| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一篇：文献综述 | 第11-29页 |
| 第一章 Wnt家族研究的概况 | 第11-19页 |
| 1 Wnt蛋白家族 | 第11-14页 |
| ·Wnt组成与分子结构 | 第11-12页 |
| ·Wnt蛋白的生化特性 | 第12-14页 |
| 2 Wnt4基因的研究进展 | 第14-18页 |
| ·Wnt4基因的结构和表达 | 第14-15页 |
| ·Wnt4基因与卵巢的分化及发育 | 第15-18页 |
| 3 小结 | 第18-19页 |
| 第二章 利用EST序列克隆新基因及生物信息学分析 | 第19-29页 |
| 1 基于EST的电子克隆策略 | 第19-22页 |
| ·电子克隆的基本策略 | 第20-22页 |
| 2 核酸序列分析 | 第22-23页 |
| ·ORF(Open Reading Frame)分析 | 第22页 |
| ·染色体定位 | 第22页 |
| ·基因结构分析 | 第22页 |
| ·基因上游调控区分析 | 第22-23页 |
| 3 蛋白质结构分析和功能预测 | 第23-26页 |
| ·蛋白质氨基酸组成、分子量和等电点分析 | 第23-24页 |
| ·疏水性分析 | 第24页 |
| ·信号肽预测 | 第24页 |
| ·跨膜区预测 | 第24页 |
| ·亚细胞定位预测 | 第24-25页 |
| ·蛋白质功能结构域分析 | 第25页 |
| ·蛋白质多序列比对和分子系统发生分析 | 第25-26页 |
| 4 小结 | 第26页 |
| 5 本试验研究的目的和意义 | 第26-29页 |
| 参考文献 | 第29-35页 |
| 第二篇 试验研究 | 第35-69页 |
| 第三章 猪Wnt4基因的克隆测序 | 第35-53页 |
| 1 材料与方法 | 第35-47页 |
| ·材料 | 第35-37页 |
| ·方法 | 第37-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-51页 |
| ·猪EST序列的获取 | 第47页 |
| ·EST序列的拼接 | 第47-48页 |
| ·PCR扩增ORF区 | 第48-49页 |
| ·5’RACE扩增5’UTR | 第49页 |
| ·PCR产物克隆测序 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| ·Wnt4基因的电子克隆 | 第51页 |
| ·RACE技术的优缺点 | 第51页 |
| ·TOP TA克隆和快速鉴定的优点 | 第51-52页 |
| 4 小结 | 第52-53页 |
| 第四章 蛋白质序列的生物信息学分析 | 第53-63页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·蛋白质氨基酸组成、分子量和等电点分析 | 第53页 |
| ·蛋白质疏水性分析 | 第53-54页 |
| ·蛋白质信号肽预测 | 第54页 |
| ·跨膜区预测 | 第54页 |
| ·亚细胞定位预测 | 第54页 |
| ·蛋白质功能结构域预测 | 第54-55页 |
| ·蛋白质氨基酸序列间的多重比对和分子系统发生分析 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-61页 |
| ·ORF分析 | 第55页 |
| ·氨基酸组成、分子量和等电点 | 第55-56页 |
| ·疏水性分析 | 第56页 |
| ·信号肽分析 | 第56-57页 |
| ·跨膜区分析 | 第57-58页 |
| ·亚细胞定位预测 | 第58页 |
| ·蛋白质结构域预测 | 第58-59页 |
| ·蛋白质氨基酸序列间的多重比对和分子系统发生分析 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-62页 |
| 4 小结 | 第62-63页 |
| 第五章 猪Wnt4基因的组织表达谱分析 | 第63-69页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·试验方法 | 第63-65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-67页 |
| ·RNA的纯度和浓度 | 第65页 |
| ·β-actin检测反转录效果 | 第65页 |
| ·β-actin和Wnt4基因的荧光定量 | 第65-67页 |
| ·Wnt4基因的组织表达谱分析 | 第67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 全文结论 | 第71-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |
| RACE技术 | 第74-79页 |
| 致谢 | 第79页 |