| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-27页 |
| ·小菜蛾对阿维菌素的抗药性研究 | 第16-17页 |
| ·小菜蛾对阿维菌素的抗性发展 | 第16页 |
| ·阿维菌素的作用机理 | 第16-17页 |
| ·IGluR 的研究进展 | 第17-19页 |
| ·IGluR 的分子特性 | 第17-18页 |
| ·IGluR 的生理功能 | 第18-19页 |
| ·qRT-PCR 技术 | 第19页 |
| ·qRT-PCR 技术的原理 | 第19页 |
| ·qRT-PCR 技术的应用 | 第19页 |
| ·RNA 干扰 | 第19-24页 |
| ·昆虫 RNAi 的作用机制 | 第19-20页 |
| ·昆虫的系统性 RNAi | 第20-21页 |
| ·昆虫 RNAi 的敏感度 | 第21-22页 |
| ·RNA 干扰的应用 | 第22-24页 |
| ·卵母细胞基因表达系统 | 第24-25页 |
| ·双电极电压钳技术 | 第24页 |
| ·卵母细胞基因表达系统的应用 | 第24-25页 |
| ·研究内容和目的 | 第25-27页 |
| ·研究内容和方法 | 第25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| ·研究的目的意义 | 第26-27页 |
| 第二章 小菜蛾的室内饲养及抗性汰选 | 第27-30页 |
| ·试验材料 | 第27页 |
| ·供试昆虫 | 第27页 |
| ·试验试剂 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-28页 |
| ·小菜蛾的饲养 | 第27页 |
| ·小菜蛾对阿维菌素的生物测定 | 第27页 |
| ·阿维菌素抗性小菜蛾的汰选 | 第27页 |
| ·阿维菌素敏感小菜蛾的反汰选 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28页 |
| ·阿维菌素抗性小菜蛾的选育 | 第28页 |
| ·小结与讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 小菜蛾 IGluR 的 RNA 干扰 | 第30-36页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·供试小菜蛾 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第30页 |
| ·培养基及常用溶液 | 第30页 |
| ·引物和测序 | 第30页 |
| ·试验方法 | 第30-31页 |
| ·RNA 的提取 | 第30页 |
| ·cDNA 的合成 | 第30页 |
| ·小菜蛾 dsRNA 的体外合成 | 第30-31页 |
| ·小菜蛾 dsRNA 的微量注射 | 第31页 |
| ·实时荧光定量 PCR（RT-qPCR） | 第31页 |
| ·小菜蛾 RNA 干扰后敏感性测定 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-34页 |
| ·小菜蛾 RNA 的提取 | 第31-32页 |
| ·DEPC 注射量的确定 | 第32页 |
| ·GluClα和 PxL32 基因标准曲线的制作 | 第32-33页 |
| ·小菜蛾幼虫 IGluR 基因的 RNA 干扰 | 第33页 |
| ·小菜蛾 IGluR 沉默后对阿维菌素的敏感性 | 第33-34页 |
| ·小结与讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 小菜蛾 GluClα基因的相对表达量和序列分析 | 第36-43页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·供试昆虫 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第36页 |
| ·培养基及常用溶液 | 第36页 |
| ·引物和测序 | 第36页 |
| ·试验方法 | 第36-39页 |
| ·小菜蛾 RNA 提取 | 第36页 |
| ·cDNA 的合成 | 第36页 |
| ·实时荧光定量 PCR（RT-qPCR） | 第36页 |
| ·GluClα全长克隆 | 第36-37页 |
| ·PCR 的产物回收 | 第37页 |
| ·纯化产物与 pEASY-T1 载体的连接和转化 | 第37-38页 |
| ·阳性克隆检测 | 第38-39页 |
| ·序列测定及分析 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-42页 |
| ·小菜蛾 GluCl α的 PCR 扩增 | 第39页 |
| ·GluCl α阳性克隆的检测 | 第39-40页 |
| ·敏感和抗性小菜蛾 GluClα基因相对表达量分析 | 第40-41页 |
| ·小菜蛾 GluClα基因的序列分析 | 第41-42页 |
| ·小结与讨论 | 第42-43页 |
| 第五章 小菜蛾 IGluR 靶标抗性的电生理研究 | 第43-52页 |
| ·试验材料 | 第43页 |
| ·供试昆虫 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第43页 |
| ·培养基及常用溶液 | 第43页 |
| ·引物和测序 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-45页 |
| ·PCR 引物的设计与合成 | 第43页 |
| ·GluClα与 pEASY-T1 载体的连接 | 第43页 |
| ·阳性克隆检测 | 第43-44页 |
| ·质粒的提取 | 第44页 |
| ·表达载体的构建 | 第44页 |
| ·Trans110 感受态细胞的转化 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的提取及线性化 | 第45页 |
| ·线性化重组质粒的纯化 | 第45页 |
| ·GluClα基因 cRNA 的体外合成 | 第45页 |
| ·cRNA 的显微注射 | 第45页 |
| ·双电极电压钳记录 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-50页 |
| ·重组质粒的提取 | 第45-46页 |
| ·重组质粒的双酶切检测 | 第46页 |
| ·重组质粒线性化 | 第46-47页 |
| ·GluClα基因的 cRNA | 第47页 |
| ·glutamate 双电极电压钳记录 | 第47-48页 |
| ·glutamate 的剂量曲线 | 第48-49页 |
| ·abamectin 双电极电压钳记录 | 第49页 |
| ·abamectin 的剂量曲线 | 第49-50页 |
| ·小结与讨论 | 第50-52页 |
| 第六章 全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简历 | 第67页 |