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水稻抗细菌性条斑病和白叶枯病相关基因OsDRxoc8的克隆和功能鉴定

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 前言第10-24页
   ·水稻细菌性条斑病及其相关的抗性研究第10-15页
     ·水稻细菌性条斑病第10-12页
       ·水稻细条病的发现及发病特点第10-11页
       ·病原菌的分类与分化第11-12页
       ·细条病菌的适生性第12页
       ·细条病抗性评价方法第12页
     ·水稻细条病的抗性鉴定与抗源筛选第12-13页
     ·水稻细条病的抗性生理研究第13-14页
     ·水稻对细条病抗性的遗传和QTL定位研究第14-15页
       ·水稻抗细条病的经典遗传研究第14页
       ·水稻抗细条病QTL定位研究第14-15页
     ·水稻抗细条病QTL的标记辅助育种第15页
   ·基因家族和基因功能冗余第15-17页
     ·基因家族的有关概念第15-16页
     ·基因功能冗余的有关概念第16-17页
     ·基因家族与基因功能冗余的关系第17页
   ·水稻白叶枯病及其相关的抗性研究第17-20页
     ·水稻白叶枯病的发现及发病特点第17-18页
     ·水稻对白叶枯病的抗性第18-20页
   ·候选抗性基因第20-21页
     ·候选抗性基因预测第20页
     ·候选基因分析第20-21页
   ·植物小分子热激蛋白及其抗逆功能第21-23页
     ·sHSPs的分类与结构第21-22页
     ·sHSPs的生物学功能第22-23页
       ·sHSPs的抗逆性第22页
       ·sHSPs的其它功能第22-23页
   ·目的意义第23-24页
2 材料与方法第24-35页
   ·实验材料第24-25页
     ·水稻材料第24页
     ·菌株及载体第24-25页
   ·引物设计第25-27页
   ·载体构建及农杆菌介导的遗传转化第27-31页
     ·OsPRxoc8基因目的片段的扩增第27-28页
     ·目的片段与质粒DNA的酶切第28页
     ·载体去磷酸化第28-29页
     ·目的片段与质粒DNA的连接第29页
     ·感受态细胞的制备第29页
     ·热激转化大肠杆菌DH5α第29-30页
     ·电击转化农杆菌EHA105第30页
     ·转化菌落的PCR鉴定第30页
     ·质粒DNA的小量提取第30-31页
     ·重组质粒的酶切检测第31页
   ·OsBPxoc8基因超量表达载体的构建第31-32页
   ·OsDRxoc8基因RNAi表达载体构建第32页
   ·农杆菌介导的水稻遗传转化第32-33页
   ·GUS染色第33页
   ·转基因植株PCR检测第33-34页
   ·植物总RNA的提取第34页
   ·RT-PCR和定量RT-PCR分析第34-35页
   ·转基因抗性鉴定水稻苗的培育第35页
   ·细条病菌和白叶枯病菌菌液准备第35页
3 结果与分析第35-48页
   ·基因OsPRxoc8结构与功能预测第35页
   ·OsORxoc8基因超量表达片段第35-36页
   ·RNAi抑制表达片段的的扩增第36页
   ·植物超量表达载体的构建及鉴定第36页
   ·RNAi表达载体的构建及鉴定第36页
   ·超量重组载体和RNAi重组载体的农杆菌EHA105的转化及鉴定第36-37页
   ·水稻遗传转化再生体系的建立第37页
   ·转化后愈伤组织GUS基因表达检测第37-38页
   ·T_0代转基因植株PCR检测第38-39页
   ·TO代转基因植株中OsDRxoc8的表达量分析检测第39-40页
   ·T_1代转基因植株对细条病菌RS105的抗性鉴定第40-43页
   ·T1代转基因植株对白叶枯病菌PX099的抗性鉴定第43-45页
   ·OsDRxoc8基因影响水稻植株的发育第45-46页
   ·OsDRxoc8基因功能冗余第46-48页
4 讨论第48-50页
   ·OsDRxoc8在植物发育和抗病反应中的双重角色第48页
   ·OsDRxoc8基因参与水稻抗细条病和白叶枯病的路径存在差异第48页
   ·小分子热激蛋白可能参与了水稻与细条病菌的互作反应第48-49页
   ·OsDRxoc8基因属于水稻基因组中Class Ⅰ sHSPs的一个亚基因家族第49-50页
5 结论第50-51页
参考文献第51-60页
附录Ⅰ 常用缓冲液及培养基的配制第60-70页
附录Ⅱ 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器第70-72页
致谢第72页

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