摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
一、前言 | 第11-20页 |
1. 条斑紫菜(Pyropia/Porphyra yezoensis)概述 | 第11-15页 |
·条斑紫菜的生物学特性 | 第11-12页 |
·条斑紫菜的分类学地位 | 第11页 |
·条斑紫菜的生活史 | 第11-12页 |
·条斑紫菜的应用价值 | 第12-13页 |
·条斑紫菜的生物学研究进展 | 第13-15页 |
2. 实时定量荧光 PCR | 第15-18页 |
·实时荧光定量 PCR 的原理 | 第15-16页 |
·实时荧光定量 PCR 的应用 | 第16-18页 |
3. 内参基因研究进展 | 第18-19页 |
4. 研究目的及意义 | 第19-20页 |
二、材料与方法 | 第20-28页 |
1. 材料 | 第20-22页 |
·实验试剂 | 第20-21页 |
·实验中部分溶液的配制方法 | 第21-22页 |
·实验仪器 | 第22页 |
2. 方法 | 第22-28页 |
·条斑紫菜材料处理 | 第22-23页 |
·条斑紫菜总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第23-25页 |
·条斑紫菜总 RNA 的提取 | 第23-24页 |
·DNA 消化 | 第24页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第24页 |
·cDNA 第一链检测 | 第24-25页 |
·引物设计及检测 | 第25-26页 |
·引物设计 | 第25-26页 |
·引物检测 | 第26页 |
·标准品质粒的制备 | 第26-28页 |
·目的片段的切胶回收 | 第26页 |
·感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
·回收产物与载体的连接 | 第27页 |
·pMD18T 载体转化大肠杆菌感受态 | 第27页 |
·转化菌株的筛选及重组质粒的鉴定 | 第27页 |
·重组标准品质粒的制备 | 第27-28页 |
·用实时荧光定量 PCR 进行样品表达量的检测 | 第28页 |
三、结果 | 第28-43页 |
1. Trizol 法提取总 RNA 的电泳检测 | 第28-29页 |
2. 内参基因 PCR 扩增产物的检测 | 第29-30页 |
3. 实时荧光定量 PCR 结果分析 | 第30-43页 |
·标准曲线制备 | 第30-33页 |
·实验样品实时荧光定量熔解曲线 | 第33-36页 |
·数据分析 | 第36-43页 |
·Best-keeper 分析 | 第36-38页 |
·NormFinder 分析 | 第38-39页 |
·GeNorm 软件分析 | 第39-43页 |
四、讨论 | 第43-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
致谢 | 第55页 |