| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 图目录 | 第11-13页 |
| 表目录 | 第13-14页 |
| 缩写对比表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-32页 |
| ·铜绿假单胞菌的致病因子 | 第15-17页 |
| ·细胞表面黏附因子 | 第15-16页 |
| ·胞外毒性产物 | 第16-17页 |
| ·铜绿假单胞菌的耐药机理 | 第17-21页 |
| ·固有性耐药 | 第17-18页 |
| ·获得性耐药 | 第18-20页 |
| ·适应性耐药 | 第20-21页 |
| ·铜绿假单胞菌的生物被膜 | 第21-25页 |
| ·胞外多聚基质(extracellular polymeric substance,EPS) | 第22-23页 |
| ·生物被膜的形成 | 第23-24页 |
| ·生物被膜形成的调控机制 | 第24-25页 |
| ·生物被膜与耐药的关系 | 第25页 |
| ·噬菌体 | 第25-29页 |
| ·噬菌体简介 | 第25-26页 |
| ·噬菌体分类 | 第26-28页 |
| ·溶原噬菌体与细菌生物被膜的关系 | 第28-29页 |
| ·细菌对氧化压力的耐受 | 第29-30页 |
| ·氧化压力的产生 | 第29页 |
| ·细菌对氧化压力的耐受及调节机制 | 第29-30页 |
| ·研究内容及意义 | 第30-32页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第32-54页 |
| ·实验材料 | 第32-39页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第32-35页 |
| ·培养基及溶液的配制 | 第35-38页 |
| ·抗生素 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38-39页 |
| ·实验仪器 | 第39页 |
| ·基本实验方法 | 第39-43页 |
| ·质粒DNA小量提取 | 第39-40页 |
| ·琼脂糖凝胶DNA片段纯化回收 | 第40页 |
| ·大肠杆菌(DH10B)感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·铜绿假单胞菌(PAO1)感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第41-42页 |
| ·酶切及连接反应 | 第42-43页 |
| ·电转化 | 第43页 |
| ·铜绿假单胞菌溶原噬菌体相关功能区研究 | 第43-50页 |
| ·随机PCR | 第43-44页 |
| ·转座子插入位点的确定 | 第44页 |
| ·基因过表量达 | 第44-45页 |
| ·基因敲除 | 第45-46页 |
| ·平板滤纸片法测定抗生素敏感性 | 第46-47页 |
| ·最小抑制浓度(MIC)测定 | 第47页 |
| ·生物被膜产量测定 | 第47页 |
| ·细菌运动性测定 | 第47-48页 |
| ·胞外多糖产量测定 | 第48页 |
| ·果蝇感染实验 | 第48-49页 |
| ·基因表达水平检测 | 第49页 |
| ·绿脓菌素产量测定 | 第49-50页 |
| ·蛋白水解酶活力测定 | 第50页 |
| ·铜绿假单胞菌PA2580基因产物功能研究 | 第50-54页 |
| ·PA2580蛋白表达载体的构建 | 第50页 |
| ·PA2580蛋白体外表达及纯化 | 第50-51页 |
| ·纯化蛋白的脱盐与贮存 | 第51页 |
| ·Bradford法蛋白定量 | 第51-52页 |
| ·蛋白特征吸收峰扫描 | 第52页 |
| ·NHD(P)H-醌类还原酶活性测定 | 第52-53页 |
| ·PA2580蛋白产物催化途径探究 | 第53-54页 |
| 第三章 实验结果 | 第54-79页 |
| ·铜绿假单胞菌溶原噬菌体相关功能区研究 | 第54-75页 |
| ·转座突变体中转座子插入位置的确定及相关研究 | 第54-57页 |
| ·转座突变体中转座子的插入位置 | 第54页 |
| ·转座突变体的耐药性 | 第54-55页 |
| ·转座突变体的生物被膜产量 | 第55-56页 |
| ·转座突变体的运动性 | 第56-57页 |
| ·转座子插入区域的基本信息 | 第57-58页 |
| ·基因PA0717的过表达及相关研究 | 第58-60页 |
| ·PA0717的过表达 | 第58-59页 |
| ·PA0717过表达菌株对Cb的耐药性 | 第59页 |
| ·PA0717过表达菌株的生物被膜产量 | 第59-60页 |
| ·操纵子PA0717-PA0719的过表达及相关研究 | 第60-63页 |
| ·PA0717-PA0719的过表达 | 第60-61页 |
| ·PA0717-PA0719过表达菌株对Cb的耐药性 | 第61-62页 |
| ·PA0717-PA0719过表达菌株的生物被膜产量 | 第62页 |
| ·PA0717-PA0719过表达菌株的运动性 | 第62-63页 |
| ·PA0716和PA0717基因间隔区功能研究 | 第63-75页 |
| ·PA0716和PA0717基因间隔区的敲除 | 第63-65页 |
| ·PA0716和PA0717间隔区突变体对Cb的耐药性 | 第65-66页 |
| ·PA0716和PA0717间隔区突变体的生物被膜产量 | 第66-67页 |
| ·PA0716和PA0717间隔区突变体的菌落形态和生长速率 | 第67-68页 |
| ·PA0716和PA0717间隔区突变体的运动性 | 第68-69页 |
| ·PA0716和PA0717间隔区突变体的胞外多糖产量 | 第69-70页 |
| ·PA0716和PA0717间隔区突变体的致病性 | 第70-71页 |
| ·PA0716和PA0717间隔区突变体中Ⅲ型分泌系统的表达 | 第71-72页 |
| ·PA0716和PA0717间隔区突变体的绿脓菌素产量 | 第72-73页 |
| ·PA0716和PA0717间隔区突变体的蛋白水解酶活力 | 第73-74页 |
| ·PA0716和PA0717间隔区突变与铜绿假单胞菌调控网络的关系 | 第74-75页 |
| ·铜绿假单胞菌PA2580基因产物功能研究 | 第75-79页 |
| ·研究背景 | 第75页 |
| ·PA2580蛋白表达载体构建 | 第75-76页 |
| ·PA2580蛋白产物体外表达及纯化 | 第76页 |
| ·PA2580蛋白产物的特征吸收峰 | 第76-77页 |
| ·PA2580蛋白产物的NADPH-醌类还原酶活性 | 第77-78页 |
| ·PA2580蛋白产物的催化途径 | 第78-79页 |
| 第四章 小结与讨论 | 第79-82页 |
| 参考文献 | 第82-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
