| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-21页 |
| ·课题背景 | 第8-9页 |
| ·国内外研究现状 | 第9-16页 |
| ·植物抗病基因研究进展 | 第9-11页 |
| ·Clp蛋白概述 | 第11-12页 |
| ·Clp蛋白酶全酶的结构和作用机制 | 第12-14页 |
| ·Clp蛋白酶生物学功能 | 第14-16页 |
| ·蛋白质与蛋白质相互作用研究方法 | 第16-19页 |
| ·酵母二元杂交体系(Yeast Two-Hybrid System) | 第16-17页 |
| ·GST沉降技术（GST Pull Down） | 第17-19页 |
| ·本文研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| ·本文研究内容 | 第20-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·质粒、菌株 | 第21页 |
| ·酶及主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-31页 |
| ·常用试剂 | 第22-23页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·大肠杆菌细胞转化 | 第23-24页 |
| ·质粒小规模提取 | 第24页 |
| ·酶切 | 第24-25页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及可溶性分析 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE蛋白电泳分析 | 第26-27页 |
| ·目的蛋白的亲和层析纯化 | 第27-28页 |
| ·Western blot检测 | 第28-29页 |
| ·植物组织蛋白质提取 | 第29页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第29页 |
| ·GST沉降寻找相互作用蛋白 | 第29-30页 |
| ·液相色谱-电喷雾-串联质谱（LC-ESI-MSIMS）分析 | 第30页 |
| ·水稻的处理方法 | 第30-31页 |
| 第3章 实验结果与分析 | 第31-48页 |
| ·重组蛋白的原核表达与纯化 | 第31-35页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的可溶性分析 | 第33-34页 |
| ·亲和层析纯化融合蛋白 | 第34页 |
| ·纯化蛋白的Western验证 | 第34-35页 |
| ·相互作用蛋白的检测 | 第35-40页 |
| ·水稻总蛋白提取物的Western验证 | 第35-36页 |
| ·GST沉降技术寻找相互作用蛋白 | 第36-37页 |
| ·液相色谱-电喷雾-串联质谱结果分析 | 第37-40页 |
| ·讨论 | 第40-46页 |
| ·关于重组蛋白的表达与纯化 | 第40-41页 |
| ·关于相互作用蛋白的检测 | 第41-42页 |
| ·Pi-HIT-1 与植物抗性 | 第42-45页 |
| ·Pi-HIT-1 可能参与了DNA复制、转录及翻译调控 | 第45页 |
| ·Pi-HIT-1 的其他功能 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录1 载体pGEX-4T-2 图谱 | 第55-56页 |
| 附录2 液质谱图 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
