目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-11页 |
ABSTRACT | 第11-18页 |
缩略词表 | 第18-19页 |
第一篇 哺乳动物成体干细胞研究概述 | 第19-35页 |
1 成体组织来源的干细胞 | 第19-21页 |
2 不同种类成体干细胞概述 | 第21-24页 |
·肌肉卫星细胞 | 第21-22页 |
·成体造血干细胞 | 第22-24页 |
·间充质干细胞 | 第24页 |
·脂肪细胞 | 第24页 |
3 成体干细胞干性分析 | 第24-31页 |
·成体干细胞的再生 | 第24-25页 |
·成体干细胞静息态和标记 | 第25-26页 |
·细胞移植 | 第26-27页 |
·体内谱系追踪 | 第27-28页 |
·实际干性和潜在干性 | 第28-31页 |
参考文献 | 第31-35页 |
第二篇 阿尔巴斯白绒山羊不同种类成体干细胞对转基因克隆效率影响的研究 | 第35-92页 |
第一章 阿尔巴斯白绒山羊不同种类成体干细胞分离培养及鉴定 | 第35-51页 |
前言 | 第35-36页 |
1 材料 | 第36-37页 |
·主要仪器设备 | 第36页 |
·实验动物 | 第36页 |
·实验试剂及耗材 | 第36页 |
·培养液 | 第36-37页 |
2 实验方法 | 第37-40页 |
·ADSCs的分离培养 | 第37页 |
·BMSCs的分离培养 | 第37-38页 |
·MDSCs的分离培养及纯化 | 第38页 |
·ADSCs标记分子鉴定 | 第38-39页 |
·BMSCs标记分子鉴定 | 第39页 |
·MDSCs标记分子鉴定 | 第39页 |
·三类成体干细胞多能性检测 | 第39-40页 |
3 结果 | 第40-47页 |
·三类成体干细胞形态特征 | 第40-42页 |
·三类成体干细胞表面标记鉴定 | 第42页 |
·三类成体干细胞多能性分析 | 第42-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-51页 |
第二章 阿尔巴斯白绒山羊不同种类成体干细胞干性分析 | 第51-70页 |
前言 | 第51-52页 |
1 材料 | 第52-53页 |
·主要仪器设备 | 第52页 |
·实验动物 | 第52页 |
·实验试剂及耗材 | 第52页 |
·培养液 | 第52-53页 |
2 实验方法 | 第53-57页 |
·免疫荧光技术检测干性基因的表达 | 第53页 |
·Q-PCR检测干性基因和三胚层标记基因mRNA相对表达量 | 第53-56页 |
·Western-blot检测干性基因和三胚层标记基因蛋白相对表达量 | 第56页 |
·体内分化能力检测 | 第56页 |
·数据统计分析 | 第56-57页 |
3 结果 | 第57-65页 |
·ADSCs、BMSCs和MDSCs中胚胎干细胞特异性分子标记的表达 | 第57页 |
·干性基因和三胚层标记基因mRNA的差异表达 | 第57-59页 |
·干性基因和三胚层标记基因蛋白的差异表达 | 第59-64页 |
·体内成瘤能力 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
第三章 不同种类成体干细胞对阿尔巴斯白绒山羊转基因克隆效率的影响 | 第70-92页 |
前言 | 第70-71页 |
1 材料 | 第71-73页 |
·主要仪器设备 | 第71页 |
·实试剂及耗材 | 第71-72页 |
·培养液 | 第72-73页 |
2 实验方法 | 第73-77页 |
·G418敏感度的测定 | 第73页 |
·细胞转染及筛选 | 第73页 |
·转基因细胞体外生长状况及多能性检测 | 第73-74页 |
·转基因重构胚胎的制备 | 第74-75页 |
·不同细胞来源重构胚中DsRed2表达量分析 | 第75-76页 |
·转基因阿尔巴斯白绒山羊的制备及检测 | 第76-77页 |
3 结果 | 第77-86页 |
·G418敏感度测定 | 第77页 |
·转基因细胞筛选及多克隆培养 | 第77-78页 |
·转基因细胞体外生长状况及多能性检测 | 第78-79页 |
·卵母细胞体外成熟及重构胚胎发育 | 第79-81页 |
·重构胚中DsRed表达量分析 | 第81-85页 |
·重构胚中5-methylcytosine、H4K5、H4K12和H3K18的表达 | 第85页 |
·转基因羔羊的生产及检测 | 第85-86页 |
4 讨论 | 第86-90页 |
参考文献 | 第90-92页 |
结论 | 第92-94页 |
致谢 | 第94-96页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第96-97页 |