摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
研究背景 | 第13-16页 |
第一章 PHⅡ-7对乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR体外杀伤和逆转耐药作用 | 第16-40页 |
一、实验材料 | 第16-20页 |
1. 细胞系 | 第16-18页 |
2. 主要试剂 | 第18-19页 |
3. 仪器 | 第19-20页 |
二、实验方法 | 第20-24页 |
1. 体外杀伤实验(MTT assay) | 第20-21页 |
2. 凋亡测定 | 第21页 |
3. Reverse Transcription PCR和Real Time PCR | 第21-23页 |
4. 细胞内Rhodamine123蓄积实验 | 第23-24页 |
5. 流式细胞仪测定P-gp表达 | 第24页 |
6. 统计学分析 | 第24页 |
三、实验结果 | 第24-33页 |
1. MCF-7/ADR是高表达P-gp的多药耐药细胞株 | 第24-27页 |
2. PHⅡ-7对乳腺癌体外抗肿瘤活性 | 第27-29页 |
3. PHⅡ-7对MCF-7/ADR的耐药逆转作用 | 第29页 |
4. PHⅡ-7对MCF-7/ADR细胞mdrl/P-gp表达和功能的抑制作用 | 第29-33页 |
四、讨论 | 第33-40页 |
第二章 PHⅡ-7通过抑制转录因子AP-1逆转P-gp介导的多药耐药 | 第40-71页 |
一、实验材料 | 第40-41页 |
1. 细胞系 | 第40-41页 |
2. 主要试剂 | 第41页 |
3. 仪器 | 第41页 |
二、实验方法 | 第41-52页 |
1. RNA提取,cDNA合成和RT-PCR | 第41-42页 |
2. 免疫印迹(western blot) | 第42-44页 |
3. 构建pSilencer 3.1/sic-fos干扰载体 | 第44-48页 |
4. 细胞转染 | 第48-51页 |
5. 阳性单克隆细胞株的功能鉴定 | 第51-52页 |
6. 统计学分析 | 第52页 |
三、实验结果 | 第52-65页 |
1. c-fos在MCF-7/ADR细胞的表达 | 第52-53页 |
2. PHⅡ-7对转录因子c-fos的影响 | 第53-54页 |
3. 转录因子c-fos对P-gp介导的多药耐药的影响 | 第54-65页 |
四、讨论 | 第65-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-82页 |
综述 | 第82-108页 |
REFERENCES | 第98-108页 |
英文缩略词表 | 第108-110页 |
溶液配制 | 第110-114页 |
个人简介 | 第114-115页 |
发表文章和参加会议 | 第115-116页 |
致谢 | 第116-117页 |