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新疆小拟南芥NPR1基因的表达对植物系统抗病信号途径影响的初步探究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-7页
目录第7-10页
英文缩略语第10-11页
前言第11-12页
第一章 文献综述第12-17页
 1. 病程相关基因非表达子(NPR1)第12页
   ·NPR1 基因的结构第12页
   ·NPR1 基因的作用机制第12页
 2. 内含子的定义、类型及其特点第12-13页
   ·内含子的定义、类型第12页
   ·内含子自身的特点第12-13页
 3. 内含子在生物基因组中剪切和保留的机理第13页
   ·内含子在生物基因组中剪切的机理第13页
   ·内含子在生物基因组保留中的机理第13页
 4. RNA 干扰的定义及其作用机理第13-14页
   ·RNA 干扰的定义第13-14页
   ·RNA 干扰的作用机理第14页
 5. 构建 RNA 干扰植物表达载体第14页
 6. RNA 干扰技术的应用及进展第14-15页
 7. NPR1 基因与病程相关蛋白(PR)基因第15页
 8. 系统抗病性与 NPR1 基因第15-17页
   ·NPR1 基因在水杨酸介导的系统诱导性抗病(SAR)途径中的作用第15-16页
   ·NPR1 基因在茉莉酸介导的系统获得性抗病(ISR)途径中的作用第16-17页
第二章 新疆小拟南芥 NPR1 基因的克隆第17-20页
   ·试验材料第17页
     ·植物材料第17页
     ·所用试剂盒、酶及常用生化试剂第17页
     ·引物第17页
   ·试验方法第17-18页
     ·植物总 RNA 的提取第17页
     ·cDNA 第一链的合成第17-18页
     ·NPR1 基因的克隆第18页
   ·结果与分析第18-19页
     ·NPR1 基因的克隆第18-19页
   ·结论第19-20页
第三章 植物表达载体的构建和根癌农杆菌的转化第20-28页
   ·试验材料第20页
     ·菌株第20页
     ·植物材料第20页
     ·所用试剂盒、酶及常用生化试剂第20页
     ·引物第20页
   ·试验方法第20-23页
     ·植株表达载体 pBI121::Ap.NPR1 的构建第20-21页
     ·植物表达载体 pCambia2300::pUCCRNAiN_2N_3的构建第21-22页
     ·转化根癌农杆菌 GV3101第22-23页
   ·结果与分析第23-27页
     ·植物表达载体 pBI121::Ap.NPR1 的构建及鉴定第23-24页
     ·植物表达载体 pCambia2300::pUCCRNAiN_2N_3的构建第24-26页
     ·根癌农杆菌阳性转化子的 PCR 鉴定第26-27页
   ·结论第27-28页
第四章 农杆菌介导法转化野生型小拟南芥和拟南芥第28-32页
   ·试验材料第28页
   ·试验方法第28-30页
     ·培养基的种类第28页
     ·引物序列第28页
     ·根癌农杆菌侵染液的制备第28页
     ·转化拟南芥及小拟南芥第28-29页
     ·Kan 筛选转基因阳性植株第29页
     ·转基因阳性植株的检测第29-30页
   ·结果与分析第30-31页
     ·转基因拟南芥的 Kan 筛选与 PCR 检测第30-31页
     ·转基因小拟南芥的 Kan 筛选与 PCR 检测第31页
   ·结论第31-32页
第五章 SA、MeJA 诱导转基因拟南芥与小拟南芥抗病信号途径中相关基因的表达分析第32-39页
   ·试验材料第32页
   ·试剂与仪器第32页
     ·试剂第32页
     ·仪器第32页
   ·引物第32-33页
     ·拟南芥的内参( actin-8 )引物第32页
     ·目的基因引物第32-33页
   ·试验方法第33-34页
     ·试验材料处理第33页
     ·不用时间植株总 RNA 提取第33页
     ·总 RNA 纯度和浓度检测第33页
     ·cDNA 第 1 链的合成第33页
     ·荧光定量 PCR 检测第33-34页
   ·结果与分析第34-38页
     ·系统获得性抗病途径(SAR)相关基因的相对表达量第34-36页
     ·系统诱导性抗病途径(ISR)相关基因的相对表达量第36-38页
   ·结论第38-39页
第六章 抗病相关酶POD、CAT、SOD酶活的测定第39-44页
   ·试验材料第39页
   ·药品和仪器第39页
     ·试剂第39页
     ·仪器第39页
   ·试验方法第39-40页
     ·酶活测定方法第39页
     ·酶活测定方法第39-40页
   ·结果与分析第40-43页
     ·测定植株 SA 处理后体内 POD、CAT、SOD 酶活性第40-43页
   ·结论第43-44页
第七章 结论与讨论第44-47页
   ·结论第44页
   ·讨论第44-47页
     ·NPR1 基因的作用机理第44-45页
     ·根癌农杆菌介导植物的转化第45页
     ·对内含子的研究第45-46页
     ·存在的问题和不足第46-47页
参考文献第47-52页
致谢第52-53页
附录一第53-56页
附录二第56-57页
附录三第57-59页
附录四第59-60页
作者简介第60-61页
导师评阅表第61页

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