致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-16页 |
符号表 | 第16-18页 |
缩略语表 | 第18-20页 |
第一章 绪论 | 第20-44页 |
·引言 | 第20-21页 |
·抗体及其分离方法 | 第21-28页 |
·抗体结构与功能 | 第21-23页 |
·抗体的分离纯化方法 | 第23-28页 |
·疏水性电荷诱导层析 | 第28-32页 |
·疏水性电荷诱导层析的原理 | 第28-29页 |
·疏水性电荷诱导配基 | 第29-31页 |
·疏水性电荷诱导层析分离抗体 | 第31-32页 |
·分子模拟及其在层析研究中的应用 | 第32-40页 |
·分子对接技术 | 第32-34页 |
·分子动力学模拟 | 第34-38页 |
·分子模拟在蛋白层析领域中的应用 | 第38-40页 |
·计算机辅助层析配基设计 | 第40-42页 |
·基于天然配基结构的理性设计 | 第40-41页 |
·基于目标蛋白结构的理性设计 | 第41-42页 |
·本文研究思路 | 第42-44页 |
第二章 疏水性电荷诱导层析分离抗体的尝试 | 第44-66页 |
·引言 | 第44-45页 |
·材料和方法 | 第45-48页 |
·试剂与仪器 | 第45页 |
·吸附等温线测定 | 第45-46页 |
·动态载量测定 | 第46页 |
·层析分离过程优化 | 第46-47页 |
·IgG纯度和收率测定 | 第47页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第47页 |
·CHO宿主细胞蛋白(HCP)的测定 | 第47-48页 |
·结果与讨论 | 第48-65页 |
·抗体静态吸附性能比较 | 第48-53页 |
·抗体动态载量比较 | 第53-59页 |
·层析过程优化 | 第59-64页 |
·HCP残留分析 | 第64-65页 |
·本章小结 | 第65-66页 |
第三章 含血清白蛋白料液中分离抗体的过程优化 | 第66-80页 |
·引言 | 第66-67页 |
·材料和方法 | 第67-69页 |
·试剂与仪器 | 第67页 |
·吸附等温线测定 | 第67页 |
·Zeta电位测定 | 第67页 |
·层析柱中吸附行为 | 第67-68页 |
·层析柱中解吸行为 | 第68页 |
·层析过程优化 | 第68页 |
·蛋白分析 | 第68-69页 |
·结果与讨论 | 第69-78页 |
·蛋白静态吸附行为 | 第69-71页 |
·蛋白在层析柱中吸附行为 | 第71-72页 |
·蛋白在层析柱中解吸行为 | 第72-75页 |
·蛋白吸附机理探索 | 第75-76页 |
·层析分离优化 | 第76-78页 |
·本章小结 | 第78-80页 |
第四章 辛酸钠作为助分离剂促进IgG的选择性分离 | 第80-98页 |
·引言 | 第80-81页 |
·材料和方法 | 第81-83页 |
·试剂与仪器 | 第81页 |
·吸附等温线 | 第81页 |
·动态吸附和顶替实验 | 第81-82页 |
·蛋白在层析柱中吸附行为 | 第82页 |
·蛋白在层析柱中解吸行为 | 第82页 |
·层析过程优化 | 第82页 |
·蛋白分析方法 | 第82-83页 |
·结果与讨论 | 第83-95页 |
·辛酸钠对蛋白静态吸附的影响 | 第83-85页 |
·辛酸钠对蛋白动态吸附的影响 | 第85-87页 |
·蛋白在层析柱中吸附行为 | 第87页 |
·蛋白在层析柱中解吸行为 | 第87-90页 |
·层析分离优化 | 第90-92页 |
·辛酸选择性结合白蛋白的机理探讨 | 第92-95页 |
·本章小结 | 第95-98页 |
第五章 疏水性电荷诱导配基-IgG相互作用的分子模拟 | 第98-130页 |
·引言 | 第98-99页 |
·分子模型和分子模拟方法 | 第99-107页 |
·分子模型 | 第99-101页 |
·分子对接 | 第101-102页 |
·蛋白结合取向搜索 | 第102-103页 |
·分子动力学模拟 | 第103-104页 |
·结合自由能计算 | 第104-106页 |
·其它分析 | 第106-107页 |
·结果与讨论 | 第107-128页 |
·MEP分子力场参数的调整 | 第107-108页 |
·分子对接 | 第108-111页 |
·MD模拟分析MEP-Fc结合 | 第111-117页 |
·配基密度对Fc结合的影响 | 第117-118页 |
·蛋白取向对结合的影响 | 第118-125页 |
·酸性条件下蛋白解吸机理 | 第125-128页 |
·本章小结 | 第128-130页 |
第六章 天然特异性配基-抗体Fc片段结合模式的分子模拟 | 第130-144页 |
·引言 | 第130页 |
·分子模型和分子方法 | 第130-133页 |
·分子模型 | 第130-132页 |
·分子动力学模拟 | 第132页 |
·结合自由能计算 | 第132-133页 |
·虚拟丙氨酸扫描分析 | 第133页 |
·结果与讨论 | 第133-143页 |
·特异性配基-Fc的结合自由能 | 第133-135页 |
·特异性配基上的热点残基 | 第135-138页 |
·Fc上的热点残基 | 第138页 |
·特异性配基-Fc的结合模式分析 | 第138-143页 |
·本章小结 | 第143-144页 |
第七章 新型疏水性电荷诱导配基设计及抗体分离 | 第144-170页 |
·引言 | 第144页 |
·HCIC新配基设计 | 第144-146页 |
·材料和方法 | 第146-149页 |
·试剂与仪器 | 第146页 |
·介质制备 | 第146-148页 |
·吸附等温线测定 | 第148页 |
·动态载量测定 | 第148页 |
·保留因子和洗脱收率 | 第148页 |
·层析分离优化 | 第148-149页 |
·IgG纯度和收率 | 第149页 |
·SDS-PAGE分析 | 第149页 |
·结果和讨论 | 第149-168页 |
·ABM和W-ABM介质的静态吸附性能 | 第149-159页 |
·ABM和W-ABM介质的动态吸附性能 | 第159-161页 |
·保留因子和洗脱收率 | 第161-162页 |
·IgG和BSA混合蛋白的层析分离 | 第162-164页 |
·单抗层析分离 | 第164-168页 |
·本章小结 | 第168-170页 |
第八章 总结和展望 | 第170-174页 |
·结论 | 第170-172页 |
·展望 | 第172-174页 |
参考文献 | 第174-186页 |
攻读博士学位期间的研究成果 | 第186-188页 |
作者简介 | 第188页 |