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甲型H1N1猪流感病毒单克隆抗体的制备及夹心ELISA检测方法的建立

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
符号说明第9-11页
综述第11-23页
 1 猪源流感病毒概述第11-17页
   ·历史第11-12页
   ·猪流感病毒的病原学第12-15页
   ·猪流感病毒的复制第15-16页
   ·猪流感病毒的遗传进化第16页
   ·致病机理第16-17页
 2 猪流感的检测第17-19页
   ·病毒的分离第17页
   ·病毒抗原的检测第17-19页
   ·清抗体检测第19页
 3 猪流感疫苗研究进展第19-20页
   ·冷适应弱毒疫苗第19-20页
   ·全病毒灭活苗第20页
   ·亚单位疫苗第20页
   ·基因重组活载体疫苗第20页
   ·核酸疫苗第20页
 4. 单克隆抗体技术第20-21页
 5. 本研究的目的和意义第21-23页
第一章 猪流感H1N1单克隆抗体的制备第23-45页
 1. 实验材料第23-27页
   ·病毒与阳性血清第23页
   ·实验动物及细胞系第23页
   ·主要试剂第23-24页
   ·仪器设备第24页
   ·器械及器皿第24页
   ·相关溶液的配置第24-27页
   ·分子生物学软件第27页
 2. 方法第27-35页
   ·病毒的分离、鉴定与纯化第27-29页
   ·免疫原的制备与免疫第29-31页
   ·细胞融合第31页
   ·阳性克隆的筛选第31-33页
   ·杂交瘤细胞的克隆化第33页
   ·杂交瘤细胞的冻存和复苏第33-34页
   ·腹水的制备第34页
   ·单克隆抗体的鉴定第34-35页
 3. 实验结果第35-42页
   ·病毒的分离及鉴定第35-36页
   ·病毒的纯化第36-37页
   ·杂交瘤细胞株的建立第37-39页
   ·单克隆抗体特性的鉴定第39-41页
   ·Western-blot第41-42页
   ·杂交瘤细胞分泌抗体稳定性鉴定第42页
   ·抗体的亚类鉴定第42页
 4. 讨论第42-45页
第二章 双抗体夹心ELISA检测猪流感病毒方法的建立第45-54页
 1. 试验材料及试剂第45页
   ·细胞系、毒株第45页
   ·主要试剂第45页
   ·试验器材第45页
 2. 试验方法第45-48页
   ·单抗腹水的纯化及蛋白浓度的测定第45-46页
   ·抗体的辣根过氧化物酶标记第46页
   ·配对夹心抗体的筛选第46页
   ·最佳条件的确定第46-48页
   ·敏感性试验第48页
   ·特异性试验第48页
   ·夹心ELISA检测SIV的初步应用第48页
 3. 实验结果第48-52页
   ·单抗的纯化第48页
   ·单抗的HRP标记第48-49页
   ·夹心ELISA方法的建立第49-50页
   ·敏感性试验结果第50-51页
   ·特异性实验结果第51页
   ·夹心ELISA方法的初步应用第51-52页
 4. 讨论第52-54页
全文小结第54-55页
参考文献第55-61页
致谢第61-62页

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