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SSH筛选济宁青山羊性早熟相关基因及KiSS-1、GPR54、Lin28B基因的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第一章 引言第16-29页
   ·初情期第16-22页
     ·初情期定义第16页
     ·判断初情期的方法第16页
     ·遗传参数:遗传力、遗传相关和重复力第16-17页
     ·青春期的神经内分泌第17-19页
     ·青春期的调控机制第19-22页
   ·KiSS-1 和 GPR54 基因研究进展第22-25页
     ·基因概况第22页
     ·表达情况第22-23页
     ·功能第23-25页
   ·Lin28B 基因研究进展第25-28页
     ·基因概况第25-26页
     ·表达情况第26页
     ·功能第26-28页
   ·本研究的目的与意义第28-29页
第二章 抑制消减杂交筛选济宁青山羊性早熟相关基因第29-71页
   ·实验材料第29-30页
     ·实验动物和样品采集第29页
     ·克隆用载体和菌株第29页
     ·主要仪器和设备第29-30页
     ·抑制消减杂交所用试剂盒及主要试剂第30页
     ·引物序列第30页
     ·主要数据库第30页
   ·实验方法第30-42页
     ·主要试剂配制第30-31页
     ·总RNA 制备第31页
     ·mRNA 提取第31-33页
     ·RNA 质量和浓度检测第33页
     ·抑制消减杂交第33-40页
     ·消减文库构建第40-41页
     ·阳性克隆的测序第41页
     ·差异表达EST 序列生物信息学分析第41-42页
   ·实验结果与分析第42-68页
     ·总RNA 提取、Poly A ~+ RNA 纯化及检测第42-43页
     ·双链cDNA(dscDNA)合成与酶切第43-44页
     ·接头连接效率检测第44页
     ·消减产物的PCR 扩增第44-45页
     ·消减效率检测第45-46页
     ·消减文库中插入片段的PCR 鉴定第46-47页
     ·各组消减产物克隆测序及生物信息学分析第47-66页
     ·重要候选基因第66-68页
   ·讨论第68-70页
     ·关于抑制消减杂交第68-69页
     ·关于抑制消减杂交组设计第69页
     ·差异表达基因第69-70页
   ·小结第70-71页
第三章 性早熟候选基因KiSS-1的研究第71-89页
   ·实验材料第71-72页
     ·实验动物与样品采集第71页
     ·克隆载体与菌株第71页
     ·重要仪器与设备第71页
     ·主要酶和试剂第71页
     ·主要数据库和生物软件第71-72页
   ·实验方法第72-76页
     ·主要试剂配制的方法第72页
     ·血液基因组的提取第72-73页
     ·引物设计第73页
     ·目的片段的扩增及检测第73-74页
     ·克隆与测序第74-75页
     ·序列的生物信息学分析第75页
     ·多态性扫描和检测第75页
     ·统计分析第75-76页
   ·实验结果第76-87页
     ·山羊KiSS-1 基因序列分析第76-78页
     ·多态性检测第78-82页
     ·KiSS-1 基因在不同山羊品种中的遗传多态性第82-85页
     ·不同山羊品种KiSS-1 基因型分布差异检验第85-86页
     ·固定效应对济宁青山羊产羔数的影响第86-87页
   ·讨论第87-88页
     ·山羊 KiSS-1 基因序列第87页
     ·山羊 KiSS-1 基因多态性第87页
     ·山羊 KiSS-1 基因和性早熟的关系第87-88页
     ·山羊 KiSS-1 基因和产羔数的关系第88页
   ·小结第88-89页
第四章 性早熟候选基因GPR54 的研究第89-101页
   ·实验材料第89页
     ·实验动物与样品采集第89页
     ·菌株和载体第89页
     ·主要仪器和设备第89页
     ·主要酶和试剂第89页
     ·主要数据库及生物软件第89页
   ·实验方法第89-91页
     ·常用试剂的配制第89页
     ·血液基因组的提取第89-90页
     ·引物设计第90页
     ·目的片段的扩增及检测第90-91页
     ·克隆和测序第91页
     ·序列生物信息学分析第91页
     ·多态性扫描和检测第91页
     ·统计分析第91页
   ·实验结果第91-98页
     ·山羊 GPR54 基因序列克隆及分析第91-93页
     ·多态性检测第93-95页
     ·GPR54 基因在不同山羊品种中的遗传多态性第95-96页
     ·不同山羊品种GPR54 基因型分布差异检验第96-97页
     ·固定效应对济宁青山羊产羔数的影响第97-98页
   ·讨论第98-100页
     ·山羊 GPR54 基因序列第98页
     ·山羊 GPR54 基因多态性第98-99页
     ·山羊 GPR54 基因和性早熟的关系第99页
     ·山羊 GPR54 基因和产羔数的关系第99-100页
   ·小结第100-101页
第五章 性早熟候选基因Lin28B 的研究第101-130页
   ·实验材料第101页
     ·实验动物与样品采集第101页
     ·菌株和载体第101页
     ·主要仪器和设备第101页
     ·主要酶和试剂第101页
     ·主要数据库及生物软件第101页
   ·实验方法第101-106页
     ·常用试剂的配制第101-102页
     ·血液基因组的提取第102页
     ·引物设计第102-104页
     ·目的片段的扩增及检测第104-105页
     ·克隆和测序第105页
     ·序列生物信息学分析第105页
     ·多态性检测第105页
     ·统计分析第105-106页
   ·实验结果第106-128页
     ·山羊Lin28B 基因序列克隆及分析第106-109页
     ·山羊 Lin28B 基因多态性检测第109页
     ·Lin28B 基因在不同山羊品种中的遗传多态性第109-119页
     ·不同山羊品种中Lin28B 基因型分布差异检验第119-126页
     ·Lin28B 基因与济宁青山羊产羔数的关系第126-128页
   ·讨论第128-129页
     ·山羊 Lin28B 基因序列第128页
     ·山羊 Lin28B 基因多态性第128-129页
     ·山羊 Lin28B 基因与山羊性早熟的关系第129页
     ·山羊 Lin28B 基因与济宁青山羊产羔数的关系第129页
   ·小结第129-130页
结论第130-131页
参考文献第131-144页
致谢第144-145页
作者简介第145页

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