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鸡致病性大肠杆菌FimC基因缺失菌株的构建及其生物学特性的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
1 引言第9-19页
   ·鸡大肠杆菌病的概述第9-11页
     ·流行特点第9页
     ·发病原因第9-10页
     ·临床症状第10页
     ·病理变化第10页
     ·诊断与预防第10-11页
   ·大肠杆菌的主要致病因子第11-15页
     ·E.coli 菌毛第11-14页
     ·毒素第14页
     ·外膜蛋白及其他致病因素第14-15页
   ·Ⅰ型菌毛的基因簇结构及其功能第15-18页
     ·亚单位FimA第15-16页
     ·亚单位FimB 和FimE第16页
     ·亚单位FimD第16页
     ·亚单位FimF、FimG、FimH第16页
     ·亚单位FimI第16-17页
     ·FimC 的研究进展第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18-19页
2 材料和方法第19-27页
   ·实验材料第19-20页
     ·质粒和菌株第19页
     ·实验动物第19页
     ·酶类及主要试剂第19页
     ·主要仪器第19-20页
     ·PCR 扩增引物第20页
   ·实验方法第20-27页
     ·大肠杆菌O_2基因组DNA 的提取第20-21页
     ·E.coli 02 fimC 基因及其左右翼序列的鉴定第21-23页
     ·pCVD442::△fimC 重组自杀质粒的构建第23-24页
     ·FimC 基因缺失突变菌株的构建第24-26页
     ·菌毛表达实验第26页
     ·与鸡气管粘膜的粘附实验第26页
     ·雏鸡的毒力检测第26-27页
3 结果第27-35页
   ·E.COLI 02 FIMC 基因及其左右翼序列的鉴定第27-28页
     ·L-fimC-R 基因的PCR 扩增与纯化第27页
     ·pMD-L-fimC-R 的鉴定第27页
     ·02 菌株L-fimC-R 基因序列测定及同源性比较第27-28页
   ·PCVD442::△FIMC 自杀质粒的构建第28-30页
     ·FimC 基因左右臂片段的扩增第28页
     ·FimC 基因1716p 缺失片段的扩增第28-29页
     ·pMD-△fimC 克隆载体的鉴定第29页
     ·重组自杀质粒pCVD442::△fimC 的鉴定第29-30页
   ·FIMC 基因缺失突变菌株的构建第30-31页
     ·菌株O_2(pCVD442::△fimC)的筛选第30页
     ·重组菌株O_2(△fimC)(Nal~R)的筛选第30页
     ·O_2(△fimC)菌株的鉴定第30-31页
   ·菌毛表达实验第31页
   ·与鸡气管粘膜的粘附实验第31页
   ·雏鸡的毒力检测第31-35页
     ·亲本菌O_2最小致死量的测定第31-32页
     ·雏鸡的致病性实验第32-35页
4 讨论第35-38页
   ·pCVD442 自杀载体的生物学功能第35页
   ·缺失突变菌株的菌毛表达第35-36页
   ·缺失突变菌株对鸡气管上皮的粘附特性第36页
   ·FimC 基因的缺失对鸡大肠杆菌致病力的影响第36-38页
5 结论第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-45页
附录第45-55页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第55页

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