第36页
   ·实验试剂及耗材第36页
   ·培养液第36-37页
  2 实验方法第37-40页
   ·ADSCs的分离培养第37页
   ·BMSCs的分离培养第37-38页
   ·MDSCs的分离培养及纯化第38页
   ·ADSCs标记分子鉴定第38-39页
   ·BMSCs标记分子鉴定第39页
   ·MDSCs标记分子鉴定第39页
   ·三类成体干细胞多能性检测第39-40页
  3 结果第40-47页
   ·三类成体干细胞形态特征第40-42页
   ·三类成体干细胞表面标记鉴定第42页
   ·三类成体干细胞多能性分析第42-47页
  4 讨论第47-49页
  参考文献第49-51页
 第二章 阿尔巴斯白绒山羊不同种类成体干细胞干性分析第51-70页
  前言第51-52页
  1 材料第52-53页
   ·主要仪器设备第52页
   ·实验动物第52页
   ·实验试剂及耗材第52页
   ·培养液第52-53页
  2 实验方法第53-57页
   ·免疫荧光技术检测干性基因的表达第53页
   ·Q-PCR检测干性基因和三胚层标记基因mRNA相对表达量第53-56页
   ·Western-blot检测干性基因和三胚层标记基因蛋白相对表达量第56页
   ·体内分化能力检测第56页
   ·数据统计分析第56-57页
  3 结果第57-65页
   ·ADSCs、BMSCs和MDSCs中胚胎干细胞特异性分子标记的表达第57页
   ·干性基因和三胚层标记基因mRNA的差异表达第57-59页
   ·干性基因和三胚层标记基因蛋白的差异表达第59-64页
   ·体内成瘤能力第64-65页
  4 讨论第65-68页
  参考文献第68-70页
 第三章 不同种类成体干细胞对阿尔巴斯白绒山羊转基因克隆效率的影响第70-92页
  前言第70-71页
  1 材料第71-73页
   ·主要仪器设备第71页
   ·实试剂及耗材第71-72页
   ·培养液第72-73页
  2 实验方法第73-77页
   ·G418敏感度的测定第73页
   ·细胞转染及筛选第73页
   ·转基因细胞体外生长状况及多能性检测第73-74页
   ·转基因重构胚胎的制备第74-75页
   ·不同细胞来源重构胚中DsRed2表达量分析第75-76页
   ·转基因阿尔巴斯白绒山羊的制备及检测第76-77页
  3 结果第77-86页
   ·G418敏感度测定第77页
   ·转基因细胞筛选及多克隆培养第77-78页
   ·转基因细胞体外生长状况及多能性检测第78-79页
   ·卵母细胞体外成熟及重构胚胎发育第79-81页
   ·重构胚中DsRed表达量分析第81-85页
   ·重构胚中5-methylcytosine、H4K5、H4K12和H3K18的表达第85页
   ·转基因羔羊的生产及检测第85-86页
  4 讨论第86-90页
  参考文献第90-92页
结论第92-94页
致谢第94-96页
攻读学位期间发表的学术论文第96-97页

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