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纤维素酶分泌表达及纤维素一步发酵初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
主要符号表第10-11页
第一章 引言第11-20页
 1. 纤维素酶简介第11-13页
   ·纤维素酶的分类与酶学性质第11页
   ·纤维素酶的功能及作用机制第11-12页
   ·纤维素酶的应用现状第12-13页
 2. 纤维素简介第13-17页
   ·纤维素的分布与来源第13页
   ·纤维素的特性与种类第13-14页
   ·纤维素的功能与应用现状第14-16页
     ·膳食纤维第14-15页
     ·多聚合纤维素在医学上的应用第15页
     ·纤维素在工业中的应用第15-16页
   ·玉米芯纤维素的简介及应用第16-17页
     ·玉米芯利用效率的提高第16-17页
     ·玉米芯利用方法的多样性第17页
 3. 本课题研究的目的及意义第17-20页
第二章 实验部分第20-50页
 1. 实验材料及方法第20-29页
   ·培养基第20页
   ·主要缓冲液第20-21页
   ·试剂和酶第21页
   ·仪器和设备第21-22页
   ·常用生物实验材料及其制备方法第22-25页
     ·大肠杆菌化学法感受态细胞的制备及转化第22页
     ·质粒DNA的抽提第22-23页
     ·酿酒酵母化学法感受态细胞的制备及转化第23-24页
     ·SDS-PAGE胶的制备第24页
     ·质粒与菌株第24-25页
   ·DNS法测酶活第25-26页
     ·标准曲线的绘制第25-26页
     ·酶活测定第26页
   ·发酵产物产量的测定第26-29页
     ·发酵产物中甘油浓度的测定第26-27页
     ·发酵产物中乙醇浓度的测定第27-29页
 2. 实验结果与讨论第29-48页
   ·分泌表达载体pHBM368-CBH的构建第29-31页
   ·分泌表达载体pHBM368-EG的构建第31-32页
   ·分泌表达载体pHBM368-BG的构建第32-33页
   ·分泌表达载体重组子的验证第33-34页
   ·重组菌株Y33-CBH、Y33-EG及Y33-BG的验证第34-35页
     ·重组菌株在CMC-MD平板上的活性验证第34页
     ·外源基因诱导表达的SDS-PAGE验证第34-35页
     ·外源纤维素酶酶活测定第35页
   ·重组菌株Y33-CBH以玉米芯粉为唯一碳源的摇瓶发酵第35-38页
     ·Y33-CBH在摇瓶发酵中生物量的测定第36-37页
     ·Y33-CBH在摇瓶发酵中甘油浓度的测定第37页
     ·Y33-CBH在摇瓶发酵中乙醇浓度的测定第37-38页
   ·重组菌株Y33-EG以玉米芯粉为唯一碳源的摇瓶发酵第38-41页
     ·Y33-EG摇瓶发酵中生物量的测定第38-39页
     ·Y33-EG摇瓶发酵中甘油浓度的测定第39-40页
     ·Y33-EG摇瓶发酵中乙醇浓度的测定第40-41页
   ·重组菌株Y33-BG以玉米芯粉为唯一碳源的摇瓶发酵第41-44页
     ·Y33-BG摇瓶发酵中生物量的测定第41-42页
     ·Y33-BG摇瓶发酵中甘油浓度的测定第42-43页
     ·Y33-BG摇瓶发酵中乙醇浓度的测定第43-44页
   ·重组菌株Y33-CBH、Y33-EG及Y33-BG的混合菌发酵第44-47页
     ·混合菌摇瓶发酵中生物量的测定第44-45页
     ·混合菌摇瓶发酵中甘油浓度的测定第45-46页
     ·混合菌摇瓶发酵中乙醇浓度的测定第46-47页
   ·重组混合菌株的3L摇瓶放大发酵第47-48页
 4. 结论与展望第48-50页
   ·纤维素酶一步发酵对发酵产物产量的影响第48页
   ·发酵培养基及培养条件的优化第48-49页
   ·以玉米芯为原料进行一步发酵的可行性分析及前景第49-50页
参考文献第50-54页
附录第54-59页
致谢第59页

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