| 缩略词(Abbreviation) | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-17页 |
| ·日本乙型脑炎病毒的流行病学 | 第11-12页 |
| ·JEV的分子生物学研究进展 | 第12-13页 |
| ·病毒N-糖基化的研究进展 | 第13-17页 |
| ·蛋白糖基化是一种重要的生物学现象 | 第13-14页 |
| ·病毒蛋白的糖基化修饰具有重要的功能 | 第14页 |
| ·黄病毒中蛋白N-糖基化的功能 | 第14-17页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 第3章 材料与方法 | 第18-30页 |
| ·实验材料 | 第18-21页 |
| ·毒株与细胞 | 第18页 |
| ·菌种与质粒 | 第18页 |
| ·主要药品及试剂 | 第18-20页 |
| ·主要培养基 | 第20页 |
| ·本研究中所用的寡核苷酸引物 | 第20页 |
| ·缓冲液 | 第20-21页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)缓冲液 | 第20-21页 |
| ·Western Blot缓冲液 | 第21页 |
| ·ELISA缓冲液 | 第21页 |
| ·其它缓冲液 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-30页 |
| ·JEV病毒的增殖 | 第21页 |
| ·JEV基因组RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·RT-PCR扩增JEV prME基因 | 第22页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第22页 |
| ·PCR产物的连接与转化 | 第22-23页 |
| ·重组质粒的小提和酶切鉴定 | 第23页 |
| ·PCR介导的定点突变和测序 | 第23-24页 |
| ·将基因及其突变基因连接到真核表达载体 | 第24-25页 |
| ·质粒的大量制备 | 第25-26页 |
| ·质粒转染 | 第26页 |
| ·Western Blot | 第26-27页 |
| ·Endo H和PNGase F酶切试验 | 第27-28页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第28页 |
| ·电镜试验 | 第28页 |
| ·ELISA试验 | 第28页 |
| ·荧光共聚焦试验 | 第28-29页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第29-30页 |
| 第4章 结果与分析 | 第30-42页 |
| ·JEV P3株prME基因的克隆与序列分析 | 第30-31页 |
| ·JEV P3株prME基因cDNA的扩增与克隆 | 第30-31页 |
| ·prME基因核苷酸序列的测定与分析 | 第31页 |
| ·PCR介导的点突变和真核表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·构建质粒的转染和表达蛋白的定位 | 第32-34页 |
| ·JEV prM和E蛋白糖链类型分析 | 第34-36页 |
| ·prM和E蛋白N-糖基化对E蛋白折叠的影响 | 第36-37页 |
| ·prM和E蛋白N-糖基化对病毒样颗粒形成的影响 | 第37-39页 |
| ·prM和E蛋白N-糖基化对E蛋白分泌的作用 | 第39页 |
| ·prM和E蛋白N-糖基化对细胞毒性的影响 | 第39-42页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第42-45页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·日本乙型脑炎病毒prM和E蛋白在HEK-293FT细胞中的高效表达 | 第42页 |
| ·N-糖基化对日本乙型脑炎病毒E蛋白折叠的影响 | 第42-43页 |
| ·分析N-糖基化影响日本乙型脑炎病毒E蛋白分泌的机制 | 第43页 |
| ·日本乙型脑炎病毒VLP的形成及其对细胞的毒性 | 第43-44页 |
| ·结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
