摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-15页 |
文献综述 | 第15-30页 |
第一章 小鼠卵母细胞、早期胚胎发育及胚胎附植调控研究进展 | 第15-21页 |
·小鼠卵泡发育及基因调控 | 第15-17页 |
·小鼠卵母细胞发育及基因表达调控 | 第15-16页 |
·卵巢颗粒细胞与卵母细胞发育 | 第16-17页 |
·小鼠植入前胚胎发育及基因调控 | 第17-19页 |
·胚胎基因组的激活 | 第18页 |
·胚胎的蛋白质合成 | 第18页 |
·早期胚胎发育的基因调控 | 第18-19页 |
·胚胎附植及其影响因素 | 第19-21页 |
第二章 ERS 与哺乳动物生殖 | 第21-28页 |
·ERS 及 UPR | 第21-22页 |
·ERS 与哺乳动物生殖 | 第22-27页 |
·ERS 与雌性哺乳动物生殖 | 第22-26页 |
·ERS 与雄性哺乳动物生殖 | 第26-27页 |
·常用的 ERS 诱导剂及其作用机理 | 第27-28页 |
第三章 LRF 基因(蛋白)的研究进展 | 第28-30页 |
·LRF 结构 | 第28页 |
·LRF 蛋白的分布 | 第28页 |
·LRF 与 ERS | 第28-30页 |
实验研究 | 第30-90页 |
第四章 抗 LRF 抗体的制备及鉴定 | 第30-46页 |
·试验材料及仪器设备 | 第30-32页 |
·试验材料 | 第30-31页 |
·试验仪器 | 第31-32页 |
·试验方法 | 第32-36页 |
·GST-LRF-N 末端表达载体构建、蛋白纯化 | 第32-35页 |
·GST-LRF 融合蛋白纯化 | 第35页 |
·动物免疫 | 第35-36页 |
·结果 | 第36-42页 |
·载体构建及鉴定 | 第36-38页 |
·GST-LRF-N 和 GST-LRF 融合蛋白的最佳表达条件 | 第38-42页 |
·纯化 GST-LRF 融合蛋白及检测、鉴定 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-46页 |
第五章 LRF 在雌性小鼠发情周期中的表达与调节 | 第46-61页 |
·实验材料及实验动物 | 第46-48页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·实验仪器 | 第47页 |
·实验动物 | 第47-48页 |
·实验方法 | 第48-52页 |
·小鼠发情周期的确定 | 第48页 |
·RNA 的提取 | 第48页 |
·cDNA 合成 | 第48-49页 |
·荧光定量 PCR 反应 | 第49-50页 |
·免疫组化 | 第50-51页 |
·Western blot 鉴定小鼠卵巢、子宫中 LRF 蛋白的表达 | 第51-52页 |
·试验结果 | 第52-59页 |
·小鼠发情周期鉴定 | 第52页 |
·实时荧光定量 PCR | 第52-55页 |
·免疫组化结果 | 第55-57页 |
·Western blot 结果 | 第57-59页 |
·讨论 | 第59-60页 |
·小结 | 第60-61页 |
第六章 LRF 在小鼠卵泡及植入前胚胎中的表达及调节 | 第61-68页 |
·实验材料及动物 | 第61页 |
·实验材料 | 第61页 |
·实验动物 | 第61页 |
·方法 | 第61-63页 |
·实验动物饲养 | 第61-62页 |
·小鼠超数排卵及卵母细胞、植入前胚胎的收集 | 第62页 |
·实时荧光定量 PCR | 第62页 |
·免疫细胞荧光化学 | 第62页 |
·免疫组化 | 第62-63页 |
·结果 | 第63-66页 |
·小鼠卵母细胞及植入前胚胎 LRF mRNA 表达规律 | 第63页 |
·卵母细胞和胚胎免疫细胞化学 | 第63-65页 |
·LRF 在小鼠各期卵泡及黄体中定位 | 第65-66页 |
·讨论 | 第66-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
第七章 LRF 在小鼠围植入期子宫中的作用研究 | 第68-81页 |
·实验材料及动物 | 第68-69页 |
·实验材料 | 第68-69页 |
·实验器械 | 第69页 |
·实验动物及饲养 | 第69页 |
·实验方法 | 第69-70页 |
·正常妊娠小白鼠 | 第69页 |
·假孕小鼠 | 第69-70页 |
·人工诱导蜕膜化 | 第70页 |
·激素调节实验 | 第70页 |
·延迟着床及着床激活 | 第70页 |
·RNA 提取 | 第70页 |
·实时荧光定量 PCR | 第70页 |
·免疫组化 | 第70页 |
·结果 | 第70-78页 |
·实时荧光定量 PCR 结果 | 第70-73页 |
·免疫组化结果 | 第73-78页 |
·讨论 | 第78-80页 |
·小结 | 第80-81页 |
第八章 LRF 介导的 ERS 在小鼠卵巢颗粒细胞凋亡过程中的调节作用 | 第81-90页 |
·实验材料及实验动物 | 第81-83页 |
·实验试剂 | 第81-82页 |
·实验设备 | 第82-83页 |
·实验动物 | 第83页 |
·实验步骤 | 第83-85页 |
·实验小鼠的超排处理 | 第83页 |
·DMEM/F12 培养液的预平衡 | 第83页 |
·卵巢颗粒细胞的采取 | 第83页 |
·小鼠卵巢颗粒细胞的原代培养 | 第83-84页 |
·颗粒细胞诱导 ERS 模型 | 第84页 |
·实时荧光定量 PCR 检测 ERS 相关基因 | 第84页 |
·流式细胞仪检测颗粒细胞凋亡率 | 第84页 |
·免疫组化检测 ERS 相关蛋白表达 | 第84-85页 |
·荧光共聚胶检测 ERS 蛋白定位 | 第85页 |
·结果 | 第85-89页 |
·免疫组化 | 第85页 |
·激光共聚胶 | 第85页 |
·实时荧光定量 PCR 结果 | 第85-88页 |
·细胞流式结果 | 第88-89页 |
·讨论 | 第89页 |
·小结 | 第89-90页 |
结论 | 第90-91页 |
创新点 | 第91-92页 |
进一步研究内容 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-105页 |
缩略词 | 第105-107页 |
附录 | 第107-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
作者简介 | 第110页 |