| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 引言 | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-29页 |
| ·癌症的化学预防 | 第18页 |
| ·结肠癌的治疗现状 | 第18-19页 |
| ·姜黄素的抗癌分子机制 | 第19-20页 |
| ·姜黄素的研究现状 | 第20-21页 |
| ·姜黄素对肿瘤细胞信号通路的影响 | 第21-24页 |
| ·芳香烃受体和解毒酶 | 第21页 |
| ·抑制丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的活性 | 第21-22页 |
| ·抑制激活蛋白 AP-1 的活性 | 第22-23页 |
| ·抑制转录因子 NF-κB 的活性 | 第23页 |
| ·抑制 Egr-1 的活性 | 第23页 |
| ·抑制 COX-2 的活性 | 第23-24页 |
| ·抑制 iNOS 的表达 | 第24页 |
| ·抑制 EGFR 的活性 | 第24页 |
| ·姜黄素抑制肿瘤细胞血管生成，转移和侵袭 | 第24页 |
| ·姜黄素药代动力学研究 | 第24-25页 |
| ·临床试验 | 第25-27页 |
| ·本课题的研究背景及研究意义 | 第27-28页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第28-29页 |
| 第二章 姜黄素体外抗结肠癌作用及其机制研究 | 第29-66页 |
| ·实验材料 | 第29-33页 |
| ·细胞株 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要溶液配制 | 第30-32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-41页 |
| ·细胞培养和处理 | 第33页 |
| ·细胞增殖抑制试验 | 第33-34页 |
| ·LoVo 细胞生长曲线测定方法 | 第34页 |
| ·细胞形态学观察与鉴定 | 第34-35页 |
| ·集落形成实验 | 第35页 |
| ·乳酸脱氢酶释放的测定 | 第35页 |
| ·Hoechst 33258 染色观察细胞凋亡 | 第35页 |
| ·细胞周期的检测 | 第35-36页 |
| ·Caspase-3 和 Caspase-9 活性的测定 | 第36页 |
| ·Annexin V-FITC 和 PI 双标检测细胞凋亡 | 第36-37页 |
| ·线粒体膜电位(ΔΨm)的测定 | 第37页 |
| ·总 RNA 的提取与 RT-PCR | 第37-38页 |
| ·Western blotting | 第38-41页 |
| ·免疫荧光细胞化学染色检测 c-myc 的表达 | 第41页 |
| ·统计学分析 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-63页 |
| ·姜黄素对不同细胞株增殖的影响 | 第41-45页 |
| ·LoVo 细胞的生长特性的观察 | 第45-46页 |
| ·倒置显微镜观察细胞形态 | 第46-48页 |
| ·透射电镜观察细胞的超微结构 | 第48-49页 |
| ·姜黄素对细胞集落形成的影响 | 第49-50页 |
| ·姜黄素对细胞 LDH 释放的影响 | 第50-51页 |
| ·姜黄素对 LoVo 细胞核形态的影响 | 第51-52页 |
| ·姜黄素对 LoVo 细胞周期分布的影响 | 第52-54页 |
| ·姜黄素对 caspase-3 和 caspase-9 活性的影响 | 第54-55页 |
| ·Annexin V/PI 双染检测细胞凋亡结果 | 第55-57页 |
| ·姜黄素对 LoVo 细胞ΔΨm 的影响 | 第57页 |
| ·姜黄素对 LoVo 细胞凋亡基因 mRNA 表达水平的影响 | 第57-60页 |
| ·姜黄素对 LoVo 细胞质中细胞色素 c 释放的影响 | 第60页 |
| ·姜黄素对 LoVo 细胞中 Bax、Bcl-2、survivin、caspase-3、p53 和 c-myc 蛋白表达的影响 | 第60-62页 |
| ·姜黄素对 LoVo 细胞中荧光标记 c-myc 表达的影响 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-66页 |
| 第三章 姜黄素联合奥沙利铂体外抗结肠癌作用及其机制研究 | 第66-92页 |
| ·实验材料 | 第66-69页 |
| ·细胞株 | 第66页 |
| ·主要试剂 | 第66-67页 |
| ·主要溶液配制 | 第67-69页 |
| ·主要仪器设备 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-73页 |
| ·细胞培养 | 第69页 |
| ·MTT 法检测姜黄素与奥沙利铂联用对 LoVo 细胞增殖的影响 | 第69-70页 |
| ·透射电镜观察细胞形态学变化 | 第70页 |
| ·集落形成实验检测姜黄素联合奥沙利铂对集落形成的影响 | 第70-71页 |
| ·Hoechst 33258 染色检测姜黄素与奥沙利铂联用对细胞核的影响 | 第71页 |
| ·PI 染色检测姜黄素与奥沙利铂联用对细胞周期的影响 | 第71页 |
| ·Caspase-3 和 Caspase-9 活性的测定 | 第71页 |
| ·流式细胞术检测姜黄素联合奥沙利铂诱导的细胞凋亡 | 第71页 |
| ·Rh123 染色流式细胞仪检测ΔΨm | 第71-72页 |
| ·RT-PCR 检测细胞 mRNA 表达量的变化 | 第72页 |
| ·Western blotting | 第72页 |
| ·免疫荧光细胞化学染色检测 c-myc 的表达 | 第72页 |
| ·统计学分析 | 第72-73页 |
| ·结果 | 第73-90页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂对 LoVo 细胞生长、增殖的影响 | 第73-76页 |
| ·透射电镜观察细胞的超微结构 | 第76-77页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂对 LoVo 细胞集落形成的影响 | 第77-78页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂对 LoVo 细胞核形态的影响 | 第78-79页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂对 LoVo 细胞周期的影响 | 第79-80页 |
| ·Caspase-3 和 Caspase-9 活性的测定 | 第80-82页 |
