摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
符号说明 | 第9-11页 |
综述 | 第11-23页 |
1 猪源流感病毒概述 | 第11-17页 |
·历史 | 第11-12页 |
·猪流感病毒的病原学 | 第12-15页 |
·猪流感病毒的复制 | 第15-16页 |
·猪流感病毒的遗传进化 | 第16页 |
·致病机理 | 第16-17页 |
2 猪流感的检测 | 第17-19页 |
·病毒的分离 | 第17页 |
·病毒抗原的检测 | 第17-19页 |
·清抗体检测 | 第19页 |
3 猪流感疫苗研究进展 | 第19-20页 |
·冷适应弱毒疫苗 | 第19-20页 |
·全病毒灭活苗 | 第20页 |
·亚单位疫苗 | 第20页 |
·基因重组活载体疫苗 | 第20页 |
·核酸疫苗 | 第20页 |
4. 单克隆抗体技术 | 第20-21页 |
5. 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
第一章 猪流感H1N1单克隆抗体的制备 | 第23-45页 |
1. 实验材料 | 第23-27页 |
·病毒与阳性血清 | 第23页 |
·实验动物及细胞系 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·仪器设备 | 第24页 |
·器械及器皿 | 第24页 |
·相关溶液的配置 | 第24-27页 |
·分子生物学软件 | 第27页 |
2. 方法 | 第27-35页 |
·病毒的分离、鉴定与纯化 | 第27-29页 |
·免疫原的制备与免疫 | 第29-31页 |
·细胞融合 | 第31页 |
·阳性克隆的筛选 | 第31-33页 |
·杂交瘤细胞的克隆化 | 第33页 |
·杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第33-34页 |
·腹水的制备 | 第34页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第34-35页 |
3. 实验结果 | 第35-42页 |
·病毒的分离及鉴定 | 第35-36页 |
·病毒的纯化 | 第36-37页 |
·杂交瘤细胞株的建立 | 第37-39页 |
·单克隆抗体特性的鉴定 | 第39-41页 |
·Western-blot | 第41-42页 |
·杂交瘤细胞分泌抗体稳定性鉴定 | 第42页 |
·抗体的亚类鉴定 | 第42页 |
4. 讨论 | 第42-45页 |
第二章 双抗体夹心ELISA检测猪流感病毒方法的建立 | 第45-54页 |
1. 试验材料及试剂 | 第45页 |
·细胞系、毒株 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·试验器材 | 第45页 |
2. 试验方法 | 第45-48页 |
·单抗腹水的纯化及蛋白浓度的测定 | 第45-46页 |
·抗体的辣根过氧化物酶标记 | 第46页 |
·配对夹心抗体的筛选 | 第46页 |
·最佳条件的确定 | 第46-48页 |
·敏感性试验 | 第48页 |
·特异性试验 | 第48页 |
·夹心ELISA检测SIV的初步应用 | 第48页 |
3. 实验结果 | 第48-52页 |
·单抗的纯化 | 第48页 |
·单抗的HRP标记 | 第48-49页 |
·夹心ELISA方法的建立 | 第49-50页 |
·敏感性试验结果 | 第50-51页 |
·特异性实验结果 | 第51页 |
·夹心ELISA方法的初步应用 | 第51-52页 |
4. 讨论 | 第52-54页 |
全文小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61-62页 |