人博卡病毒VP2蛋白的纯化及其单克隆抗体的制备
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-16页 |
| ·细小病毒简介 | 第8-9页 |
| ·人博卡病毒简介 | 第9-13页 |
| ·分离及分型 | 第9-10页 |
| ·基因特点 | 第10-11页 |
| ·病毒的流行病学研究及临床感染特征 | 第11-12页 |
| ·检测进展 | 第12页 |
| ·病毒致病机理研究进展 | 第12-13页 |
| ·本次实验表达系统简介以及实验策略 | 第13-14页 |
| ·单克隆抗体简介 | 第14-16页 |
| ·发展 | 第14-15页 |
| ·抗体特点比较 | 第15-16页 |
| ·本文研究目的和意义 | 第16页 |
| 2 实验材料与方法 | 第16-22页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-22页 |
| ·重组质粒的构建 | 第16-20页 |
| ·密码子的优化 | 第16页 |
| ·PCR扩增 | 第16-18页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第18-19页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第19页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第19-20页 |
| ·血清样本检测 | 第20页 |
| ·单克隆抗体制备 | 第20-22页 |
| ·动物免疫 | 第20-21页 |
| ·细胞融合及克隆 | 第21-22页 |
| ·诱生单抗腹水 | 第22页 |
| ·单克隆抗体的检测 | 第22页 |
| ·Western Blot检测抗原抗体结合能力 | 第22页 |
| ·单克隆效价的测定 | 第22页 |
| ·单克隆抗体的鉴定及亚类鉴定 | 第22页 |
| 3 实验结果 | 第22-26页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第22-25页 |
| ·优化后的目的片段的合成检测 | 第22页 |
| ·VP2基因的扩增 | 第22-23页 |
| ·重组质粒的构建 | 第23-24页 |
| ·重组蛋白的表达和纯化 | 第24-25页 |
| ·血清的检测 | 第25页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第25-26页 |
| ·细胞融合及单克隆抗体的筛选 | 第25页 |
| ·诱生单克隆抗体腹水 | 第25-26页 |
| ·单克隆抗体的检测 | 第26页 |
| ·抗体的结合能力 | 第26页 |
| ·单克隆抗体的效价 | 第26页 |
| ·单克隆抗体的亚型 | 第26页 |
| 4 讨论 | 第26-31页 |
| ·目的蛋白的表达及纯化 | 第27-30页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第30-31页 |
| 5 结论 | 第31-32页 |
| 致谢 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-38页 |
| 作者简介 | 第38页 |
