中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第10-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-17页 |
1. 病程相关基因非表达子(NPR1) | 第12页 |
·NPR1 基因的结构 | 第12页 |
·NPR1 基因的作用机制 | 第12页 |
2. 内含子的定义、类型及其特点 | 第12-13页 |
·内含子的定义、类型 | 第12页 |
·内含子自身的特点 | 第12-13页 |
3. 内含子在生物基因组中剪切和保留的机理 | 第13页 |
·内含子在生物基因组中剪切的机理 | 第13页 |
·内含子在生物基因组保留中的机理 | 第13页 |
4. RNA 干扰的定义及其作用机理 | 第13-14页 |
·RNA 干扰的定义 | 第13-14页 |
·RNA 干扰的作用机理 | 第14页 |
5. 构建 RNA 干扰植物表达载体 | 第14页 |
6. RNA 干扰技术的应用及进展 | 第14-15页 |
7. NPR1 基因与病程相关蛋白(PR)基因 | 第15页 |
8. 系统抗病性与 NPR1 基因 | 第15-17页 |
·NPR1 基因在水杨酸介导的系统诱导性抗病(SAR)途径中的作用 | 第15-16页 |
·NPR1 基因在茉莉酸介导的系统获得性抗病(ISR)途径中的作用 | 第16-17页 |
第二章 新疆小拟南芥 NPR1 基因的克隆 | 第17-20页 |
·试验材料 | 第17页 |
·植物材料 | 第17页 |
·所用试剂盒、酶及常用生化试剂 | 第17页 |
·引物 | 第17页 |
·试验方法 | 第17-18页 |
·植物总 RNA 的提取 | 第17页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第17-18页 |
·NPR1 基因的克隆 | 第18页 |
·结果与分析 | 第18-19页 |
·NPR1 基因的克隆 | 第18-19页 |
·结论 | 第19-20页 |
第三章 植物表达载体的构建和根癌农杆菌的转化 | 第20-28页 |
·试验材料 | 第20页 |
·菌株 | 第20页 |
·植物材料 | 第20页 |
·所用试剂盒、酶及常用生化试剂 | 第20页 |
·引物 | 第20页 |
·试验方法 | 第20-23页 |
·植株表达载体 pBI121::Ap.NPR1 的构建 | 第20-21页 |
·植物表达载体 pCambia2300::pUCCRNAiN_2N_3的构建 | 第21-22页 |
·转化根癌农杆菌 GV3101 | 第22-23页 |
·结果与分析 | 第23-27页 |
·植物表达载体 pBI121::Ap.NPR1 的构建及鉴定 | 第23-24页 |
·植物表达载体 pCambia2300::pUCCRNAiN_2N_3的构建 | 第24-26页 |
·根癌农杆菌阳性转化子的 PCR 鉴定 | 第26-27页 |
·结论 | 第27-28页 |
第四章 农杆菌介导法转化野生型小拟南芥和拟南芥 | 第28-32页 |
·试验材料 | 第28页 |
·试验方法 | 第28-30页 |
·培养基的种类 | 第28页 |
·引物序列 | 第28页 |
·根癌农杆菌侵染液的制备 | 第28页 |
·转化拟南芥及小拟南芥 | 第28-29页 |
·Kan 筛选转基因阳性植株 | 第29页 |
·转基因阳性植株的检测 | 第29-30页 |
·结果与分析 | 第30-31页 |
·转基因拟南芥的 Kan 筛选与 PCR 检测 | 第30-31页 |
·转基因小拟南芥的 Kan 筛选与 PCR 检测 | 第31页 |
·结论 | 第31-32页 |
第五章 SA、MeJA 诱导转基因拟南芥与小拟南芥抗病信号途径中相关基因的表达分析 | 第32-39页 |
·试验材料 | 第32页 |
·试剂与仪器 | 第32页 |
·试剂 | 第32页 |
·仪器 | 第32页 |
·引物 | 第32-33页 |
·拟南芥的内参( actin-8 )引物 | 第32页 |
·目的基因引物 | 第32-33页 |
·试验方法 | 第33-34页 |
·试验材料处理 | 第33页 |
·不用时间植株总 RNA 提取 | 第33页 |
·总 RNA 纯度和浓度检测 | 第33页 |
·cDNA 第 1 链的合成 | 第33页 |
·荧光定量 PCR 检测 | 第33-34页 |
·结果与分析 | 第34-38页 |
·系统获得性抗病途径(SAR)相关基因的相对表达量 | 第34-36页 |
·系统诱导性抗病途径(ISR)相关基因的相对表达量 | 第36-38页 |
·结论 | 第38-39页 |
第六章 抗病相关酶POD、CAT、SOD酶活的测定 | 第39-44页 |
·试验材料 | 第39页 |
·药品和仪器 | 第39页 |
·试剂 | 第39页 |
·仪器 | 第39页 |
·试验方法 | 第39-40页 |
·酶活测定方法 | 第39页 |
·酶活测定方法 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-43页 |
·测定植株 SA 处理后体内 POD、CAT、SOD 酶活性 | 第40-43页 |
·结论 | 第43-44页 |
第七章 结论与讨论 | 第44-47页 |
·结论 | 第44页 |
·讨论 | 第44-47页 |
·NPR1 基因的作用机理 | 第44-45页 |
·根癌农杆菌介导植物的转化 | 第45页 |
·对内含子的研究 | 第45-46页 |
·存在的问题和不足 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
附录一 | 第53-56页 |
附录二 | 第56-57页 |
附录三 | 第57-59页 |
附录四 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60-61页 |
导师评阅表 | 第61页 |