| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 英文缩略词（Abbreviation） | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一部分 新藤黄酸对黑色素瘤 B16 细胞增殖的影响 | 第16-23页 |
| 1 实验材料及仪器 | 第16-17页 |
| ·细胞系及细胞培养 | 第16页 |
| ·药物 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要试剂配制 | 第16-17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-19页 |
| ·细胞培养和传代 | 第17-18页 |
| ·细胞冻存和复苏 | 第18页 |
| ·细胞冻存 | 第18页 |
| ·细胞复苏 | 第18页 |
| ·细胞分组及处理 | 第18页 |
| ·新藤黄酸药液的配制 | 第18页 |
| ·细胞计数方法 | 第18-19页 |
| ·新藤黄酸对黑色素瘤 B16 细胞的敏感性试验（MTT 法）12 | 第19页 |
| ·倒置显微镜观察新藤黄酸对 B16 细胞形态的影响 | 第19页 |
| ·统计处理方法 | 第19页 |
| 3 实验结果 | 第19-22页 |
| ·新藤黄酸对黑色素瘤 B16 细胞活力的影响（MTT 法） | 第19-21页 |
| ·倒置显微镜观察新藤黄酸对黑色素瘤 B16 细胞形态的影响 | 第21-22页 |
| 4 讨论 | 第22页 |
| 5 小结 | 第22-23页 |
| 第二部分 新藤黄酸诱导黑色素瘤 B16 细胞凋亡作用的研究 | 第23-37页 |
| 1 实验材料及仪器 | 第23-24页 |
| ·细胞系及细胞培养 | 第23页 |
| ·药物 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要试剂配制 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| 2 实验方法 | 第24-28页 |
| ·细胞培养、传代 | 第24页 |
| ·细胞冻存和复苏 | 第24-25页 |
| ·细胞冻存 | 第24-25页 |
| ·细胞复苏 | 第25页 |
| ·细胞分组及处理 | 第25页 |
| ·新藤黄酸药液的配制 | 第25页 |
| ·细胞计数方法 | 第25页 |
| ·流式细胞术实验 | 第25-26页 |
| ·Annexin V-FITC/PI 双染 | 第25-26页 |
| ·细胞内活性氧的检测 | 第26页 |
| ·线粒体膜电位检测 | 第26页 |
| ·细胞凋亡的形态学检测 | 第26-27页 |
| ·AO/EB 染色检测 | 第26页 |
| ·Hochest33258 荧光染色 | 第26-27页 |
| ·统计处理方法 | 第27-28页 |
| 3 实验结果 | 第28-35页 |
| ·流式细胞术实验 | 第28-33页 |
| ·细胞凋亡率的测定（Annexin V-FITC/PI 染色） | 第28-29页 |
| ·细胞内活性氧（ROS）的测定 | 第29-31页 |
| ·线粒体膜电位的检测 | 第31-33页 |
| ·荧光显微镜观察（AO/EB 染色） | 第33-34页 |
| ·荧光显微镜观察（Hochest33258 荧光染色） | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| ·新藤黄酸诱导 B16 细胞凋亡 | 第35页 |
| ·新藤黄酸对 B16 细胞内线粒体的损伤 | 第35-36页 |
| 5 小结 | 第36-37页 |
| 第三部分 新藤黄酸诱导 B16 细胞凋亡的分子机制研究 | 第37-52页 |
| 1 实验材料及仪器 | 第37-40页 |
| ·细胞系及细胞培养 | 第37页 |
| ·药物 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要试剂配制 | 第37-39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-45页 |
| ·细胞分组 | 第40页 |
| ·细胞处理 | 第40页 |
| ·蛋白样品制备 | 第40页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第40-41页 |
| ·SDS－PAGE 凝胶电泳 | 第41-44页 |
| ·统计处理方法 | 第44-45页 |
| 3 实验结果 | 第45-50页 |
| ·新藤黄酸对 B16 细胞 caspase-3 蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
| ·新藤黄酸对 B16 细胞 PI3K 和 p-PI3K 蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
| ·新藤黄酸对 B16 细胞 Akt 和 p-Akt 蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
| ·新藤黄酸对 B16 细胞 p-mTOR 蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
| ·新藤黄酸对对 B16 细胞 PTEN 蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 5 小结 | 第51-52页 |
| 总结 | 第52-54页 |
| 1 结论 | 第52页 |
| 2 创新性小结 | 第52-53页 |
| 3 尚待深入研究的内容 | 第53-54页 |
| 实验线路图 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 综述 | 第59-66页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
