| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-17页 |
| ·背景介绍 | 第12-15页 |
| ·光呼吸作用简介 | 第12页 |
| ·叶酸简介 | 第12-13页 |
| ·甘氨酸脱羧酶和丝氨酸羟甲基转移酶简介 | 第13-15页 |
| ·叶酸与 GDCT 和 SHMT 蛋白的关系 | 第15页 |
| ·研究背景与研究意义 | 第15-16页 |
| ·研究背景 | 第15-16页 |
| ·研究意义 | 第16页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第16-17页 |
| 第二章 GDCT 与 SHMT 载体构建以及原核表达 | 第17-30页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·载体质粒 | 第17页 |
| ·菌种 | 第17页 |
| ·试剂盒 | 第17页 |
| ·生物酶 | 第17页 |
| ·其他使用到的试剂 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-24页 |
| ·GDCT 和 SHMT 基因克隆 | 第17-20页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第20-23页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒的大量制备 | 第23页 |
| ·基因工程菌的构建 | 第23-24页 |
| ·GDCT 和 SHMT 蛋白的诱导表达 | 第24页 |
| ·实验结果 | 第24-28页 |
| ·GDCT 和 SHMT 片段扩增结果 | 第24-25页 |
| ·GDCT 和 SHMT 基因片段连接中间载体检测结果 | 第25页 |
| ·中间载体酶切结果 | 第25-26页 |
| ·基因片段和载体准备情况 | 第26页 |
| ·载体构建结果 | 第26-27页 |
| ·GDCT 和 SHMT 蛋白诱导表达结果 | 第27-28页 |
| ·分析与讨论 | 第28-30页 |
| ·GDCT 和 SHMT 蛋白原核表达载体构建 | 第28-29页 |
| ·GDCT 和 SHMT 蛋白的诱导表达 | 第29-30页 |
| 第三章 SHMT 蛋白的分离纯化以及酶活测定 | 第30-44页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·SHMT 蛋白原核表达实验材料 | 第30页 |
| ·SHMT 蛋白酶活测定实验材料 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-38页 |
| ·SHMT 蛋白的大量表达 | 第30页 |
| ·细胞破碎 | 第30-31页 |
| ·蛋白的吸附 | 第31页 |
| ·蛋白的洗脱 | 第31页 |
| ·蛋白样品的脱盐 | 第31页 |
| ·填料的回收 | 第31-32页 |
| ·蛋白的检测 | 第32-35页 |
| ·SHMT 蛋白酶活测定 | 第35-38页 |
| ·实验结果 | 第38-42页 |
| ·SHMT 蛋白分离纯化实验结果 | 第38页 |
| ·SHMT 酶活测定实验结果 | 第38-42页 |
| ·分析与讨论 | 第42-44页 |
| ·SHMT 蛋白分离纯化 | 第42-43页 |
| ·SHMT 蛋白酶活测定 | 第43-44页 |
| 第四章 GDCT 和 SHMT 蛋白的同源建模以及定点突变 | 第44-55页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·同源建模实验材料 | 第44页 |
| ·定点突变实验材料 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-48页 |
| ·GDCT 蛋白同源建模 | 第44-45页 |
| ·GDCT 蛋白定点突变 | 第45页 |
| ·SHMT 蛋白同源建模 | 第45页 |
| ·SHMT 蛋白突变 | 第45-46页 |
| ·GDCT 和 SHMT 定点突变的具体实验方案 | 第46-48页 |
| ·实验结果与分析 | 第48-55页 |
| ·GDCT 与 SHMT 蛋白的三维结构模拟及活性位点预测 | 第48-53页 |
| ·GDCT 与 SHMT 蛋白定点突变结果 | 第53-54页 |
| ·结论与分析 | 第54-55页 |
| 第五章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |
