| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-49页 |
| 第一节 中心体与中心体蛋白 | 第12-31页 |
| ·中心体的结构 | 第12-14页 |
| ·中心体复制 | 第14-16页 |
| ·中心体的功能 | 第16-27页 |
| ·中心体蛋白 | 第27-31页 |
| 第二节 血管新生与细胞迁移 | 第31-43页 |
| ·血管新生 | 第32-36页 |
| ·细胞迁移 | 第36-43页 |
| 第三节 Cep70 的结构和功能 | 第43-49页 |
| ·Cep70 的结构 | 第43-44页 |
| ·Cep70 与纤毛 | 第44-46页 |
| ·CRC70 与中心粒合成 | 第46-48页 |
| ·研究 Cep70 与微管相关细胞活动的意义 | 第48-49页 |
| 第二章 Cep70 调节有丝分裂纺锤体组装 | 第49-85页 |
| 第一节 材料与方法 | 第49-62页 |
| ·细胞系 | 第49-50页 |
| ·抗体及试剂 | 第50-51页 |
| ·本章用到的质粒 | 第51-52页 |
| ·质粒构建 | 第52-55页 |
| ·MBP 融合蛋白的表达及纯化 | 第55页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第55-56页 |
| ·γ-tubulin 蛋白的体外转录翻译 | 第56-57页 |
| ·质粒提取与转染 | 第57页 |
| ·siRNA 的转染 | 第57-58页 |
| ·免疫印迹分析 | 第58页 |
| ·免疫共沉淀 | 第58-59页 |
| ·GST pull-down 实验 | 第59页 |
| ·MBP pull-down 实验 | 第59页 |
| ·免疫荧光显微分析 | 第59-60页 |
| ·测量 Cep70 在中心体上的荧光强度 | 第60页 |
| ·体外微管聚合实验 | 第60-61页 |
| ·微管再生实验 | 第61页 |
| ·有丝分裂纺锤体定向的分析 | 第61页 |
| ·统计学分析 | 第61-62页 |
| 第二节 结果与分析 | 第62-83页 |
| ·Cep70 在细胞周期的各个时期都定位在中心体上 | 第62-66页 |
| ·Cep70 在细胞内及体外与 -tubulin 相互作用 | 第66-68页 |
| ·Cep70 通过 75-326 氨基酸与 -tubulin 相互作用并定位在中心体上 | 第68-71页 |
| ·-tubulin 介导 Cep70 定位在中心体上 | 第71-75页 |
| ·Cep70 调节微管组织 | 第75-78页 |
| ·Cep70 在体外促进微管组装 | 第78-79页 |
| ·Cep70 对有丝分裂纺锤体的组织及定向具有重要作用 | 第79-83页 |
| 第三节 讨论 | 第83-85页 |
| ·中心体 Cep70 通过 coiled coil 结构域与 -tubulin 相互作用 | 第83-84页 |
| ·Cep70 对微管组织的调节 | 第84页 |
| ·Cep70 调节有丝分裂纺锤体的定向 | 第84-85页 |
| 第三章 Cep70 调节细胞迁移和血管新生 | 第85-117页 |
| 第一节 材料与方法 | 第85-96页 |
| ·细胞系 | 第85-86页 |
| ·抗体及试剂 | 第86-87页 |
| ·本章用到的质粒 | 第87页 |
| ·质粒转染 | 第87-88页 |
| ·siRNA 的转染 | 第88页 |
| ·shRNA 的构建 | 第88-89页 |
| ·质粒的构建 | 第89-91页 |
| ·划痕愈合实验 | 第91页 |
| ·Transwell 实验 | 第91页 |
| ·内皮细胞成管实验 | 第91-92页 |
| ·微管再生实验 | 第92页 |
| ·三维毛细血管出芽形成实验 | 第92-93页 |
| ·体内血管新生诱导实验 | 第93页 |
| ·FITC-Lectin 含量的测定 | 第93页 |
| ·细胞极化实验 | 第93-94页 |
| ·冷冻切片免疫荧光染色 | 第94页 |
| ·活细胞成像 | 第94页 |
| ·免疫印迹分析 | 第94-95页 |
| ·融合蛋白 GST-PBD 和 GST-RBD 的诱导表达 | 第95页 |
| ·Cdc42、Rac1 和 RhoA 活性的检测 | 第95-96页 |
| 第二节 结果与分析 | 第96-115页 |
| ·Cep70 在小鼠体内血管新生中发挥重要作用 | 第96-99页 |
| ·Cep70 表达下调抑制体外血管新生 | 第99-102页 |
| ·Cep70 调节血管内皮细胞的迁移 | 第102-106页 |
| ·Cep70 调节血管内皮细胞的极化 | 第106-109页 |
| ·Cep70 调节迁移细胞中微管骨架的重新组织 | 第109-112页 |
| ·Cdc42 和 Rac1 的活化在 Cep70 调节体外血管新生中的作用 | 第112-115页 |
| 第三节 讨论 | 第115-117页 |
| 第四章 结论与展望 | 第117-119页 |
| 第一节 结论 | 第117页 |
| 第二节 展望 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 个人简历 在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第135-137页 |
