英文缩略词表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
前言 | 第14-30页 |
·JE 的流行现状及危害 | 第14-16页 |
·JE 在世界范围内的流行 | 第14-15页 |
·人感染 JEV 及治疗 | 第15-16页 |
·JE 对畜牧业的影响 | 第16页 |
·JE 的病原特征 | 第16-21页 |
·JEV 的病毒形态和基因组结构 | 第16-18页 |
·JEV 的病毒蛋白 | 第18-21页 |
·非结构蛋白 | 第18-19页 |
·结构蛋白 | 第19-21页 |
·JEV 在宿主细胞内的增殖 | 第21-23页 |
·JEV 的自然宿主与传播模式 | 第23-25页 |
·JEV 在自然界的传播 | 第23页 |
·JEV 的经典传播模式 | 第23-24页 |
·JEV 的家畜与野生动物宿主 | 第24-25页 |
·犬感染 JEV 的研究 | 第25-26页 |
·JE 疫苗的研究进展 | 第26-30页 |
·传统的疫苗 | 第26-28页 |
·灭活疫苗 | 第27页 |
·减毒活疫苗 | 第27-28页 |
·新型疫苗 | 第28-30页 |
·嵌合病毒疫苗 | 第28页 |
·DNA 疫苗 | 第28-29页 |
·基因工程亚单位疫苗 | 第29页 |
·病毒样颗粒(VLP)疫苗 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-48页 |
·材料 | 第30-35页 |
·菌株、载体、细胞株与毒株 | 第30页 |
·宠物犬血清 | 第30-31页 |
·主要商品化试剂、试剂盒和实验动物 | 第31页 |
·实验所用溶液及其配置 | 第31-33页 |
·细菌培养相关试剂 | 第31页 |
·琼脂糖核酸电泳相关试剂 | 第31-32页 |
·SDS-PAGE 蛋白电泳相关试剂 | 第32页 |
·Western-blot 相关试剂 | 第32-33页 |
·ELISA 检测相关试剂 | 第33页 |
·蛋白质纯化相关试剂 | 第33页 |
·实验所用主要仪器设备 | 第33-35页 |
·实验方法 | 第35-48页 |
·pET-32a-EIII 的质粒信息与双酶切鉴定 | 第35-36页 |
·载体及连接片段信息 | 第35页 |
·插入的序列信息 | 第35-36页 |
·重组质粒的双酶切鉴定 | 第36页 |
·重组蛋白的小量表达与鉴定 | 第36-40页 |
·大肠杆菌感受态细胞(BL21)的制备 | 第36-37页 |
·阳性质粒的转化 | 第37页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第37-38页 |
·SDS-PAGE 电泳分析重组蛋白的表达 | 第38-39页 |
·表达产物的 Western blot 鉴定 | 第39-40页 |
·重组蛋白的大量表达与纯化 | 第40-42页 |
·表达产物的状态分析 | 第40页 |
·表达产物的纯化 | 第40-41页 |
·包涵体蛋白的复性 | 第41页 |
·纯化蛋白浓度的测定 | 第41-42页 |
·pET-32a-EIII 蛋白多克隆抗体的制备 | 第42页 |
·多克隆抗体的鉴定 | 第42-45页 |
·间接 ELISA 测定多抗血清的效价 | 第42-43页 |
·多抗血清与原核表达蛋白反应的灵敏性试验 | 第43页 |
·多抗血清与全病毒蛋白的反应 | 第43-45页 |
·间接免疫荧光(IFA)测定多抗与病毒的反应原性 | 第45页 |
·多克隆抗体 JEV 中和抗体的测定 | 第45-46页 |
·JEV 毒价测定 | 第45-46页 |
·空斑减少中和试验(PRNT50) | 第46页 |
·犬血清 JEV 中和抗体的测定 | 第46-47页 |
·微量细胞中和试验法 | 第46-47页 |
·统计学分析 | 第47页 |
·比格犬人工感染 JEV 试验 | 第47-48页 |
·选用比格犬 | 第47页 |
·犬感染 JEV 及血清样品的采集 | 第47页 |
·犬血清中和抗体的测定 | 第47-48页 |
3 结果与分析 | 第48-60页 |
·质粒的酶切鉴定 | 第48页 |
·PET-32A-EIII 蛋白的原核表达和鉴定 | 第48-49页 |
·原核表达蛋白的纯化与浓度的测定 | 第49-51页 |
·间接 ELISA 测定多抗血清的效价 | 第51-53页 |
·多克隆抗体与原核表达蛋白和浓缩的全病毒蛋白的反应 | 第53-54页 |
·浓缩的全病毒蛋白的鉴定 | 第53页 |
·多克隆抗体与原核表达蛋白和浓缩的 JEV 的反应 | 第53-54页 |
·多克隆抗体与 JEV 反应的 IFA 结果 | 第54-55页 |
·多克隆抗体 JEV 中和抗体的测定 | 第55-56页 |
·宠物犬 JEV 中和抗体阳性率与各因素之间的关系 | 第56-59页 |
·JEV 中和抗体的月份和季节性变化分析 | 第56-57页 |
·流行季节前后宠物犬 JEV 中和抗体阳性率差异分析 | 第57-58页 |
·不同年龄宠物犬 JEV 中和抗体阳性率差异分析 | 第58-59页 |
·不同性别宠物 JEV 中和抗体阳性率差异分析 | 第59页 |
·宠物犬人工感染 JEV 试验 | 第59-60页 |
·感染 JEV 后临床观察 | 第59页 |
·血清 JEV 中和抗体的动态变化 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
研究生期间发表论文及专利 | 第74页 |