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抗乙型脑炎病毒E蛋白多克隆抗体的制备及宠物犬感染乙脑病毒血清中和抗体的动态变化研究

英文缩略词表第1-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-14页
前言第14-30页
   ·JE 的流行现状及危害第14-16页
     ·JE 在世界范围内的流行第14-15页
     ·人感染 JEV 及治疗第15-16页
     ·JE 对畜牧业的影响第16页
   ·JE 的病原特征第16-21页
     ·JEV 的病毒形态和基因组结构第16-18页
     ·JEV 的病毒蛋白第18-21页
       ·非结构蛋白第18-19页
       ·结构蛋白第19-21页
   ·JEV 在宿主细胞内的增殖第21-23页
   ·JEV 的自然宿主与传播模式第23-25页
     ·JEV 在自然界的传播第23页
     ·JEV 的经典传播模式第23-24页
     ·JEV 的家畜与野生动物宿主第24-25页
   ·犬感染 JEV 的研究第25-26页
   ·JE 疫苗的研究进展第26-30页
     ·传统的疫苗第26-28页
       ·灭活疫苗第27页
       ·减毒活疫苗第27-28页
     ·新型疫苗第28-30页
       ·嵌合病毒疫苗第28页
       ·DNA 疫苗第28-29页
       ·基因工程亚单位疫苗第29页
       ·病毒样颗粒(VLP)疫苗第29-30页
2 材料与方法第30-48页
   ·材料第30-35页
     ·菌株、载体、细胞株与毒株第30页
     ·宠物犬血清第30-31页
     ·主要商品化试剂、试剂盒和实验动物第31页
     ·实验所用溶液及其配置第31-33页
       ·细菌培养相关试剂第31页
       ·琼脂糖核酸电泳相关试剂第31-32页
       ·SDS-PAGE 蛋白电泳相关试剂第32页
       ·Western-blot 相关试剂第32-33页
       ·ELISA 检测相关试剂第33页
       ·蛋白质纯化相关试剂第33页
     ·实验所用主要仪器设备第33-35页
   ·实验方法第35-48页
     ·pET-32a-EIII 的质粒信息与双酶切鉴定第35-36页
       ·载体及连接片段信息第35页
       ·插入的序列信息第35-36页
       ·重组质粒的双酶切鉴定第36页
     ·重组蛋白的小量表达与鉴定第36-40页
       ·大肠杆菌感受态细胞(BL21)的制备第36-37页
       ·阳性质粒的转化第37页
       ·重组蛋白的诱导表达第37-38页
       ·SDS-PAGE 电泳分析重组蛋白的表达第38-39页
       ·表达产物的 Western blot 鉴定第39-40页
     ·重组蛋白的大量表达与纯化第40-42页
       ·表达产物的状态分析第40页
       ·表达产物的纯化第40-41页
       ·包涵体蛋白的复性第41页
       ·纯化蛋白浓度的测定第41-42页
     ·pET-32a-EIII 蛋白多克隆抗体的制备第42页
     ·多克隆抗体的鉴定第42-45页
       ·间接 ELISA 测定多抗血清的效价第42-43页
       ·多抗血清与原核表达蛋白反应的灵敏性试验第43页
       ·多抗血清与全病毒蛋白的反应第43-45页
       ·间接免疫荧光(IFA)测定多抗与病毒的反应原性第45页
     ·多克隆抗体 JEV 中和抗体的测定第45-46页
       ·JEV 毒价测定第45-46页
       ·空斑减少中和试验(PRNT50)第46页
     ·犬血清 JEV 中和抗体的测定第46-47页
       ·微量细胞中和试验法第46-47页
       ·统计学分析第47页
     ·比格犬人工感染 JEV 试验第47-48页
       ·选用比格犬第47页
       ·犬感染 JEV 及血清样品的采集第47页
       ·犬血清中和抗体的测定第47-48页
3 结果与分析第48-60页
   ·质粒的酶切鉴定第48页
   ·PET-32A-EIII 蛋白的原核表达和鉴定第48-49页
   ·原核表达蛋白的纯化与浓度的测定第49-51页
   ·间接 ELISA 测定多抗血清的效价第51-53页
   ·多克隆抗体与原核表达蛋白和浓缩的全病毒蛋白的反应第53-54页
     ·浓缩的全病毒蛋白的鉴定第53页
     ·多克隆抗体与原核表达蛋白和浓缩的 JEV 的反应第53-54页
   ·多克隆抗体与 JEV 反应的 IFA 结果第54-55页
   ·多克隆抗体 JEV 中和抗体的测定第55-56页
   ·宠物犬 JEV 中和抗体阳性率与各因素之间的关系第56-59页
     ·JEV 中和抗体的月份和季节性变化分析第56-57页
     ·流行季节前后宠物犬 JEV 中和抗体阳性率差异分析第57-58页
     ·不同年龄宠物犬 JEV 中和抗体阳性率差异分析第58-59页
     ·不同性别宠物 JEV 中和抗体阳性率差异分析第59页
   ·宠物犬人工感染 JEV 试验第59-60页
     ·感染 JEV 后临床观察第59页
     ·血清 JEV 中和抗体的动态变化第59-60页
4 讨论第60-63页
5 结论第63-64页
参考文献第64-73页
致谢第73-74页
研究生期间发表论文及专利第74页

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