| ·Annexin V-FITC 和 PI 双标检测细胞凋亡结果 | 第82-83页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂对 LoVo 细胞ΔΨm 的影响 | 第83-84页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂对 LoVo 细胞凋亡基因 mRNA 表达水平的影响 | 第84-87页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂对 LoVo 细胞中 Bax、Bcl-2、survivin、caspase-3 和 c-myc 蛋白表达的影响 | 第87-90页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂对 LoVo 细胞荧光标记 c-myc 表达的影响 | 第90页 |
| ·讨论 | 第90-92页 |
| 第四章 姜黄素联合奥沙利铂对结肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制研究 | 第92-116页 |
| ·实验材料 | 第92-96页 |
| ·细胞株 | 第92页 |
| ·动物 | 第92页 |
| ·主要试剂 | 第92-93页 |
| ·主要溶液配制 | 第93-95页 |
| ·主要仪器设备 | 第95-96页 |
| ·实验方法 | 第96-99页 |
| ·细胞培养 | 第96页 |
| ·结肠癌 LoVo 裸鼠移植瘤模型的建立 | 第96页 |
| ·实验动物分组和治疗方案 | 第96页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂联用对移植性裸鼠结肠癌 LoVo 的抑制作用 | 第96-97页 |
| ·血常规及肝肾功能检测 | 第97页 |
| ·流式细胞术检测肿瘤组织细胞周期 | 第97页 |
| ·肿瘤组织常规 HE 染色 | 第97页 |
| ·透射电镜观察肿瘤组织的超微结构 | 第97页 |
| ·Annexin V-FITC/PI 双标流式细胞术检测细胞凋亡 | 第97页 |
| ·TUNEL 染色 | 第97-98页 |
| ·肿瘤组织Δψm 的测定 | 第98页 |
| ·免疫组化检测肿瘤组织相关基因蛋白的表达 | 第98-99页 |
| ·RT-PCR 对肿瘤相关基因 mRNA 表达水平的检测 | 第99页 |
| ·免疫印迹法检测肿瘤组织相关蛋白的表达 | 第99页 |
| ·统计学分析 | 第99页 |
| ·结果 | 第99-114页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂对移植瘤裸鼠肿瘤生长的影响 | 第99-101页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂治疗对荷瘤裸鼠血常规及肝肾功能的影响 | 第101页 |
| ·姜黄素联合奥沙利铂治疗对裸鼠肿瘤组织细胞周期的影响 | 第101-102页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂处理对裸鼠肿瘤组织显微结构的影响 | 第102-103页 |
| ·电镜观察裸鼠肿瘤组织的超微结构 | 第103-104页 |
| ·Annexin V-FITC/PI 双标流式细胞术检测肿瘤组织细胞凋亡 | 第104-105页 |
| ·TUNEL 染色检测姜黄素和奥沙利铂处理肿瘤组织细胞凋亡结果 | 第105页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂处理对肿瘤组织Δψm 的影响 | 第105-107页 |
| ·免疫组化检测肿瘤组织相关蛋白的表达 | 第107-108页 |
| ·RT-PCR 对肿瘤相关基因 mRNA 表达水平的检测 | 第108-111页 |
| ·免疫印迹法检测肿瘤组织相关蛋白的表达 | 第111-114页 |
| ·讨论 | 第114-116页 |
| 第五章 姜黄素联合奥沙利铂对移植瘤裸鼠抗氧化能力的影响 | 第116-129页 |
| ·实验材料 | 第116-117页 |
| ·细胞株 | 第116页 |
| ·动物 | 第116页 |
| ·主要试剂 | 第116-117页 |
| ·主要溶液配制 | 第117页 |
| ·主要仪器设备 | 第117页 |
| ·实验方法 | 第117-119页 |
| ·细胞培养 | 第117-118页 |
| ·结肠癌 LoVo 裸鼠植瘤模型的建立 | 第118页 |
| ·实验分组和治疗方案 | 第118页 |
| ·移植瘤裸鼠血清抗氧化能力的测定 | 第118页 |
| ·移植瘤裸鼠肝脏、肾脏、脾脏和肿瘤组织抗氧化能力的测定 | 第118页 |
| ·移植瘤裸鼠血清 AKP、LDH 活性的测定 | 第118页 |
| ·姜黄素体外清除羟自由基(·OH)活性的测定 | 第118-119页 |
| ·姜黄素体外清除超氧阴离子自由基 (O2. -)能力的测定 | 第119页 |
| ·姜黄素体外清除 DPPH 自由基能力的测定 | 第119页 |
| ·统计学分析 | 第119页 |
| ·结果 | 第119-127页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂处理对移植瘤裸鼠体重的影响 | 第119-120页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂处理对结肠癌生长的影响 | 第120-121页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂处理对移植瘤裸鼠血清抗氧化能力的影响 | 第121-122页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂处理对肝脏抗氧化能力的影响 | 第122-123页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂处理对肾脏抗氧化能力的影响 | 第123页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂处理对脾脏抗氧化能力的影响 | 第123-124页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂处理对肿瘤组织抗氧化能力的影响 | 第124-125页 |
| ·姜黄素和奥沙利铂处理对荷瘤裸鼠血清 AKP、LDH 活性的影响 | 第125页 |
| ·姜黄素体外对·OH 自由基的清除能力 | 第125-126页 |
| ·姜黄素体外对 O2·-自由基的清除能力 | 第126-127页 |
| ·姜黄素体外对 DPPH 自由基的清除能力 | 第127页 |
| ·讨论 | 第127-129页 |
| 第六章 结论 | 第129-132页 |
| 参考文献 | 第132-144页 |
| 附录 英文缩略词表 | 第144-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第146页 |
