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哈茨木霉Th-33 Thga1基因的克隆及功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-20页
   ·木霉菌生防机制的研究进展第14-16页
     ·竞争作用第14页
     ·抗生作用第14-15页
     ·重寄生作用第15页
     ·协同拮抗作用第15页
     ·诱导抗性第15-16页
   ·木霉菌在生物防治上的应用前景第16页
   ·异三聚体 G 蛋白概述第16-17页
     ·异三聚体 G 蛋白基本结构和种类第16-17页
     ·异三聚体 G 蛋白的活化机制第17页
   ·丝状真菌 Gα亚基基因的研究进展第17-19页
     ·丝状真菌 Gα亚基基因的种类第17-18页
     ·丝状真菌 Gα亚基基因的功能第18-19页
   ·本研究的目的意义及技术路线第19-20页
     ·本研究的目的意义第19页
     ·本研究的技术路线第19-20页
第二章 哈茨木霉 Th-33 Thga1 基因的克隆和分析第20-31页
   ·材料与方法第20-23页
     ·供试菌株和质粒第20页
     ·主要试剂第20页
     ·引物第20-21页
     ·哈茨木霉 Th-33 木霉基因组 DNA 的提取第21页
     ·Thga1 基因同源片段的克隆第21页
     ·Thga1 基因全长序列的克隆第21页
     ·Thga1 基因 cDNA 序列的克隆第21-22页
     ·Southern 杂交验证 Thga1 基因的拷贝数第22页
     ·Thga1 基因及编码氨基酸序列的生物信息学分析第22-23页
   ·结果与分析第23-29页
     ·G 蛋白α亚基基因同源片段的获得第23页
     ·Thga1 基因全长和 cDNA 序列的获得第23-25页
     ·Thga1 基因的拷贝数分析第25-26页
     ·Thga1 基因及编码氨基酸序列的生物信息学分析第26-29页
   ·讨论第29-31页
第三章 哈茨木霉 Thga1 基因的敲除第31-40页
   ·材料第31-32页
     ·供试菌株和质粒第31页
     ·主要试剂第31页
     ·引物第31-32页
   ·方法第32-35页
     ·双元打靶载体 pDHt/sk-Gα-Hyg 的构建策略第32页
     ·双元打靶载体 pDHt/sk-Gα-Hyg 的构建第32-34页
     ·根癌农杆菌介导打靶载体转化哈茨木霉 Th-33第34页
     ·Thga1 基因敲除突变株的验证第34-35页
   ·结果与分析第35-39页
     ·双元打靶载体 pDHt/sk-Gα-Hyg 的构建第35-37页
     ·同源重组转化子的获得第37页
     ·Thgal 基因敲除突变株的筛选和验证第37-39页
   ·讨论第39-40页
第四章 Thga1 基因敲除突变株基础生物学性状分析第40-49页
   ·材料第40页
     ·供试菌株和质粒第40页
     ·培养基第40页
   ·方法第40-41页
     ·Thga1 敲除突变株菌落形态分析第40页
     ·Thga1 敲除突变株生长特性分析第40页
     ·Thga1 敲除突变株产孢特性和孢子萌发形态的观察第40页
     ·Thga1 敲除突变株菌丝、分生孢子梗的形态观察第40-41页
     ·Thga1 敲除突变株疏水性检测第41页
     ·Thga1 敲除突变株胞内 cAMP 含量的检测第41页
   ·结果与分析第41-47页
     ·Thga1 敲除突变株菌落形态分析第41-42页
     ·Thga1 敲除突变株生长特性分析第42-43页
     ·Thga1 敲除突变株产孢特性及孢子萌发形态的分析第43-45页
     ·Thga1 敲除突变株菌丝、分生孢子梗的形态观测第45页
     ·Thga1 敲除突变株疏水性检测第45页
     ·Thga1 敲除突变株胞内 cAMP 含量分析第45-47页
   ·讨论第47-49页
第五章 Thga1 基因敲除突变株拮抗性能分析第49-56页
   ·材料第49页
     ·供试菌株和质粒第49页
     ·培养基第49页
   ·方法第49-50页
     ·突变株对几种植物病原菌的拮抗特性分析第49页
     ·突变株产生的挥发性代谢物对几种植物病原菌生长的影响第49页
     ·突变株产生的非挥发性代谢物对几种植物病原菌生长的影响第49-50页
     ·突变株对立枯丝核菌拮抗作用机制的显微观察第50页
   ·结果与分析第50-54页
     ·突变株对几种植物病原菌的拮抗特性分析第50-51页
     ·突变株挥发性代谢物对几种植物病原菌生长的影响第51-52页
     ·突变株非挥发性代谢物对几种植物病原菌生长的影响第52-53页
     ·突变株对立枯丝核菌拮抗作用机制的显微观察第53-54页
   ·讨论第54-56页
第六章 全文总结第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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