摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
1 引言 | 第9-19页 |
·鸡大肠杆菌病的概述 | 第9-11页 |
·流行特点 | 第9页 |
·发病原因 | 第9-10页 |
·临床症状 | 第10页 |
·病理变化 | 第10页 |
·诊断与预防 | 第10-11页 |
·大肠杆菌的主要致病因子 | 第11-15页 |
·E.coli 菌毛 | 第11-14页 |
·毒素 | 第14页 |
·外膜蛋白及其他致病因素 | 第14-15页 |
·Ⅰ型菌毛的基因簇结构及其功能 | 第15-18页 |
·亚单位FimA | 第15-16页 |
·亚单位FimB 和FimE | 第16页 |
·亚单位FimD | 第16页 |
·亚单位FimF、FimG、FimH | 第16页 |
·亚单位FimI | 第16-17页 |
·FimC 的研究进展 | 第17-18页 |
·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
2 材料和方法 | 第19-27页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·质粒和菌株 | 第19页 |
·实验动物 | 第19页 |
·酶类及主要试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·PCR 扩增引物 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-27页 |
·大肠杆菌O_2基因组DNA 的提取 | 第20-21页 |
·E.coli 02 fimC 基因及其左右翼序列的鉴定 | 第21-23页 |
·pCVD442::△fimC 重组自杀质粒的构建 | 第23-24页 |
·FimC 基因缺失突变菌株的构建 | 第24-26页 |
·菌毛表达实验 | 第26页 |
·与鸡气管粘膜的粘附实验 | 第26页 |
·雏鸡的毒力检测 | 第26-27页 |
3 结果 | 第27-35页 |
·E.COLI 02 FIMC 基因及其左右翼序列的鉴定 | 第27-28页 |
·L-fimC-R 基因的PCR 扩增与纯化 | 第27页 |
·pMD-L-fimC-R 的鉴定 | 第27页 |
·02 菌株L-fimC-R 基因序列测定及同源性比较 | 第27-28页 |
·PCVD442::△FIMC 自杀质粒的构建 | 第28-30页 |
·FimC 基因左右臂片段的扩增 | 第28页 |
·FimC 基因1716p 缺失片段的扩增 | 第28-29页 |
·pMD-△fimC 克隆载体的鉴定 | 第29页 |
·重组自杀质粒pCVD442::△fimC 的鉴定 | 第29-30页 |
·FIMC 基因缺失突变菌株的构建 | 第30-31页 |
·菌株O_2(pCVD442::△fimC)的筛选 | 第30页 |
·重组菌株O_2(△fimC)(Nal~R)的筛选 | 第30页 |
·O_2(△fimC)菌株的鉴定 | 第30-31页 |
·菌毛表达实验 | 第31页 |
·与鸡气管粘膜的粘附实验 | 第31页 |
·雏鸡的毒力检测 | 第31-35页 |
·亲本菌O_2最小致死量的测定 | 第31-32页 |
·雏鸡的致病性实验 | 第32-35页 |
4 讨论 | 第35-38页 |
·pCVD442 自杀载体的生物学功能 | 第35页 |
·缺失突变菌株的菌毛表达 | 第35-36页 |
·缺失突变菌株对鸡气管上皮的粘附特性 | 第36页 |
·FimC 基因的缺失对鸡大肠杆菌致病力的影响 | 第36-38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
附录 | 第45-55页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |