致谢 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 研究背景 | 第12-24页 |
第一节 酚氧化酶系统 | 第12-17页 |
一、 无脊椎动物固有免疫系统简介 | 第12-14页 |
二、 酚氧化酶固系统的组成及其作用机制 | 第14-17页 |
第二节 模式识别丝氨酸蛋白酶与丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第17-20页 |
一、 模式识别丝氨酸蛋白酶 | 第17-18页 |
二、 丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第18-20页 |
第三节 节肢动物酚氧化酶系统的研究进展 | 第20-22页 |
第四节 本研究的主要目的及意义 | 第22-24页 |
第二章 材料和方法 | 第24-42页 |
第一节 实验材料 | 第24-29页 |
一、 实验动物和菌株 | 第24页 |
二、 主要培养液和缓冲液 | 第24-25页 |
三、 主要试剂耗材 | 第25-27页 |
四、 主要仪器设备 | 第27-29页 |
第二节 实验方法 | 第29-42页 |
一、 中华绒螯蟹cDNA模板的制备 | 第29-30页 |
二、 荧光实时定量 PCR(qRT‐PCR) | 第30-31页 |
三、 PCR扩增基因片段 | 第31-33页 |
四、 蛋白的原核重组表达、纯化及复性 | 第33-38页 |
五、 进化分析 | 第38页 |
六、 丝氨酸蛋白酶抑制活性的分析 | 第38页 |
七、 抑菌活性的分析 | 第38-39页 |
八、 凝菌活性的分析 | 第39页 |
九、 酚氧化酶活性的分析 | 第39-42页 |
第三章 实验结果 | 第42-56页 |
第一节 中华绒螯蟹模式识别丝氨酸蛋白酶EsPRSP的表达和功能分析 | 第42-47页 |
一、 EsPRSP基因mRNA的组织表达特征 | 第42-43页 |
二、 菌刺激后EsPRSP基因的mRNA时序表达规律 | 第43-44页 |
三、 EsPRSP基因重组蛋白的表达 | 第44-45页 |
四、 EsPRSP的抑菌活性 | 第45-46页 |
五、 EsPRSP的凝菌活性 | 第46页 |
六、 EsPRSP对酚氧化酶活性的影响 | 第46-47页 |
第二节 中华绒螯蟹模式识别丝氨酸蛋白酶Esserpin的表达和功能分析 | 第47-56页 |
一、 Esserpin基因mRNA的组织表达特征 | 第47-48页 |
二、 菌刺激后Esserpin基因的mRNA时序表达规律 | 第48-50页 |
三、 Esserpin基因的进化树分析 | 第50-51页 |
四、 Esserpin基因重组蛋白的表达 | 第51-52页 |
五、 Esserpin的丝氨酸蛋白酶抑制活性 | 第52页 |
六、 Esserpin的抑菌活性 | 第52-54页 |
七、 Esserpin对酚氧化酶活性的影响 | 第54-56页 |
第四章 讨论 | 第56-61页 |
第一节 中华绒螯蟹模式识别丝氨酸蛋白酶EsPRSP的表达和功能 | 第56-58页 |
第二节 中华绒螯蟹模式识别丝氨酸蛋白酶Esserpin的表达和功能 | 第58-61页 |
第五章 结论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-72页 |
作者简历及硕士在读期间完成和发表的论文 | 第72页 |