| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-17页 |
| 1. 前言 | 第17-37页 |
| ·白细胞介素18 的研究进展 | 第17-32页 |
| ·IL-18 的发现 | 第17-18页 |
| ·IL-18 的来源及分布 | 第18-19页 |
| ·IL-18 的基因结构及表达调控 | 第19-20页 |
| ·IL-18 的分子结构及特性 | 第20-21页 |
| ·IL-18 的受体及信号转导机制 | 第21-23页 |
| ·IL-18 的生物学特性 | 第23-27页 |
| ·IL-18 在疾病发展过程中的作用 | 第27-32页 |
| ·动物IL-18 的研究现状 | 第32-33页 |
| ·山羊IL-18 的研究 | 第32页 |
| ·其他种属动物IL-18 的研究 | 第32-33页 |
| ·抗山羊IL-18 mAbs 的研究进展及应用 | 第33-35页 |
| ·mAbs 的研究进展 | 第33-34页 |
| ·IL-18 的检测 | 第34-35页 |
| ·山羊IL-18 作为新型免疫佐剂的研究现状 | 第35页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第35-37页 |
| 2 研究内容 | 第37-104页 |
| 第一部分 山羊IL-18 单克隆抗体的制备及鉴定 | 第37-84页 |
| 1. 材料与方法 | 第37-69页 |
| ·材料 | 第37-45页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·所用试剂及耗材 | 第37-38页 |
| ·质粒、细胞及受体菌培养基 | 第38-40页 |
| ·主要试剂的配制 | 第40-44页 |
| ·主要仪器及设备 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-69页 |
| ·山羊IL-18 成熟蛋白基因的克隆及原核表达载体的构建 | 第45-48页 |
| ·重组质粒pET-28a-g18 的鉴定 | 第48-51页 |
| ·重组质粒pET-28a-g18 的诱导表达 | 第51-53页 |
| ·重组成熟蛋白gIL-18 的大量表达及纯化 | 第53-55页 |
| ·重组蛋白gIL-18 对BALB/c 小鼠的免疫 | 第55页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立 | 第55-57页 |
| ·细胞融合 | 第57-61页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化及冻存 | 第61-62页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备及纯化 | 第62-63页 |
| ·单克隆抗体特性的鉴定 | 第63-64页 |
| ·Western blot 的鉴定 | 第64-66页 |
| ·间接免疫荧光鉴定 | 第66-67页 |
| ·ELISA 叠加试验初步检测单抗的抗原识别位点 | 第67-69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-81页 |
| ·gIL-18 成熟蛋白基因的克隆、序列测定及其分析 | 第69-71页 |
| ·重组质粒pET-28a-g18 在E.coli Rosetta(DE3)中的表达及纯化 | 第71-74页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立 | 第74-76页 |
| ·单克隆抗体杂交瘤细胞株的获得 | 第76-77页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备与纯化 | 第77页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第77-78页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第78页 |
| ·IFA 鉴定 | 第78-80页 |
| ·ELISA 叠加试验 | 第80-81页 |
| 3 讨论 | 第81-84页 |
| 第二部分 山羊IL-18 定量抗原捕获ELISA 检测方法的建立及应用 | 第84-97页 |
| 1 材料与方法 | 第84-90页 |
| ·材料 | 第84-86页 |
| ·所用试剂及耗材 | 第84页 |
| ·主要试剂的配制 | 第84-85页 |
| ·主要仪器及设备 | 第85-86页 |
| ·方法 | 第86-90页 |
| ·HRP 标记2E8 单抗 | 第86页 |
| ·酶结合物标记水平测定 | 第86-87页 |
| ·酶结合物的效价测定 | 第87页 |
| ·定量抗原捕获ELISA 方法反应条件的确定 | 第87-88页 |
| ·定量抗原捕获ELISA 检测方法的实践应用 | 第88-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-95页 |
| ·单抗2E8 的HRP 标记及其效价测定 | 第90页 |
| ·定量抗原捕获ELISA 方法的建立 | 第90-93页 |
| ·定量抗原捕获ELISA 方法的临床应用 | 第93-95页 |
| 3 讨论 | 第95-97页 |
| 第三部分 山羊IL-18 重组杆状病毒表达产物在免疫增强方面的研究 | 第97-104页 |
| 1. 材料与方法 | 第97-100页 |
| ·材料 | 第97-98页 |
| ·实验动物 | 第97页 |
| ·所用试剂及耗材 | 第97页 |
| ·主要试剂的配制 | 第97-98页 |
| ·主要仪器及设备 | 第98页 |
| ·方法 | 第98-100页 |
| ·试验分组及免疫方式 | 第98-99页 |
| ·利用ELISA 检测试剂盒从体液免疫水平上分析山羊的免疫效果 | 第99页 |
| ·利用MTT 法从细胞免疫水平上分析淋巴细胞的增殖水平 | 第99-100页 |
| ·利用血细胞分析仪对不同免疫时期的山羊血液进行分析 | 第100页 |
| 2. 结果与分析 | 第100-102页 |
| ·在体液免疫水平上分析免疫后的抗体水平 | 第100-101页 |
| ·在细胞免疫水平上分析免疫后淋巴细胞的增殖水平 | 第101页 |
| ·血细胞分析结果 | 第101-102页 |
| 3 讨论 | 第102-104页 |
| 结论 | 第104-105页 |
| 创新之处 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第125页 |
