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深海新型M23家族蛋白酶pseudoalterin降解肽聚糖和弹性蛋白的分子机制、生态学功能及应用潜力评价

目录第1-8页
摘要第8-14页
Abstract第14-21页
缩略词表第21-23页
第一章 研究背景与立题依据第23-49页
   ·研究背景第23-44页
     ·金属蛋白酶及分类第23-25页
     ·M23家族蛋白酶第25-30页
     ·弹性蛋白与弹性蛋白酶第30-38页
     ·细菌肽聚糖与溶菌酶第38-43页
     ·深海生态环境及氮循环机制第43-44页
   ·立题依据与研究内容第44-49页
     ·立题依据第44-45页
     ·研究内容第45-49页
第二章 南海沉积物细菌Pseudoalteromonas sp. CF6-2所产弹性蛋白酶pseudoalterin的分离纯化、生化性质和基因克隆第49-73页
   ·引言第49页
   ·材料和方法第49-59页
     ·菌株与质粒第49页
     ·主要生化试剂、分子试剂和试剂盒第49-50页
     ·主要仪器设备第50-51页
     ·数据库及分析软件第51页
     ·培养基配制第51-52页
     ·菌株的培养与保藏第52页
     ·蛋白酶pseudoalterin的分离纯化第52-53页
     ·蛋白酶pseudoalterin的酶学性质测定第53-55页
     ·Pseudoalterin的基因克隆第55-59页
   ·结果与分析第59-69页
     ·蛋白酶pseudoalterin的分离纯化第59-60页
     ·Pseudoalterin的酶学性质测定第60-64页
     ·蛋白酶pseudoalterin的基因克隆与序列分析第64-69页
   ·讨论第69-73页
第三章 蛋白酶pseudoalterin对弹性蛋白降解机制的研究第73-89页
   ·引言第73页
   ·材料和方法第73-76页
     ·菌株与质粒第73页
     ·主要生化试剂第73-74页
     ·主要仪器设备第74页
     ·数据库及分析软件第74页
     ·Pseudoalterin对牛弹性蛋白降解过程的宏观和倒置显微镜观察第74-75页
     ·Pseudoalterin在牛弹性蛋白序列上的酶切位点分析第75页
     ·交联的弹性蛋白原的制备、降解和观察第75-76页
     ·Pseudoalterin对牛弹性蛋白降解过程的SEM观察第76页
   ·结果与分析第76-87页
     ·Pseudoalterin对牛弹性蛋白降解过程的宏观和倒置显微镜观察第76-77页
     ·Pseudoalterin在牛弹性蛋白序列上的酶切位点分析第77-83页
     ·交联的弹性蛋白原降解过程的SEM观察第83-84页
     ·Pseudoalterin对牛弹性蛋白降解过程的SEM观察第84-87页
   ·讨论第87-89页
第四章 Pseudoalterin、myroilysin和pseudolysin三个不同家族的弹性蛋白酶对弹性蛋白降解机制的比较第89-115页
   ·引言第89页
   ·材料和方法第89-92页
     ·菌株与质粒第89页
     ·主要生化试剂第89-90页
     ·主要仪器与耗材第90页
     ·培养基配制第90页
     ·弹性蛋白酶myroilysin和pseudolysin的分离纯化第90-91页
     ·Pseudoalterin对insulin B_(ox)酶切位点的分析第91页
     ·三种蛋白酶对牛弹性蛋白酶解过程的原位观察第91-92页
     ·三种蛋白酶对弹性蛋白酶解过程的SEM观察第92页
     ·三种蛋白酶对牛弹性蛋白酶切位点的比较第92页
   ·结果与分析第92-112页
     ·蛋白酶myroilysin和pseudolysin的分离纯化第92-93页
     ·三种蛋白酶的结构分析比较第93-94页
     ·三种蛋白酶的底物特异性比较第94-96页
     ·Pseudoalterin对insulin B_(ox)的酶切位点分析以及与另外两种蛋白酶的比较第96-98页
     ·三种蛋白酶对牛弹性蛋白酶解过程的原位观察第98-100页
     ·Pseudolysin和myroilysin对弹性蛋白酶解过程的SEM观察以及三种蛋白酶降解弹性蛋白方式的比较第100-102页
     ·三种蛋白酶对牛弹性蛋白酶切位点的比较第102-110页
     ·三种蛋白酶对交联弹性蛋白原降解过程的比较第110-112页
   ·讨论第112-115页
第五章 Pseudoalterin在海洋中的生态作用及其对Staphylococcus aureus肽聚糖吸附和降解机制的研究第115-143页
   ·引言第115页
   ·材料和方法第115-123页
     ·菌株与质粒第115-116页
     ·主要试剂和试剂盒第116页
     ·主要仪器设备第116页
     ·细菌的培养第116-117页
     ·数据库及分析软件第117页
     ·Pseudoalterin裂菌活性的测定第117页
     ·S. aureus肽聚糖的提取第117-118页
     ·Pseudoalterin对S.aureus肽聚糖的降解机制的研究第118-119页
     ·蛋白酶pseudoalterin对多糖吸附机制的研究第119-123页
   ·结果与分析第123-139页
     ·Pseudoalterin对沉积物细菌的裂解活性第123-125页
     ·Pseudoalterin对S.aureus肽聚糖的降解机制的研究第125-129页
     ·蛋白酶pseudoalterin对多糖吸附作用的检测第129-131页
     ·Pseudoalterin对S.aureus肽聚糖的吸附机制的研究第131-139页
   ·讨论第139-143页
第六章 Pseudoalterin的应用潜力研究以及发酵条件的优化第143-159页
   ·引言第143页
   ·材料和方法第143-148页
     ·菌株第143-144页
     ·主要生化试剂第144页
     ·培养基配制第144页
     ·菌株的培养第144-145页
     ·数据库及分析软第145页
     ·Pseudoalterin裂菌活性的测定第145页
     ·Pseudoalterin对S.aureus的杀灭活性第145页
     ·Pseudoalterin对S.aureus生物膜的破坏作用第145-146页
     ·降低pseudoalterin发酵成本的研究第146页
     ·心管粉的制备第146页
     ·Pseudoalterin的发酵条件的优化第146-148页
   ·结果与分析第148-158页
     ·蛋白酶pseudoalterin对陆地细菌的裂菌活性的测定第148-150页
     ·Pseudoalterin对S.aureus的杀灭活性第150-151页
     ·Pseudoalterin对S.aureus生物膜的破坏作用第151-152页
     ·降低pseudoalterin发酵成本的研究第152-153页
     ·Pseudoalterin的发酵条件的优化第153-158页
   ·讨论第158-159页
全文总结与展望第159-163页
参考文献第163-177页
在读期间论文发表、专利申请以及获奖情况第177-179页
致谢第179-181页
附件1第181-192页
附件2第192页

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