摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 绪论 | 第10-31页 |
·雌性生殖概述 | 第10-25页 |
·雌性生殖系统 | 第10-12页 |
·卵泡发育 | 第12-25页 |
·MiRNAs与雌性生殖 | 第25-31页 |
·MiRNAs生成和调控机制 | 第25-26页 |
·MiRNAs对雌性生殖调控 | 第26-31页 |
第二章 研究工作与结果讨论 | 第31-60页 |
·p53和NF-κB p65协同调控小鼠卵巢腔前颗粒细胞miR-224转录 | 第31-48页 |
·引言 | 第31-33页 |
·研究结果 | 第33-45页 |
·p53和p65抑制miR-224宿主基因(GABRE)启动子活性 | 第33-37页 |
·腔前颗粒细胞(mpGCs)中p53和p65在转录水平上调控miR-224表达 | 第37-39页 |
·p53-p65相互作用影响miR-224宿主基因(GABRE)启动子活性 | 第39-41页 |
·p53和p65通过miR-224介导的靶基因Smad4途径影响腔前颗粒细胞增殖和雌二醇(E2)分泌 | 第41-45页 |
·结果分析与讨论 | 第45-47页 |
·本节小结 | 第47-48页 |
·MiR-224通过靶向Ptx3调控小鼠卵丘扩展 | 第48-60页 |
·引言 | 第48-50页 |
·研究结果 | 第50-57页 |
·卵泡发育中TGF-β1,miR-224和PTX3表达 | 第50-57页 |
·MiR-224抑制小鼠卵丘扩展 | 第51-53页 |
·MiR-224抑制小鼠排卵 | 第53-57页 |
·结果分析与讨论 | 第57-59页 |
·本节小结 | 第59-60页 |
第三章 实验材料与方法 | 第60-75页 |
·实验动物 | 第60页 |
·实验试剂与寡核苷酸序列 | 第60页 |
·生物信息学分析 | 第60页 |
·基因组DNA抽提 | 第60-61页 |
·质粒构建与转化 | 第61-63页 |
·卵泡分离 | 第63页 |
·细胞分离和培养 | 第63-64页 |
·细胞转染和荧光素酶活性分析(Luciferase activity assay) | 第64-65页 |
·RNA抽提和反转录PCR(RT-PCR) | 第65-66页 |
·实时定量PCR(Real-time PCR) | 第66-67页 |
·免疫印迹(Western blotting) | 第67-68页 |
·细胞核质蛋白分离 | 第68-69页 |
·染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)和sequential ChIP(re-ChIP) | 第69-70页 |
·免疫共沉淀(Immunoprecipitation assay) | 第70-71页 |
·细胞增殖检测和激素检测 | 第71页 |
·酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) | 第71-72页 |
·腺病毒准备 | 第72-73页 |
·COC分离和感染 | 第73页 |
·腺病毒卵巢囊内注射 | 第73-74页 |
·统计分析 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-94页 |
所获奖励和参加学术会议情况 | 第94-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第96页 |