草鱼促性腺激素基因原核表达及多克隆抗体的制备
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩略语表 | 第7-11页 |
| 1. 文献综述、研究内容及意义 | 第11-20页 |
| ·鱼类脑垂体概述 | 第11-12页 |
| ·促性腺激素 | 第12-14页 |
| ·促性腺激素受体 | 第14-16页 |
| ·鱼类促性腺激素基因重组研究进展 | 第16-18页 |
| ·研究内容和意义 | 第18-20页 |
| 2. 材料与方法 | 第20-41页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·菌株和载体 | 第21-22页 |
| ·草鱼 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-41页 |
| ·草鱼垂体总RNA提取 | 第22-23页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
| ·促性腺激素亚基ORF的克隆 | 第24-29页 |
| ·原核表达重组质粒的构建 | 第29-31页 |
| ·草鱼促性腺激素基因的原核诱导表达 | 第31-36页 |
| ·SDS-PAGE法纯化目的蛋白 | 第36-39页 |
| ·抗体制备方法 | 第39-41页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第41-57页 |
| ·草鱼垂体RNA的提取 | 第41页 |
| ·草鱼促性腺激素GTHα亚基的多克隆抗体的制备 | 第41-46页 |
| ·GTHα基因的PCR扩增 | 第41-42页 |
| ·pMD-18-T-GTHα重组质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·pGEX-4T-1-GTHα重组质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·GST-GTHα融合蛋白的诱导表达 | 第44-45页 |
| ·Western-blot鉴定 | 第45页 |
| ·GTHα多克隆抗体制备 | 第45-46页 |
| ·GTHα抗血清特异性检测 | 第46页 |
| ·草鱼促性腺激素FSHβ亚基的多克隆抗体的制备 | 第46-51页 |
| ·FSHβ基因的PCR扩增 | 第46-47页 |
| ·pMD-18-T-FSHβ重组质粒的构建 | 第47-48页 |
| ·pGEX-4-1-FSHβ重组质粒的构建 | 第48-49页 |
| ·GST-FSHβ融合蛋白的诱导表达 | 第49-50页 |
| ·FSHβ多克隆抗体制备 | 第50页 |
| ·FSHβ抗血清的特异性检测 | 第50-51页 |
| ·草鱼促性腺激素LHβ亚基的多克隆抗体的制备 | 第51-57页 |
| ·LHβ基因的PCR扩增 | 第51-52页 |
| ·pMD-18-T-LHβ重组质粒的构建 | 第52-53页 |
| ·pGEX-4T-1-LHβ重组质粒的构建 | 第53-54页 |
| ·GST-LHβ融合蛋白的诱导表达 | 第54-55页 |
| ·Western-blot鉴定 | 第55-56页 |
| ·pET-32a-LHβ重组质粒的构建 | 第56页 |
| ·His-LHβ融合蛋白的诱导表达 | 第56-57页 |
| 4. 讨论 | 第57-60页 |
| 5. 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-74页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
