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LRF在雌性小鼠生殖及卵巢颗粒细胞凋亡过程中的作用研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
文献综述第15-30页
 第一章 小鼠卵母细胞、早期胚胎发育及胚胎附植调控研究进展第15-21页
   ·小鼠卵泡发育及基因调控第15-17页
     ·小鼠卵母细胞发育及基因表达调控第15-16页
     ·卵巢颗粒细胞与卵母细胞发育第16-17页
   ·小鼠植入前胚胎发育及基因调控第17-19页
     ·胚胎基因组的激活第18页
     ·胚胎的蛋白质合成第18页
     ·早期胚胎发育的基因调控第18-19页
   ·胚胎附植及其影响因素第19-21页
 第二章 ERS 与哺乳动物生殖第21-28页
   ·ERS 及 UPR第21-22页
   ·ERS 与哺乳动物生殖第22-27页
     ·ERS 与雌性哺乳动物生殖第22-26页
     ·ERS 与雄性哺乳动物生殖第26-27页
   ·常用的 ERS 诱导剂及其作用机理第27-28页
 第三章 LRF 基因(蛋白)的研究进展第28-30页
   ·LRF 结构第28页
   ·LRF 蛋白的分布第28页
   ·LRF 与 ERS第28-30页
实验研究第30-90页
 第四章 抗 LRF 抗体的制备及鉴定第30-46页
   ·试验材料及仪器设备第30-32页
     ·试验材料第30-31页
     ·试验仪器第31-32页
   ·试验方法第32-36页
     ·GST-LRF-N 末端表达载体构建、蛋白纯化第32-35页
     ·GST-LRF 融合蛋白纯化第35页
     ·动物免疫第35-36页
   ·结果第36-42页
     ·载体构建及鉴定第36-38页
     ·GST-LRF-N 和 GST-LRF 融合蛋白的最佳表达条件第38-42页
   ·纯化 GST-LRF 融合蛋白及检测、鉴定第42-43页
   ·讨论第43-44页
   ·小结第44-46页
 第五章 LRF 在雌性小鼠发情周期中的表达与调节第46-61页
   ·实验材料及实验动物第46-48页
     ·实验材料第46-47页
     ·实验仪器第47页
     ·实验动物第47-48页
   ·实验方法第48-52页
     ·小鼠发情周期的确定第48页
     ·RNA 的提取第48页
     ·cDNA 合成第48-49页
     ·荧光定量 PCR 反应第49-50页
     ·免疫组化第50-51页
     ·Western blot 鉴定小鼠卵巢、子宫中 LRF 蛋白的表达第51-52页
   ·试验结果第52-59页
     ·小鼠发情周期鉴定第52页
     ·实时荧光定量 PCR第52-55页
     ·免疫组化结果第55-57页
     ·Western blot 结果第57-59页
   ·讨论第59-60页
   ·小结第60-61页
 第六章 LRF 在小鼠卵泡及植入前胚胎中的表达及调节第61-68页
   ·实验材料及动物第61页
     ·实验材料第61页
     ·实验动物第61页
   ·方法第61-63页
     ·实验动物饲养第61-62页
     ·小鼠超数排卵及卵母细胞、植入前胚胎的收集第62页
     ·实时荧光定量 PCR第62页
     ·免疫细胞荧光化学第62页
     ·免疫组化第62-63页
   ·结果第63-66页
     ·小鼠卵母细胞及植入前胚胎 LRF mRNA 表达规律第63页
     ·卵母细胞和胚胎免疫细胞化学第63-65页
     ·LRF 在小鼠各期卵泡及黄体中定位第65-66页
   ·讨论第66-67页
   ·小结第67-68页
 第七章 LRF 在小鼠围植入期子宫中的作用研究第68-81页
   ·实验材料及动物第68-69页
     ·实验材料第68-69页
     ·实验器械第69页
     ·实验动物及饲养第69页
   ·实验方法第69-70页
     ·正常妊娠小白鼠第69页
     ·假孕小鼠第69-70页
     ·人工诱导蜕膜化第70页
     ·激素调节实验第70页
     ·延迟着床及着床激活第70页
     ·RNA 提取第70页
     ·实时荧光定量 PCR第70页
     ·免疫组化第70页
   ·结果第70-78页
     ·实时荧光定量 PCR 结果第70-73页
     ·免疫组化结果第73-78页
   ·讨论第78-80页
   ·小结第80-81页
 第八章 LRF 介导的 ERS 在小鼠卵巢颗粒细胞凋亡过程中的调节作用第81-90页
   ·实验材料及实验动物第81-83页
     ·实验试剂第81-82页
     ·实验设备第82-83页
     ·实验动物第83页
   ·实验步骤第83-85页
     ·实验小鼠的超排处理第83页
     ·DMEM/F12 培养液的预平衡第83页
     ·卵巢颗粒细胞的采取第83页
     ·小鼠卵巢颗粒细胞的原代培养第83-84页
     ·颗粒细胞诱导 ERS 模型第84页
     ·实时荧光定量 PCR 检测 ERS 相关基因第84页
     ·流式细胞仪检测颗粒细胞凋亡率第84页
     ·免疫组化检测 ERS 相关蛋白表达第84-85页
     ·荧光共聚胶检测 ERS 蛋白定位第85页
   ·结果第85-89页
     ·免疫组化第85页
     ·激光共聚胶第85页
     ·实时荧光定量 PCR 结果第85-88页
     ·细胞流式结果第88-89页
   ·讨论第89页
   ·小结第89-90页
结论第90-91页
创新点第91-92页
进一步研究内容第92-93页
参考文献第93-105页
缩略词第105-107页
附录第107-109页
致谢第109-110页
作者简介第110页

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