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条斑紫菜(Pyropia/Porphyra yezoensis)实时荧光定量PCR内参基因的筛选

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
一、前言第11-20页
 1. 条斑紫菜(Pyropia/Porphyra yezoensis)概述第11-15页
   ·条斑紫菜的生物学特性第11-12页
     ·条斑紫菜的分类学地位第11页
     ·条斑紫菜的生活史第11-12页
   ·条斑紫菜的应用价值第12-13页
   ·条斑紫菜的生物学研究进展第13-15页
 2. 实时定量荧光 PCR第15-18页
   ·实时荧光定量 PCR 的原理第15-16页
   ·实时荧光定量 PCR 的应用第16-18页
 3. 内参基因研究进展第18-19页
 4. 研究目的及意义第19-20页
二、材料与方法第20-28页
 1. 材料第20-22页
   ·实验试剂第20-21页
   ·实验中部分溶液的配制方法第21-22页
   ·实验仪器第22页
 2. 方法第22-28页
   ·条斑紫菜材料处理第22-23页
   ·条斑紫菜总 RNA 的提取及 cDNA 的合成第23-25页
     ·条斑紫菜总 RNA 的提取第23-24页
     ·DNA 消化第24页
     ·cDNA 第一链的合成第24页
     ·cDNA 第一链检测第24-25页
   ·引物设计及检测第25-26页
     ·引物设计第25-26页
     ·引物检测第26页
   ·标准品质粒的制备第26-28页
     ·目的片段的切胶回收第26页
     ·感受态细胞的制备第26-27页
     ·回收产物与载体的连接第27页
     ·pMD18T 载体转化大肠杆菌感受态第27页
     ·转化菌株的筛选及重组质粒的鉴定第27页
     ·重组标准品质粒的制备第27-28页
   ·用实时荧光定量 PCR 进行样品表达量的检测第28页
三、结果第28-43页
 1. Trizol 法提取总 RNA 的电泳检测第28-29页
 2. 内参基因 PCR 扩增产物的检测第29-30页
 3. 实时荧光定量 PCR 结果分析第30-43页
   ·标准曲线制备第30-33页
   ·实验样品实时荧光定量熔解曲线第33-36页
   ·数据分析第36-43页
     ·Best-keeper 分析第36-38页
     ·NormFinder 分析第38-39页
     ·GeNorm 软件分析第39-43页
四、讨论第43-47页
参考文献第47-55页
致谢第55页

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