| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-30页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒病原学研究 | 第14-23页 |
| 1 一般特性和分类地位 | 第14-15页 |
| 2 培养特性 | 第15-16页 |
| 3 分子生物学特征 | 第16-20页 |
| ·基因组结构 | 第16-17页 |
| ·主要蛋白及功能 | 第17-19页 |
| ·遗传变异与抗原多样性 | 第19-20页 |
| 4 发病机制 | 第20-21页 |
| 5 分子流行病学 | 第21-23页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征诊断与控制技术研究 | 第23-30页 |
| 1 猪繁殖与呼吸综合征诊断 | 第23-27页 |
| ·临床症状与病理变化 | 第23-24页 |
| ·临床症状 | 第23-24页 |
| ·病理变化 | 第24页 |
| ·病原的检测 | 第24-26页 |
| ·病毒分离 | 第24-25页 |
| ·病毒抗原检测 | 第25页 |
| ·分子生物学诊断 | 第25-26页 |
| ·血清学诊断 | 第26-27页 |
| ·免疫过氧化物酶单层试验(IPMA) | 第26页 |
| ·间接荧光抗体试验(IFA) | 第26页 |
| ·血清中和试(SN) | 第26-27页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第27页 |
| 2 猪繁殖与呼吸综合征控制技术 | 第27-30页 |
| ·免疫预防 | 第27-28页 |
| ·综合防治 | 第28-30页 |
| 第二部分 实验内容 | 第30-60页 |
| 第一章 美洲型与欧洲型PRRSV的RT-PCR鉴别检测方法的建立 | 第31-42页 |
| 摘要 | 第31-32页 |
| 1 材料与方法 | 第32-37页 |
| ·PRRSV弱毒疫苗毒株 | 第32页 |
| ·组织病料的采集 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·引物设计与合成 | 第33-34页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第34页 |
| ·RT-PCR | 第34-35页 |
| ·反转录(RT) | 第34页 |
| ·PCR | 第34-35页 |
| ·PRRSV弱毒疫苗毒株的RT-PCR鉴别检测 | 第35页 |
| ·RT-PCR检测PRRSV核酸的特异性 | 第35页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第35-37页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第35-36页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第36页 |
| ·pMD18-T载体与纯化PCR产物的连接反应 | 第36-37页 |
| ·连接产物的转化与蓝白斑筛选阳性克隆 | 第37页 |
| ·PCR鉴定 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-40页 |
| ·PRRSV-US和PRRSV-EU以及疫苗混合样本的RT-PCR鉴别检测 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR检测PRRSV核酸的特异性 | 第38页 |
| ·组织病料中PRRSV的RT-PCR鉴别检测 | 第38页 |
| ·PCR产物测序及序列分析 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 第二章 华东地区部分猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查 | 第42-60页 |
| 摘要 | 第42-43页 |
| 1 材料与方法 | 第43-48页 |
| ·PRRSV毒株 | 第43页 |
| ·载体和菌种 | 第43-45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·病料的采集 | 第45-46页 |
| ·引物设计与合成 | 第46-47页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第47页 |
| ·RT-PCR | 第47页 |
| ·反转录(RT) | 第47页 |
| ·PCR | 第47页 |
| ·PRRS阳性组织病料中PRRSV ORF5基因的扩增 | 第47页 |
| ·PCR产物的测序 | 第47-48页 |
| ·序列分析 | 第48页 |
| 2 结果 | 第48-57页 |
| ·PRRS阳性组织病料中PRRSV ORF5基因的扩增与测序 | 第48页 |
| ·PRRSV ORF5基因序列同源性分析 | 第48-50页 |
| ·浙江省部分猪场美洲型PRRSV毒株遗传进化关系 | 第50-51页 |
| ·浙江省部分美洲型PRRSV毒株与国内外PRRSV毒株遗传进化关系 | 第51-53页 |
| ·华东地区部分猪场欧洲型PRRSV毒株遗传进化关系 | 第53页 |
| ·华东地区部分猪场PRRSV ORF5基因编码的氨基酸变异分析 | 第53-57页 |
| 3 讨论 | 第57-60页 |
| 结论与建议 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录 常用试剂及缓冲液 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
