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闽江福州段水体病毒的检测

中文摘要第1-9页
1. 前言第9-26页
 1.1 水体病毒的种类危害第9-12页
  1.1.1 水体中的动物病毒第9-11页
  1.1.2 水体中的植物病毒第11-12页
 1.2 国内外研究现状第12-26页
  1.2.1 概述第12-14页
  1.2.2 水样的浓缩第14-16页
   1.2.2.1 水样的浓缩方法概述第14-15页
   1.2.2.2 水样浓缩方法的结合第15-16页
  1.2.3 水体病毒的检测方法第16-23页
   1.2.3.1 指示植物法第16页
   1.2.3.2 细胞培养法第16-18页
   1.2.3.3 分子生物学方法第18-23页
  1.2.4 病毒的定量第23-24页
  1.3. 本项目研究的目的和意义第24-26页
2. 材料和方法第26-42页
 2.1 材料第26-27页
  2.1.1 水样第26页
  2.1.2 烟草品种第26页
  2.1.3 TMV及其抗血清第26页
  2.1.4 菌株第26页
  2.1.5 质粒第26页
  2.1.6 引物第26-27页
  2.1.7 试剂及酶类第27页
 2.2 方法第27-42页
  2.2.1 水样的浓缩第27-28页
  2.2.2 摩擦接种第28页
  2.2.3 病毒提取第28-30页
  2.2.4 核酸提取第30-33页
   2.2.4.1 从植物中提取核酸第30-33页
   2.2.4.2 从提纯的病毒中提取核酸第33页
   2.2.4.3 从浓缩水样中提取核酸第33页
  2.2.5 电镜观察(负染)第33-34页
  2.2.6 ELISA第34-36页
  2.2.7 RT-PCR第36-38页
   2.2.7.1 反转录第36页
   2.2.7.2 PCR第36-38页
  2.2.8 PCR产物的回收第38页
  2.2.9 克隆第38-42页
   2.2.9.1 连接第38页
   2.2.9.2 感受态细胞的制备第38-39页
   2.2.9.3 转化第39-40页
   2.2.9.4 质粒提取第40-41页
   2.2.9.5 质粒酶切第41-42页
3. 结果和分析第42-59页
 3.1 水样的采集和浓缩第42-43页
 3.2 水体中植物病毒的检测第43-54页
  3.2.1 直接检测—RT-PCR法第43-47页
   3.2.1.1 水样中核酸的提取第43-44页
   3.2.1.2 RT-PCR检测第44-47页
  3.2.2 间接检测第47-54页
   3.2.2.1 摩擦接种第47-49页
   3.2.2.2 电镜观察(负染)第49页
   3.2.2.3 ELISA检测第49-53页
   3.2.2.4 RT-PCR检测第53-54页
 3.3 水体中动物病毒的检测初探第54-59页
  3.3.1 肠道病毒第54-57页
  3.3.2 轮状病毒第57-59页
4. 讨论第59-66页
 4.1 水体病毒研究中模式对象的选取第59页
 4.2 可行的水体病毒检测方法第59-60页
  4.2.1 直接检测方法第59-60页
  4.2.2 间接检测方法第60页
 4.3 水样浓缩方法的选择第60-61页
 4.4 核酸提取方法的比较第61-63页
  4.4.1 植物组织中核酸提取方法的比较第61-62页
  4.4.2 浓缩水样中核酸提取方法的比较第62-63页
 4.5 水体中植物病毒——TMV的检测第63-65页
 4.6 水体中动物病毒的检测第65页
 4.7 小结第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
附录一 缩写词表第75-77页
附录二 研究较多的水体病毒第77页

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