| 符号说明 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 1 前言 | 第15-34页 |
| ·葱叶枯匍柄霉研究进展 | 第15-17页 |
| ·匍柄霉属研究概述 | 第15-16页 |
| ·葱叶枯匍柄霉分类地位及生物学特性 | 第16-17页 |
| ·真菌有性生殖研究进展 | 第17-23页 |
| ·有性生殖的优势 | 第17-18页 |
| ·有性生殖与环境因素 | 第18-19页 |
| ·有性生殖与交配识别 | 第19-20页 |
| ·同宗配合与异宗配合 | 第20-21页 |
| ·真菌性染色体进化 | 第21-22页 |
| ·单性线粒体遗传生殖与两性线粒体遗传生殖 | 第22页 |
| ·真菌有性生殖相关基因研究现状 | 第22-23页 |
| ·交配型基因研究进展 | 第23-26页 |
| ·子囊菌交配型基因序列的结构与命名 | 第24页 |
| ·交配型位点编码产物及功能研究 | 第24-25页 |
| ·交配型基因基础理论的应用 | 第25-26页 |
| ·在病原真菌致病性进化方面的应用 | 第26页 |
| ·在真菌进化研究中的应用 | 第26页 |
| ·匍柄霉交配型基因的研究进展 | 第26-27页 |
| ·匍柄霉交配型基因的结构 | 第26-27页 |
| ·匍柄霉交配型基因与生殖方式研究 | 第27页 |
| ·匍柄霉交配型基因研究的目的和意义 | 第27页 |
| ·丝状真菌遗传转化研究进展 | 第27-32页 |
| ·电击转化法 | 第28页 |
| ·基因枪转化 | 第28页 |
| ·PEG 介导的原生质体转化 | 第28-29页 |
| ·PEG 介导的原生质体转化机理 | 第28-29页 |
| ·PEG 介导的原生质体转化特点 | 第29页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第29-32页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化研究背景 | 第29页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化机理 | 第29-31页 |
| ·农杆菌介导丝状真菌转化的特点 | 第31-32页 |
| ·Southern 杂交技术 | 第32-33页 |
| ·Southern 杂交技术原理 | 第32页 |
| ·地高辛随机引物法标记探针的 Southern 杂交技术 | 第32-33页 |
| ·实验目的及意义 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-56页 |
| ·试验材料 | 第34-38页 |
| ·试验所用菌株与质粒 | 第34页 |
| ·常用试剂 | 第34页 |
| ·仪器 | 第34页 |
| ·常用培养基的配制 | 第34-35页 |
| ·常用试剂的配制 | 第35-38页 |
| ·试验方法 | 第38-56页 |
| ·Southern 杂交检测野生型葱叶枯匍柄霉基因组 DNA 中 MAT1-1、MAT1-2基因拷贝数 | 第38-45页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第38页 |
| ·探针模板的合成 | 第38-40页 |
| ·DIG-DNA 探针的准备 | 第40页 |
| ·准备所需试剂 | 第40-41页 |
| ·定量标记反应效率 | 第41-42页 |
| ·基因组 DNA 的酶切与分离 | 第42-43页 |
| ·转膜前凝胶处理 | 第43页 |
| ·DNA 转膜 | 第43-44页 |
| ·Southern 杂交过程 | 第44页 |
| ·膜的洗涤 | 第44页 |
| ·免疫检测 | 第44-45页 |
| ·葱叶枯匍柄霉（S. botryosum）交配型基因 MAT1-1、MAT1-2 敲除载体的构建 | 第45-50页 |
| ·MAT1-1 基因和 MAT1-2 基因的左右侧翼序列的获得 | 第46-47页 |
| ·MAT1-1 基因敲除载体 pBIG3C28a-1R-1L 及 MAT1-2 基因敲除载体pBIG3C28a-2R-2L 的构建 | 第47-49页 |
| ·敲除载体转化农杆菌 | 第49-50页 |
| ·根癌农杆菌介导的葱叶枯匍柄霉遗传转化系统的建立 | 第50-52页 |
| ·抑制葱叶枯匍柄霉野生型生长的潮霉素最佳浓度筛选 | 第50页 |
| ·葱叶枯匍柄霉菌株的诱导产孢及孢子收集 | 第50页 |
| ·根癌农杆菌介导的葱叶枯匍柄霉遗传转化 | 第50-51页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化条件对转化效率的影响测定 | 第51-52页 |
| ·葱叶枯匍柄霉（S. botryosum）原生质体的制备与再生 | 第52-53页 |
| ·葱叶枯匍柄霉原生质体的制备收集以及影响因素的测定 | 第52-53页 |
| ·葱叶枯匍柄霉原生质体的再生及影响因素的分析 | 第53页 |
| ·PEG 介导的原生质体转化 | 第53-54页 |
| ·转化子的筛选与鉴定 | 第54-56页 |
| ·转化子的稳定性测定 | 第54页 |
| ·转化子的 PCR 初步鉴定 | 第54-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-75页 |
| ·野生型葱叶枯匍柄霉 MAT1-1、MAT1-2 基因拷贝数的检测 | 第56页 |
| ·葱叶枯匍柄霉 MAT1-1、MAT1-2 基因敲除载体的构建 | 第56-60页 |
| ·MAT1-1 基因左右翼序列的 PCR 扩增鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组克隆质粒 pEASY-T3-1R、pEASY-T3-1L、pEASY-T3-2R 及 pEASY-T3-2L的构建及验证 | 第57页 |
| ·重组载体 pBIG3C28a-1R 与 pBIG3C28a-1R-1L 的构建 | 第57-59页 |
| ·重组载体 pBIG3C28a-2R 与 pBIG3C28a-2R-2L 的构建 | 第59-60页 |
| ·根癌农杆菌介导的葱叶枯匍柄霉遗传转化系统的建立 | 第60-66页 |
| ·抑制葱叶枯匍柄霉野生型生长的潮霉素最佳浓度筛选 | 第60-61页 |
| ·不同转化条件对转化效率的影响 | 第61-65页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化结果 | 第65-66页 |
| ·PEG 介导的原生质体转化系统的建立 | 第66-73页 |
| ·不同条件对原生质体制备的影响 | 第66-70页 |
| ·不同条件对原生质体再生的影响 | 第70-71页 |
| ·PEG 介导的原生质体转化 | 第71-73页 |
| ·转化子的初步鉴定与筛选 | 第73-75页 |
| ·转化子的稳定性测定 | 第73页 |
| ·转化子的 PCR 初步鉴定 | 第73-75页 |
| 4 结论与讨论 | 第75-78页 |
| ·MAT1-1 和 MAT1-2 基因在葱叶枯匍柄霉野生型菌株内基因拷贝数检测 | 第75页 |
| ·MAT1-1 和 MAT1-2 基因敲除载体的构建 | 第75页 |
| ·根癌农杆菌介导的葱叶枯匍柄霉遗传转化系统的建立 | 第75-76页 |
| ·PEG 介导的葱叶枯匍柄霉原生质体转化系统的建立 | 第76-77页 |
| ·展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-98页 |
| 附录 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 | 第100页 |
