闽江福州段水体病毒的检测
中文摘要 | 第1-9页 |
1. 前言 | 第9-26页 |
1.1 水体病毒的种类危害 | 第9-12页 |
1.1.1 水体中的动物病毒 | 第9-11页 |
1.1.2 水体中的植物病毒 | 第11-12页 |
1.2 国内外研究现状 | 第12-26页 |
1.2.1 概述 | 第12-14页 |
1.2.2 水样的浓缩 | 第14-16页 |
1.2.2.1 水样的浓缩方法概述 | 第14-15页 |
1.2.2.2 水样浓缩方法的结合 | 第15-16页 |
1.2.3 水体病毒的检测方法 | 第16-23页 |
1.2.3.1 指示植物法 | 第16页 |
1.2.3.2 细胞培养法 | 第16-18页 |
1.2.3.3 分子生物学方法 | 第18-23页 |
1.2.4 病毒的定量 | 第23-24页 |
1.3. 本项目研究的目的和意义 | 第24-26页 |
2. 材料和方法 | 第26-42页 |
2.1 材料 | 第26-27页 |
2.1.1 水样 | 第26页 |
2.1.2 烟草品种 | 第26页 |
2.1.3 TMV及其抗血清 | 第26页 |
2.1.4 菌株 | 第26页 |
2.1.5 质粒 | 第26页 |
2.1.6 引物 | 第26-27页 |
2.1.7 试剂及酶类 | 第27页 |
2.2 方法 | 第27-42页 |
2.2.1 水样的浓缩 | 第27-28页 |
2.2.2 摩擦接种 | 第28页 |
2.2.3 病毒提取 | 第28-30页 |
2.2.4 核酸提取 | 第30-33页 |
2.2.4.1 从植物中提取核酸 | 第30-33页 |
2.2.4.2 从提纯的病毒中提取核酸 | 第33页 |
2.2.4.3 从浓缩水样中提取核酸 | 第33页 |
2.2.5 电镜观察(负染) | 第33-34页 |
2.2.6 ELISA | 第34-36页 |
2.2.7 RT-PCR | 第36-38页 |
2.2.7.1 反转录 | 第36页 |
2.2.7.2 PCR | 第36-38页 |
2.2.8 PCR产物的回收 | 第38页 |
2.2.9 克隆 | 第38-42页 |
2.2.9.1 连接 | 第38页 |
2.2.9.2 感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
2.2.9.3 转化 | 第39-40页 |
2.2.9.4 质粒提取 | 第40-41页 |
2.2.9.5 质粒酶切 | 第41-42页 |
3. 结果和分析 | 第42-59页 |
3.1 水样的采集和浓缩 | 第42-43页 |
3.2 水体中植物病毒的检测 | 第43-54页 |
3.2.1 直接检测—RT-PCR法 | 第43-47页 |
3.2.1.1 水样中核酸的提取 | 第43-44页 |
3.2.1.2 RT-PCR检测 | 第44-47页 |
3.2.2 间接检测 | 第47-54页 |
3.2.2.1 摩擦接种 | 第47-49页 |
3.2.2.2 电镜观察(负染) | 第49页 |
3.2.2.3 ELISA检测 | 第49-53页 |
3.2.2.4 RT-PCR检测 | 第53-54页 |
3.3 水体中动物病毒的检测初探 | 第54-59页 |
3.3.1 肠道病毒 | 第54-57页 |
3.3.2 轮状病毒 | 第57-59页 |
4. 讨论 | 第59-66页 |
4.1 水体病毒研究中模式对象的选取 | 第59页 |
4.2 可行的水体病毒检测方法 | 第59-60页 |
4.2.1 直接检测方法 | 第59-60页 |
4.2.2 间接检测方法 | 第60页 |
4.3 水样浓缩方法的选择 | 第60-61页 |
4.4 核酸提取方法的比较 | 第61-63页 |
4.4.1 植物组织中核酸提取方法的比较 | 第61-62页 |
4.4.2 浓缩水样中核酸提取方法的比较 | 第62-63页 |
4.5 水体中植物病毒——TMV的检测 | 第63-65页 |
4.6 水体中动物病毒的检测 | 第65页 |
4.7 小结 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
附录一 缩写词表 | 第75-77页 |
附录二 研究较多的水体病毒 | 第77页 |