| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| ·干细胞 | 第13-15页 |
| ·胚胎干细胞 | 第13-14页 |
| ·间充质干细胞 | 第14-15页 |
| ·神经干细胞 | 第15页 |
| ·干细胞的应用 | 第15-18页 |
| ·细胞治疗 | 第15-16页 |
| ·基因治疗 | 第16-17页 |
| ·组织工程 | 第17-18页 |
| ·药物筛选 | 第18页 |
| ·胚胎干细胞的培养体系 | 第18-19页 |
| ·有饲养层细胞培养体系 | 第18-19页 |
| ·使用条件培养基的无饲养层细胞培养体系 | 第19页 |
| ·使用确定成分培养基的无饲养层细胞培养体系 | 第19页 |
| ·培养方式 | 第19-21页 |
| ·三维支架培养 | 第19-20页 |
| ·微载体培养 | 第20-21页 |
| ·微囊化培养 | 第21页 |
| ·生物反应器规模化培养干细胞的现状 | 第21-23页 |
| ·搅拌罐式生物反应器 | 第21-22页 |
| ·旋转生物反应器 | 第22页 |
| ·中空纤维生物反应器 | 第22页 |
| ·纤维床生物反应器 | 第22-23页 |
| ·本项目的立项意义和内容 | 第23-24页 |
| ·立项意义 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 小鼠胚胎成纤维细胞的分离及饲养层细胞制作 | 第24-36页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·实验动物 | 第24-25页 |
| ·主要药品与试剂 | 第25页 |
| ·实验设备和材料 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-30页 |
| ·实验用主要溶液的配制 | 第26页 |
| ·孕期 13.5 天的孕鼠的获得 | 第26-27页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）的分离 | 第27-28页 |
| ·支原体检测 | 第28-29页 |
| ·饲养层细胞制作 | 第29-30页 |
| ·实验结果与讨论 | 第30-33页 |
| ·MEF 细胞形态观察 | 第30-31页 |
| ·MEF 支原体检测 | 第31-32页 |
| ·丝裂霉素 C 灭活后铺板的饲养层细胞 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-36页 |
| 第三章 小鼠胚胎干细胞在饲养层细胞上培养 | 第36-43页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·细胞 | 第36页 |
| ·主要药品与试剂 | 第36页 |
| ·实验设备和材料 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·实验用主要溶液的配制 | 第37页 |
| ·mESCs/GFP 的饲养层培养体系 | 第37-38页 |
| ·拟胚体形成 | 第38页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第38-39页 |
| ·实验结果和讨论 | 第39-41页 |
| ·mESCs 形态观察 | 第39页 |
| ·拟胚体形成实验 | 第39-41页 |
| ·碱性磷酸酶染色结果 | 第41页 |
| ·小结 | 第41-43页 |
| 第四章 MESCS/GFP 的三维扩增培养 | 第43-54页 |
| ·实验材料 | 第43-45页 |
| ·材料和细胞 | 第43页 |
| ·主要药品与试剂 | 第43-44页 |
| ·实验设备与材料 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·溶液的配制 | 第45页 |
| ·80％MEF 条件培养基 | 第45页 |
| ·PET 处理 | 第45-46页 |
| ·静态培养细胞接种 | 第46页 |
| ·动态培养细胞接种 | 第46页 |
| ·细胞的增殖及代谢的测定 | 第46-47页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第47页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测转录因子 Oct-4 | 第47-48页 |
| ·扫描电镜检测 | 第48页 |
| ·实验结果和讨论 | 第48-52页 |
| ·mESCs/GFP 的三维培养结果分析 | 第48-49页 |
| ·碱性磷酸酶活性 | 第49-50页 |
| ·Oct-4 免疫荧光染色 | 第50-52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 第五章 PET、BIONOCⅡ、FIBRACEL DISKS 与鼠胚胎干细胞生物相容性的比较 | 第54-65页 |
| ·实验材料 | 第54-56页 |
| ·材料和细胞 | 第54页 |
| ·主要药品与试剂 | 第54-55页 |
| ·实验设备与材料 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| ·溶液的配制 | 第56页 |
| ·80％MEF 条件培养基 | 第56页 |
| ·PET、BioNOCⅡ、FibraCelDisks 处理 | 第56页 |
| ·细胞接种 | 第56-57页 |
| ·细胞的增殖及代谢的测定 | 第57页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第57页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测转录因子 Oct-4 | 第57-58页 |
| ·扫描电镜检测 | 第58页 |
| ·实验结果和讨论 | 第58-63页 |
| ·mESCs/GFP 在三种生物材料上的代谢和增殖情况 | 第58-60页 |
| ·碱性磷酸酶活性 | 第60-61页 |
| ·Oct-4 免疫荧光染色 | 第61-62页 |
| ·SEM | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-65页 |
| 结论与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附件 | 第75页 |
