摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
目录 | 第11-14页 |
缩略词表 | 第14-16页 |
第一部分 实验研究 | 第16-70页 |
第一章 毛囊细胞特异性表达载体的构建 | 第16-24页 |
1. 方法 | 第17-21页 |
·内蒙古白绒山羊Tβ4基因的分子克隆(此部分由王彦凤老师完成) | 第17-18页 |
·绵羊KAP6-1基因5’端调控区的PCR扩增(此部分由郭旭东老师完成) | 第18页 |
·CMV启动子区的序列扩增及红色荧光蛋白表达载体pCDsRed2的构建(此部分由郭旭东老师完成) | 第18-19页 |
·pCDsR-KT表达载体的构建(此部分由王彦凤老师完成) | 第19-21页 |
2. 结果与讨论 | 第21-22页 |
参考文献 | 第22-24页 |
第二章 绒山羊胎儿成纤维细胞的体外培养及基因转染 | 第24-41页 |
1. 材料 | 第25-26页 |
·相关的实验仪器设备 | 第25-26页 |
·活体实验材料 | 第26页 |
·主要试剂及耗材 | 第26页 |
2. 方法 | 第26-32页 |
·绒山羊胎儿成纤维细胞的分离与体外培养 | 第26-27页 |
·绒山羊胎儿成纤维细胞的冷冻保存 | 第27页 |
·绒山羊胎儿成纤维细胞的解冻复苏培养 | 第27页 |
·绒山羊胎儿成纤维细胞生长曲线的绘制与分析 | 第27页 |
·绒山羊胎儿成纤维细胞染色体数目分析 | 第27-28页 |
·绒山羊胎儿成纤维细胞的外源基因转染 | 第28-29页 |
·转基因后胎儿成纤维细胞生理指标的测定 | 第29-30页 |
·转基因绒山羊胎儿成纤维细胞性别鉴定 | 第30页 |
·转基因绒山羊胎儿成纤维细胞克隆的PCR鉴定 | 第30-32页 |
3. 结果 | 第32-36页 |
·绒山羊胎儿成纤维细胞的外源基因转染 | 第32-33页 |
·转基因绒山羊胎儿成纤维细胞克隆的体外筛选 | 第33-34页 |
·转基因与正常胎儿成纤维细胞生理指标的测定 | 第34-35页 |
·转基因绒山羊胎儿成纤维细胞性别鉴定 | 第35-36页 |
·转基因胎儿成纤维细胞克隆的PCR鉴定 | 第36页 |
·转基因胎儿成纤维细胞红色荧光表达情况 | 第36页 |
4. 讨论 | 第36-39页 |
参考文献 | 第39-41页 |
第三章 利用体细胞核移植技术制备转基因绒山羊胚胎 | 第41-54页 |
1. 材料 | 第42-43页 |
·主要仪器设备 | 第42页 |
·活体材料 | 第42页 |
·试剂及耗材 | 第42页 |
·实验所需溶液的配制 | 第42-43页 |
2. 方法 | 第43-46页 |
·卵丘-卵母细胞复合体的采集和卵母细胞的体外成熟 | 第43页 |
·绒山羊卵母细胞的孤雌激活 | 第43-44页 |
·绒山羊的体细胞核移植 | 第44-45页 |
·绒山羊转基因胚胎的PCR鉴定 | 第45页 |
·转基因胚胎荧光观察 | 第45-46页 |
3. 结果 | 第46-49页 |
·绒山羊卵母细胞的孤雌激活 | 第46-47页 |
·绒山羊的转基因体细胞核移植 | 第47-48页 |
·绒山羊转基因胚胎的PCR鉴定 | 第48-49页 |
4. 讨论 | 第49-52页 |
·绒山羊卵母细胞的孤雌激活 | 第49-50页 |
·绒山羊的转基因体细胞核移植 | 第50-51页 |
·转基因克隆胚胎的外源基因表达 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-54页 |
第四章 转基因绒山羊的生产与PCR鉴定 | 第54-65页 |
1. 材料 | 第54-55页 |
·主要仪器设备 | 第54页 |
·活体材料 | 第54-55页 |
·试剂及耗材 | 第55页 |
2. 方法 | 第55-60页 |
·转基因绒山羊胚胎的胚胎移植 | 第55页 |
·转基因绒山羊羔羊的外源基因的PCR鉴定 | 第55-60页 |
3. 结果 | 第60-62页 |
·转基因绒山羊胚胎的胚胎移植及产羔 | 第60页 |
·转基因绒山羊羔羊的外源基因的PCR鉴定 | 第60-62页 |
4. 讨论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-65页 |
结论 | 第65-67页 |
图版1 | 第67-68页 |
图版2 | 第68-70页 |
第二部分 文献综述 | 第70-93页 |
参考文献 | 第87-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
攻读学位期间已发表学术论文 | 第94页 |