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小鼠卵泡发育过程中miRNA-224表达调控的分子机制研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一章 绪论第10-31页
   ·雌性生殖概述第10-25页
     ·雌性生殖系统第10-12页
     ·卵泡发育第12-25页
   ·MiRNAs与雌性生殖第25-31页
     ·MiRNAs生成和调控机制第25-26页
     ·MiRNAs对雌性生殖调控第26-31页
第二章 研究工作与结果讨论第31-60页
   ·p53和NF-κB p65协同调控小鼠卵巢腔前颗粒细胞miR-224转录第31-48页
     ·引言第31-33页
     ·研究结果第33-45页
       ·p53和p65抑制miR-224宿主基因(GABRE)启动子活性第33-37页
       ·腔前颗粒细胞(mpGCs)中p53和p65在转录水平上调控miR-224表达第37-39页
       ·p53-p65相互作用影响miR-224宿主基因(GABRE)启动子活性第39-41页
       ·p53和p65通过miR-224介导的靶基因Smad4途径影响腔前颗粒细胞增殖和雌二醇(E2)分泌第41-45页
     ·结果分析与讨论第45-47页
     ·本节小结第47-48页
   ·MiR-224通过靶向Ptx3调控小鼠卵丘扩展第48-60页
     ·引言第48-50页
     ·研究结果第50-57页
       ·卵泡发育中TGF-β1,miR-224和PTX3表达第50-57页
       ·MiR-224抑制小鼠卵丘扩展第51-53页
       ·MiR-224抑制小鼠排卵第53-57页
     ·结果分析与讨论第57-59页
     ·本节小结第59-60页
第三章 实验材料与方法第60-75页
   ·实验动物第60页
   ·实验试剂与寡核苷酸序列第60页
   ·生物信息学分析第60页
   ·基因组DNA抽提第60-61页
   ·质粒构建与转化第61-63页
   ·卵泡分离第63页
   ·细胞分离和培养第63-64页
   ·细胞转染和荧光素酶活性分析(Luciferase activity assay)第64-65页
   ·RNA抽提和反转录PCR(RT-PCR)第65-66页
   ·实时定量PCR(Real-time PCR)第66-67页
   ·免疫印迹(Western blotting)第67-68页
   ·细胞核质蛋白分离第68-69页
   ·染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)和sequential ChIP(re-ChIP)第69-70页
   ·免疫共沉淀(Immunoprecipitation assay)第70-71页
   ·细胞增殖检测和激素检测第71页
   ·酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)第71-72页
   ·腺病毒准备第72-73页
   ·COC分离和感染第73页
   ·腺病毒卵巢囊内注射第73-74页
   ·统计分析第74-75页
参考文献第75-94页
所获奖励和参加学术会议情况第94-95页
致谢第95-96页
攻读博士学位期间发表的学术论文第96页

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