| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| ·光温敏核不育基因的研究进展 | 第11-12页 |
| ·水稻光温敏核不育基因的定位研究进展 | 第12-16页 |
| ·水稻光敏核不育基因的定位研究 | 第12-13页 |
| ·水稻温敏核不育基因的定位研究 | 第13-16页 |
| ·mi RNA的研究概况 | 第16-19页 |
| ·mi RNA的作用机制 | 第17-19页 |
| ·RNA干扰与植物基因功能研究 | 第19-20页 |
| ·转基因技术及应用 | 第20-22页 |
| ·农杆菌介导法 | 第20-21页 |
| ·基因枪法 | 第21页 |
| ·其他水稻转基因方法 | 第21-22页 |
| ·本研究的内容和目的 | 第22-23页 |
| 第二章 材料和方法 | 第23-45页 |
| ·供试材料 | 第23-28页 |
| ·水稻材料 | 第23页 |
| ·菌种及质粒 | 第23-24页 |
| ·培养基及其配制 | 第24-26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器和设备 | 第27页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-45页 |
| ·HD9802S候选不育基因HDtms的amiRNA表达载体的构建 | 第28-38页 |
| ·含有amiRNA表达候选基因HDtms靶位点的选择及引物的合成 | 第28-32页 |
| ·构建含有amiRNA表达单元的供体载体pDONOR-HDtms | 第32-33页 |
| ·产物的回收和纯化 | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞(E.coli)的制备 | 第34页 |
| ·大肠杆菌的常规转化 | 第34-35页 |
| ·菌落PCR检测 | 第35页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第35-36页 |
| ·元载体p1301-HDtms的构建 | 第36页 |
| ·农杆菌(EHA105)感受态的制备 | 第36-37页 |
| ·电击法转化农杆菌(EHA105) | 第37-38页 |
| ·籼稻9311愈伤组织的转化 | 第38-39页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第38页 |
| ·愈伤组织的继代 | 第38页 |
| ·农杆菌转化水稻愈伤组织 | 第38-39页 |
| ·愈伤组织的洗涤与筛选 | 第39页 |
| ·分化与生根 | 第39页 |
| ·炼苗及移栽 | 第39页 |
| ·转基因植株的检测 | 第39-45页 |
| ·SDS法提取水稻基因组DNA | 第39-40页 |
| ·CTAB法提取水稻基因组DNA | 第40页 |
| ·PCR反应体系 | 第40-41页 |
| ·胶回收试剂盒回收DNA | 第41页 |
| ·制备杂交用的DNA探针 | 第41页 |
| ·探针灵敏度检测 | 第41-43页 |
| ·Southern blot | 第43-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-60页 |
| ·供体载体p DONOR-HDtms的构建 | 第45-48页 |
| ·元载体p 1301-HDtms的构建 | 第48-51页 |
| ·MAGIC的原理 | 第48-50页 |
| ·重组子的检测 | 第50-51页 |
| ·p1301-HDtms双元表达载体转化农杆菌并验证amiRNA表达单元及潮霉素基因 | 第51-53页 |
| ·农杆菌介导法转化籼稻9311 | 第53-54页 |
| ·转基因植株的检测 | 第54-60页 |
| ·转基因植株的基因组DNA | 第54-55页 |
| ·PCR检测 | 第55-56页 |
| ·转基因植株的花粉育性检测 | 第56页 |
| ·结实率统计 | 第56-57页 |
| ·Southern blot检测 | 第57-60页 |
| 第四章 讨论 | 第60-64页 |
| ·amiRNA双元表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·农杆菌介导法转化籼稻9311的愈伤组织 | 第61-62页 |
| ·转基因植株的检测 | 第62-63页 |
| ·转基因拷贝数与花粉育性下降可能的关联性 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
